Name: generation of mesenchymal stem cells from human umbilical cord tissue and their differentiation into the skeletal muscle lineage
Uploaded: 2022-08-31T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of Mesenchymal Stem Cells from Human Umbilical Cord Tissue and their Differentiation into the Skeletal Muscle Lineage at JoVE.com

Vi takker Mr. Ojas Tikoo for deres hjelp med filming og videoproduksjon. Vi anerkjenner også hjelpen mottatt fra GARBH-Ini (Interdisciplinary Group on Advanced Research and Birth Outcome-DBT India) ansatte, sykepleiere og seniorforskere ved Gurugram Civil Hospital og Dr. Pallavi Kshetrapal for hjelp med logistikk. Dette arbeidet ble støttet av tilskudd tildelt Suchitra Gopinath fra Institutt for bioteknologi, India (BT/09/IYBA/2015; BT/PR29599/PFN/20/1393/2018).

Bruken av navlestrengsvev i denne studien ble godkjent av Institutional Committee for Stem Cell Research (IC-SCR), Institutional Ethics Committee, Translational Health Science and Technology Institute (IEC-THSTI), Institutional Ethics Committee of Civil Hospital, Gurugram, Haryana og Institutional Biosafety Committee, THSTI. Humane ledningsvevsprøver ble høstet fra terminleveranser på fødselstidspunktet. Informert skriftlig samtykke ble innhentet fra . Alle metoder ble utført i henhold til relevante retningslinjer o...

<ol>
	<li>Kuroda, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unique+multipotent+cells+in+adult+human+mesenchymal+cell+populations.">Unique multipotent cells in adult human mesenchymal cell populations.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (19), 8639-8643 (2010).</li><li>Troyer, D. L., Weiss, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wharton's+jelly-derived+cells+are+a+primitive+stromal+cell+population.">Wharton's jelly-derived cells are a primitive stromal cell population.</a> Stem Cells. 26 (3), 591-599 (2008).</li><li>Karahuseyinoglu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biology+of+stem+cells+in+human+umbilical+cord+stroma:+In+situ+and+in+vitro+surveys.">Biology of stem cells in human umbilical cord stroma: In situ and in vitro surveys.</a> Stem Cells. 25 (2), 319-331 (2007).</li><li>Kita, K., Gauglitz, G. G., Phan, T. T., Herndon, D. N., Jeschke, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+mesenchymal+stem+cells+from+the+sub-amniotic+human+umbilical+cord+lining+membrane.">Isolation and characterization of mesenchymal stem cells from the sub-amniotic human umbilical cord lining membrane.</a> Stem Cells and Development. 19 (4), 491-502 (2010).</li><li>Sarugaser, R., Lickorish, D., Baksh, D., Hosseini, M. M., Davies, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+umbilical+cord+perivascular+(HUCPV)+cells:+A+source+of+mesenchymal+progenitors.">Human umbilical cord perivascular (HUCPV) cells: A source of mesenchymal progenitors.</a> Stem Cells. 23 (2), 220-229 (2005).</li><li>Mishra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Umbilical+cord+tissue+is+a+robust+source+for+mesenchymal+stem+cells+with+enhanced+myogenic+differentiation+potential+compared+to+cord+blood.">Umbilical cord tissue is a robust source for mesenchymal stem cells with enhanced myogenic differentiation potential compared to cord blood.</a> Scientific Reports. 10 (1), 18978 (2020).</li><li>Lu, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+human+umbilical+cord+mesenchymal+stem+cells+with+hematopoiesis-supportive+function+and+other+potentials.">Isolation and characterization of human umbilical cord mesenchymal stem cells with hematopoiesis-supportive function and other potentials.</a> Haematologica. 91 (8), 1017-1026 (2006).</li><li>Seshareddy, K., Troyer, D., Weiss, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+to+isolate+mesenchymal-like+cells+from+Wharton's+Jelly+of+umbilical+cord.">Method to isolate mesenchymal-like cells from Wharton's Jelly of umbilical cord.</a> Methods in Cell Biology. 86, 101-119 (2008).</li><li>Sotiropoulou, P. A., Perez, S. A., Salagianni, M., Baxevanis, C. N., Papamichail, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+optimal+culture+conditions+for+clinical+scale+production+of+human+mesenchymal+stem+cells.">Characterization of the optimal culture conditions for clinical scale production of human mesenchymal stem cells.</a> Stem Cells. 24 (2), 462-471 (2006).</li><li>Yoon, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+explant-derived+and+enzymatic+digestion-derived+MSCs+and+the+growth+factors+from+Wharton's+jelly.">Comparison of explant-derived and enzymatic digestion-derived MSCs and the growth factors from Wharton's jelly.</a> BioMed Research International. 2013, 428726 (2013).</li><li>Ishige, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+mesenchymal+stem+cells+derived+from+arterial,+venous,+and+Wharton's+jelly+explants+of+human+umbilical+cord.">Comparison of mesenchymal stem cells derived from arterial, venous, and Wharton's jelly explants of human umbilical cord.</a> International Journal of Hematology. 90 (2), 261-269 (2009).</li><li>Chal, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+of+pluripotent+stem+cells+to+muscle+fiber+to+model+Duchenne+muscular+dystrophy.">Differentiation of pluripotent stem cells to muscle fiber to model Duchenne muscular dystrophy.</a> Nature Biotechnology. 33 (9), 962-969 (2015).</li></ol>

Kritiske trinn Et kritisk skritt i denne protokollen er innsamling av vev under aseptiske forhold, fra leveringstidspunktet til vedlikehold av sterile kulturer, for hele varigheten av forplantningen. Under ledningsoppsamling er det viktig at ledningen ikke berører noen ikke-sterilisert overflate og er eksternt vattstein med 70% etanol før oppsamling i rør som inneholder PBS supplert med antibiotika. Det er viktig å begrense tiden mellom ledningsoppsamling og behandling av vevet for uMSC-isolasjon....

Den menneskelige navlestrengen har blitt kreditert for å ha et robust reservoar av mesenchymale stamceller, som for tiden utforskes for regenerative terapier på grunn av deres robuste sprednings- og differensieringshastigheter, immunmodulerende egenskaper og evne til å generere celler fra alle de tre bakterielagene1. Navlestrengsvevet består av flere rom som navlestrengsblodet, navlestrengsunderen og Whartons gelé (WJ), som i seg selv omfatter tre utydelige regioner - perivascularsonen, den intervaskulære sonen og sub-amnion eller ledningsforingen (CL)2. Selv om uMSCer kan isoleres fra alle disse forskjellige regionene og bredt uttrykke viktige MSC-markører, er det ingen klarhet i om disse rommene inneholder samme populasjon av uMSCer eller viser forskjeller i differensieringspottencies3. Derfor krever protokoller for isolering av uMSCer en større presisjon i deres modus og isolasjonsområde, den robuste karakteriseringen av differensieringspotensialer, og til slutt en komparativ analyse fra forskjellige rom i ledningen. 
I denne sammenhengen har få studier vist forskjeller i uMSC proliferative og differensierende potensialer mellom ulike deler av ledningen. Av disse viste komparative analyser mellom uMSCer isolert fra CL- og WJ-regionene et større proliferativt potensial i CL-avledede uMSCer 3,4. I en egen studie presterte WJ-avledede uMSCer bedre i proliferasjonsanalyser sammenlignet med perivasculære celler (HUCPV)5. Ved å undersøke forskjeller mellom blodavledede uMSCer og hjertevevsavledede uMSCer uten vaskulær forurensning, ble det rapportert forskjellsuttrykk for viktige MSC-markører mellom de to rommene, samt økte spredningshastigheter i ledningsvevsavledede uMSCer6.
Av de flere studiene som undersøker differensieringspotensialene til uMSCer primært i vev av mesoderm-slekten som osteogen, adipogene og kondrogene avstamninger, har svært få gitt detaljerte protokoller for myogen differensiering og etterfølgende karakterisering, samt komparative analyser mellom ulike ledningsrom. I denne sammenhengen har vi utviklet en robust muskeldifferensieringsprotokoll og observert at ledningsvevsavledede uMSCer viser overlegne myogene differensieringsevner sammenlignet med ledningsblod6. Her er en trinnvis protokoll detaljert for isolering av uMSCer fra hele ledningsvevet uten celler forbundet med vaskulaturen, deres karakterisering og deres differensiering i den myogene avledningen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4&#39;,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>D1306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amphotericin B</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A2411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic solution 100x Liquid, endotoxin tested (10,000 U Penicillin and 10 mg Streptomycin/mL in 0.9% normal saline)</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>A001A-50mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-GAPDH antibody</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G8795</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-MyHC antibody (My32)</td>
			<td>Novus Biologicals</td>
			<td>NBP2-50401AF647</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-MyoD antibody (5.8A)</td>
			<td>Novus Biologicals</td>
			<td>NB100-56511</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Myogenin antibody (Clone F5D)</td>
			<td>Novus Biologicals</td>
			<td>NBP2-34616AF594</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Pax7 antibody</td>
			<td>DSHB</td>
			<td>DSHB-C1-576</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APC Mouse anti-human CD90 clone 5E10</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>559869</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen Type 1</td>
			<td>Merck</td>
			<td>C8919</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D (+) Glucose</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G7021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexamethasone</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>D4902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACSCanto II or FACSAria III</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum, qualified Brazil</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>10270106</td>
			<td>not to be heat-inactivated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human CD106 clone 51-10C9</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>551146</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human CD14 clone M5E2</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>557153</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human CD31 clone WM59</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>557508</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human CD34 clone 581</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555821</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human CD45 clone HI30</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555482</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human CD49D clone 9F10</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>560840</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human CD90 clone 5E10</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555595</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human HLA-A,B,C clone G46-2.6</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>557348</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human IgG clone G18-145</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555786</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FlowJo software</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G1264</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horse serum</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>RM1239</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrocortisone</td>
			<td>Merck</td>
			<td>H4001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td>Merck</td>
			<td>L2020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Alpha Modification without L-glutamine, ribo- and deoxyribonucleosides</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>SH30568.FS</td>
			<td>Basal medium for uMSCs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE Mouse anti-human CD105 clone 266</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>560839</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE Mouse anti-human CD44 clone 515</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>550989</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE Mouse anti-human CD49E clone llA1</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555617</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE Mouse anti-human IgG clone G18-145</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-Cy7 Mouse anti-human CD73 CLONE AD2</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>561258</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline (PBS), pH=7.4</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>M1866</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin/EDTA solution (1x 0.25% Trypsin and 0.02% EDTA in Hanks Balanced Salt Solution (HBSS)</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>TCL049-100mL</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of mesenchymal stem cells from human umbilical cord tissue and their differentiation into the skeletal muscle lineage

Å utforske det terapeutiske potensialet til mesenchymale stamceller er betinget av enkel isolasjon, styrke mot differensiering og kildens pålitelighet og robusthet. Vi beskriver her en trinnvis protokoll for isolering av mesenchymale stamceller fra humant navlestrengsvev (uMSCs), deres immunofenotyping og forplantning av slike kulturer over flere passasjer. I denne prosedyren er levedyktigheten til uMSCene høy fordi det ikke er noen enzymatisk fordøyelse. Videre sikrer fjerning av blodkar, inkludert navlestrengsarteriene og venen, at det ikke er forurensning av celler av endotel opprinnelse. Ved hjelp av strømningscytometri er uMSCer ved isolasjon CD45-CD34−, noe som indikerer fravær av celler fra den hematopoietiske avstamningen. Det er viktig at de uttrykker viktige overflatemarkører, CD105, CD90 og CD73. Ved etablering av kulturer beskriver denne artikkelen en effektiv metode for å indusere differensiering i disse uMSCene i skjelettmuskellinjen. En detaljert analyse av myogen progresjon i differensierte uMSCer avslører at uMSCs uttrykker Pax7, en markør for myogene forfedre i de første stadiene av differensiering, etterfulgt av uttrykket myoD og Myf5, og til slutt en terminal differensieringsmarkør, myosin tung kjede (MyHC).

Suksessen med isolasjon av uMSC fra ledningsvev er >95%, i motsetning til de dårlige suksessratene fra hel ledningsblod. Ved vellykket isolering av UMSCer viser FACS-analysen at alle cellene er CD34-CD45−CD105+CD90+. I komparativ analyse viser imidlertid uMSCer isolert fra ledningsblodvisning heterogene populasjoner, der en andel av cellene viser CD34 + CD45 + CD105 + (~ 15%). I tillegg er dobbeltpositive CD105+CD90+ fæ...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of Mesenchymal Stem Cells from Human Umbilical Cord Tissue and their Differentiation into the Skeletal Muscle Lineage at JoVE.com

Generation of Mesenchymal Stem Cells from Human Umbilical Cord Tissue and their Differentiation into the Skeletal Muscle Lineage

Vi beskriver en protokoll for isolering av mesenchymale stamceller fra humant navlestrengsvev og deres differensiering i skjelettmuskellinjen.

Generering av mesenchymale stamceller fra humant navlestrengsvev og deres differensiering i skjelettmuskelens avstamning

Exploring the therapeutic potential of mesenchymal stem cells is contingent upon the ease of isolation, potency toward differentiation, and the ...

Vi beskriver vår protokoll for å isolere mesenchymal stamcelle fra humant navlestrengsvev og en robust metode for å skille dem ut i skjelettmuskelavstamning. Denne teknikken lar oss isolere mesenchymale stamceller som har høy levedyktighet og varme, med liten eller ingen forurensning av celler av endotel opprinnelse og å indusere myogen differensiering effektivt i disse sykdommene. Ledningsslesjon og mucoidkonsistens gjør det vanskelig å håndtere ledningen.Vi viser hvordan man behandler ledningen, for ikke å skrape av Whartons gelé, og utelukke endotelceller fra befolkningen. Etter å ha samlet ledningsvevet på leveringstidspunktet, overfør ledningsvevsstykket fra oppsamlingsrøret til en 10 kvadratcentimeter vevskulturbehandlet tallerken, og vask vevet grundig med fersk PBS. For å ta vare på ledningssprengning og mucoid overflate, fest vevet med et par tang holdt i den ene hånden.Bruk en skalpell, skjær ledningsvevet vertikalt langs sin langsgående tilgang for å få to halve sylindriske stykker. På dette tidspunktet, observere navlestrenger og årer. Bruk en skalpell, fjern blodkarene ved å skrape dem av i en retning fra overflaten og skyll ledningsvevet i PBS for å fjerne alt gjenværende blod forbundet med vevet.Hakk hver halvdel av ledningsvevet i fragmenter på 0,5 kubikkcentimeter. Plasser fragmentene med den lysende overflaten vendt ned på parabolen og inkuber parabolen kort i 10 minutter. På slutten av inkubasjonen, tilsett 20 milliliter medium som inneholder MEM Alpha modifikasjon forsiktig langs sidene av parabolen som inneholder ledningsvevet.Forsikre deg om at utplantningene ikke løsnes fra orienteringen og legg til overflødig medium for å gjøre rede for en brøkdel som vevet utviser vil suge opp under inkubasjon. Legg deretter parabolen i inkubatoren i tre dager. Etter slutten av inkubasjonen, legg til friskt medium til kulturen og sørg for at kulturene er beskyttet mot støt og bevegelse av explants mens du håndterer oppvasken.Etter en uke, ved hjelp av sterile tang, fjern vevsfragmentene individuelt og kast dem ved hjelp av passende biofareposer for avhending. Behold det eksisterende mediet og tilsett 10 milliliter frisk vekstmedium. Erstatt vekstmediet hver fjerde dag til individuelle kolonier når en sammenløp på 70%Etter farging av cellene som beskrevet i manuskriptet, analyser de merkede cellene ved strømningscytometri, og bestem prosentandelen av CD105 CD90 positive og CD105 CD73 positive celler.Analyser POSITIVE CD105- og CD34 CD45-celler separat. Belegge vevskulturplaten med 0,01% kollagen og 20 mikrogram per milliliter laminin i PBS og plasser den på rockeren i minst fire timer ved romtemperatur. Etter inkubasjonen, fjern kollagenet og vask platen med PBS, og skriv deretter uMSCs ved 10.000 celler per kvadratcentimetertetthet i vekstmediet.Når cellene oppnår 70% samløp, aspirer vekstmediet og skyll kulturplaten to ganger med PBS. For å bestemme kinetikken til myogen progresjon, legg til M1 medium annenhver dag til kulturene og analyser uMSCer for uttrykket av pax7, MyoD, myogenin og myosin tung kjede på henholdsvis to dager, fire til fem dager, seks til syv dager og ti til fjorten dager. uMSCer viser uttrykket for CD105 og CD90, og uttrykker ikke hematopoietiske markører CD34 og CD45.UMSCene var også positive for uttrykket til uMSCs-markøren CD73, noe som indikerer at UMSCene uttrykte flere nøkkelmarkører. uMSCer viste uttrykk for pax7 i løpet av de to første dagene etter tillegg av M1, etterfulgt av MyoD-uttrykk i løpet av de første fire dagene av M1-tillegget. Celler uttrykker myogeninprotein ved seks dager med differensiering, etterfulgt av uttrykket av myosin tung kjede mellom 10 dager og 14 dager etter induksjon av differensiering.970 gener ble oppregulert som svar på induksjonen av myogen differensiering sammenlignet med de udifferensierte uMSCene. Mer myogene gener ble oppregulert i ledningsvev avledet uMSCs sammenlignet med ledningsblod avledet uMSCs. Både ledningsvev og ledningsblod viste oppregulering av gener relatert til cytoskeletale proteiner, assosiert med aktinbinding og sarkomermontering, transportører forbundet med kontraktil funksjon, muskelmassevedlikehold, kalsiumsignalering og enzymatisk funksjon.Samle vevet under aseptisk tilstand og opprettholde steril kultur. Ledningen skal feies eksternt med 70% etanol og behandles så raskt som mulig. Mange regenerative terapier krever et stort antall celler fra tidlige passasjer.Den kan også brukes som modell for å etterligne hele det tørre miljøet og reflektere postnatal metabolisme.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Isolation of Human Mesenchymal Stem Cells and their Cultivation on the Porous Bone Matrix

Isolering av menneskelige stamceller og deres Dyrking på Porøse Bone Matrix

Mesenchymal stem cells (MSCs) have a differentiation potential towards osteoblastic lineage when they are stimulated with soluble factors or specific ...

Isolation and Quantitative Immunocytochemical Characterization of Primary Myogenic Cells and Fibroblasts from Human Skeletal Muscle

Isolasjon og Kvantitativ immunocytokjemisk Karakterisering av Primære myogenic celler og fibroblaster fra Menneskelig Skeletal Muscle

The repair and regeneration of skeletal muscle requires the action of satellite cells, which are the resident muscle stem cells. These can be isolated ...

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

Analyse av Sebrafisk Larver Skeletal Muscle Integrity med Evans blå Dye

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Isolation and Expansion of Mesenchymal Stem/Stromal Cells Derived from Human Placenta Tissue

Isolasjon og utvidelse av Mesenchymale Stem / stromal celler avledet fra human placenta Tissue

Mesenchymal stem/stromal cells (MSC) are promising candidates for use in cell-based therapies. In most cases, therapeutic response appears to be cell-dose ...

Isolation and Characterization of Mesenchymal Stromal Cells from Human Umbilical Cord and Fetal Placenta

Isolering og karakterisering av Mesenchymale stromale celler fra human navlestreng og Fetal Placenta

The human umbilical cord (UC) and placenta are non-invasive, primitive and abundant sources of mesenchymal stromal cells (MSCs) that have increasingly ...

In Vitro Differentiation of Human Mesenchymal Stem Cells into Functional Cardiomyocyte-like Cells

In Vitro Differentiation of Human Mesenchymal Stem Cells into Functional Cardiomyocyte-like Cells

In Vitro Differensiering av menneskelige stamceller i funksjonelle Cardiomyocyte-lignende celler

Myocardial infarction and the subsequent ischemic cascade result in the extensive loss of cardiomyocytes, leading to congestive heart failure, the leading ...

Isolation of Endothelial Progenitor Cells from Human Umbilical Cord Blood

Isolering av endoteliale Progenitor celler fra menneskelige navlestrengsblod

The existence of endothelial progenitor cells (EPCs) in peripheral blood and its involvement in vasculogenesis was first reported by Ashara and ...

Identification of Skeletal Muscle Satellite Cells by Immunofluorescence with Pax7 and Laminin Antibodies

Identifikasjon av Skjelettmuskel satellitt celler av Immunofluorescence med Pax7 og Laminin antistoffer

Immunofluorescence is an effective method that helps to identify different cell types on tissue sections. In order to study the desired cell population, ...

Derivation and Differentiation of Canine Ovarian Mesenchymal Stem Cells

Avledning og differensiering av hjørnetann Ovarian Mesenchymal stamceller

Interest in mesenchymal stem cells (MSCs) has increased over the past decade due to their ease of isolation, expansion, and culture. Recently, studies ...