Name: generation of mesenchymal stem cells from human umbilical cord tissue and their differentiation into the skeletal muscle lineage
Uploaded: 2022-08-31T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of Mesenchymal Stem Cells from Human Umbilical Cord Tissue and their Differentiation into the Skeletal Muscle Lineage at JoVE.com

Vi tackar Ojas Tikoo för deras hjälp med filmning och videoproduktion. Vi erkänner också den hjälp som erhållits från GARBH-Ini (Interdisciplinary Group on Advanced Research and Birth Outcome-DBT India) personal, sjuksköterskor och högre forskningsansvariga vid Gurugram Civil Hospital och Dr. Pallavi Kshetrapal för hjälp med logistik. Detta arbete stöddes av bidrag till Suchitra Gopinath från Department of Biotechnology, Indien (BT/09/IYBA/2015; BT/PR29599/PFN/20/1393/2018).

Användningen av navelsträngsvävnad i denna studie godkändes av Institutional Committee for Stem Cell Research (IC-SCR), Institutional Ethics Committee, Translational Health Science and Technology Institute (IEC-THSTI), Institutional Ethics Committee of Civil Hospital, Gurugram, Haryana och Institutional Biosafety Committee, THSTI. Mänskliga navelsträngsvävnadsprover skördades från terminsförlossningar vid födelsetiden. Informerat skriftligt samtycke erhölls från försökspersoner . Alla metoder utfördes i e...

<ol>
	<li>Kuroda, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unique+multipotent+cells+in+adult+human+mesenchymal+cell+populations.">Unique multipotent cells in adult human mesenchymal cell populations.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (19), 8639-8643 (2010).</li><li>Troyer, D. L., Weiss, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wharton's+jelly-derived+cells+are+a+primitive+stromal+cell+population.">Wharton's jelly-derived cells are a primitive stromal cell population.</a> Stem Cells. 26 (3), 591-599 (2008).</li><li>Karahuseyinoglu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biology+of+stem+cells+in+human+umbilical+cord+stroma:+In+situ+and+in+vitro+surveys.">Biology of stem cells in human umbilical cord stroma: In situ and in vitro surveys.</a> Stem Cells. 25 (2), 319-331 (2007).</li><li>Kita, K., Gauglitz, G. G., Phan, T. T., Herndon, D. N., Jeschke, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+mesenchymal+stem+cells+from+the+sub-amniotic+human+umbilical+cord+lining+membrane.">Isolation and characterization of mesenchymal stem cells from the sub-amniotic human umbilical cord lining membrane.</a> Stem Cells and Development. 19 (4), 491-502 (2010).</li><li>Sarugaser, R., Lickorish, D., Baksh, D., Hosseini, M. M., Davies, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+umbilical+cord+perivascular+(HUCPV)+cells:+A+source+of+mesenchymal+progenitors.">Human umbilical cord perivascular (HUCPV) cells: A source of mesenchymal progenitors.</a> Stem Cells. 23 (2), 220-229 (2005).</li><li>Mishra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Umbilical+cord+tissue+is+a+robust+source+for+mesenchymal+stem+cells+with+enhanced+myogenic+differentiation+potential+compared+to+cord+blood.">Umbilical cord tissue is a robust source for mesenchymal stem cells with enhanced myogenic differentiation potential compared to cord blood.</a> Scientific Reports. 10 (1), 18978 (2020).</li><li>Lu, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+human+umbilical+cord+mesenchymal+stem+cells+with+hematopoiesis-supportive+function+and+other+potentials.">Isolation and characterization of human umbilical cord mesenchymal stem cells with hematopoiesis-supportive function and other potentials.</a> Haematologica. 91 (8), 1017-1026 (2006).</li><li>Seshareddy, K., Troyer, D., Weiss, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+to+isolate+mesenchymal-like+cells+from+Wharton's+Jelly+of+umbilical+cord.">Method to isolate mesenchymal-like cells from Wharton's Jelly of umbilical cord.</a> Methods in Cell Biology. 86, 101-119 (2008).</li><li>Sotiropoulou, P. A., Perez, S. A., Salagianni, M., Baxevanis, C. N., Papamichail, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+optimal+culture+conditions+for+clinical+scale+production+of+human+mesenchymal+stem+cells.">Characterization of the optimal culture conditions for clinical scale production of human mesenchymal stem cells.</a> Stem Cells. 24 (2), 462-471 (2006).</li><li>Yoon, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+explant-derived+and+enzymatic+digestion-derived+MSCs+and+the+growth+factors+from+Wharton's+jelly.">Comparison of explant-derived and enzymatic digestion-derived MSCs and the growth factors from Wharton's jelly.</a> BioMed Research International. 2013, 428726 (2013).</li><li>Ishige, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+mesenchymal+stem+cells+derived+from+arterial,+venous,+and+Wharton's+jelly+explants+of+human+umbilical+cord.">Comparison of mesenchymal stem cells derived from arterial, venous, and Wharton's jelly explants of human umbilical cord.</a> International Journal of Hematology. 90 (2), 261-269 (2009).</li><li>Chal, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+of+pluripotent+stem+cells+to+muscle+fiber+to+model+Duchenne+muscular+dystrophy.">Differentiation of pluripotent stem cells to muscle fiber to model Duchenne muscular dystrophy.</a> Nature Biotechnology. 33 (9), 962-969 (2015).</li></ol>

Kritiska steg Ett kritiskt steg i detta protokoll är insamling av vävnad under aseptiska förhållanden, från leveranstidpunkten till upprätthållandet av sterila kulturer, under hela förökningstiden. Under sladduppsamling är det viktigt att sladden inte vidrör någon icke-steriliserad yta och svabbas externt med 70% etanol innan den samlas i rör som innehåller PBS kompletterat med antibiotika. Det är viktigt att begränsa tiden mellan sladduppsamling och bearbetning av vävnaden för uMSC-...

Den mänskliga navelsträngen har krediterats för att ha en robust reservoar av mesenkymala stamceller, som för närvarande undersöks för regenerativa terapier på grund av deras robusta spridnings- och differentieringshastigheter, immunmodulerande egenskaper och förmåga att generera celler från alla de tre bakterielagren1. Navelsträngsvävnaden består av flera fack såsom navelsträngsblodet, navelvenens subendotel och Whartons gelé (WJ), som i sig omfattar tre otydliga regioner - den perivaskulära zonen, den intervaskulära zonen och sub-amnion eller sladdfodret (CL)2. Även om uMSC kan isoleras från alla dessa olika regioner och i stort sett uttrycka viktiga MSC-markörer, finns det ingen klarhet i om dessa fack innehåller samma population av uMSC eller visar skillnader i deras differentieringspotenser3. Därför kräver protokoll för isolering av uMSC en större precision i deras isoleringsläge och isoleringsregion, den robusta karakteriseringen av differentieringspotentialer och slutligen en jämförande analys från olika fack i sladden. 
I detta sammanhang har få studier visat skillnader i uMSC proliferativa och differentierande potentialer mellan olika delar av sladden. Av dessa visade jämförande analyser mellan uMSCs isolerade från CL- och WJ-regionerna en större proliferativ potential i CL-härledda uMSCs 3,4. I en separat studie presterade WJ-härledda uMSCs bättre i proliferationsanalyser jämfört med perivaskulära celler (HUCPV)5. Vid undersökning av skillnader mellan navelsträngsblod-härledda uMSC och navelsträngsvävnadsderiverade uMSC: er utan vaskulär kontaminering rapporterades differentiellt uttryck av viktiga MSC-markörer mellan de två facken, liksom ökade proliferationshastigheter i navelsträngsvävnadsderiverade uMSCs6.
Av de flera studier som undersöker differentieringspotentialerna hos uMSC, främst i vävnader i mesodermlinjen, såsom osteogena, adipogena och kondrogena släktlinjer, har mycket få tillhandahållit detaljerade protokoll för myogen differentiering och efterföljande karakterisering, liksom jämförande analyser mellan olika sladdfack. I detta sammanhang har vi utvecklat ett robust muskeldifferentieringsprotokoll och observerat att navelsträngsvävnadsderiverade uMSCs uppvisar överlägsen myogen differentieringsförmåga jämfört med navelsträngsblod6. Här beskrivs ett stegvis protokoll för isolering av uMSC från hela navelsträngsvävnaden utan celler associerade med vaskulaturen, deras karakterisering och deras differentiering till den myogena härstamningen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4&#39;,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>D1306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amphotericin B</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A2411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic solution 100x Liquid, endotoxin tested (10,000 U Penicillin and 10 mg Streptomycin/mL in 0.9% normal saline)</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>A001A-50mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-GAPDH antibody</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G8795</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-MyHC antibody (My32)</td>
			<td>Novus Biologicals</td>
			<td>NBP2-50401AF647</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-MyoD antibody (5.8A)</td>
			<td>Novus Biologicals</td>
			<td>NB100-56511</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Myogenin antibody (Clone F5D)</td>
			<td>Novus Biologicals</td>
			<td>NBP2-34616AF594</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Pax7 antibody</td>
			<td>DSHB</td>
			<td>DSHB-C1-576</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APC Mouse anti-human CD90 clone 5E10</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>559869</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen Type 1</td>
			<td>Merck</td>
			<td>C8919</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D (+) Glucose</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G7021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexamethasone</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>D4902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACSCanto II or FACSAria III</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum, qualified Brazil</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>10270106</td>
			<td>not to be heat-inactivated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human CD106 clone 51-10C9</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>551146</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human CD14 clone M5E2</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>557153</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human CD31 clone WM59</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>557508</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human CD34 clone 581</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555821</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human CD45 clone HI30</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555482</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human CD49D clone 9F10</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>560840</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human CD90 clone 5E10</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555595</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human HLA-A,B,C clone G46-2.6</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>557348</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC Mouse anti-human IgG clone G18-145</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555786</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FlowJo software</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G1264</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horse serum</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>RM1239</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrocortisone</td>
			<td>Merck</td>
			<td>H4001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td>Merck</td>
			<td>L2020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Alpha Modification without L-glutamine, ribo- and deoxyribonucleosides</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>SH30568.FS</td>
			<td>Basal medium for uMSCs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE Mouse anti-human CD105 clone 266</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>560839</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE Mouse anti-human CD44 clone 515</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>550989</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE Mouse anti-human CD49E clone llA1</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555617</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE Mouse anti-human IgG clone G18-145</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-Cy7 Mouse anti-human CD73 CLONE AD2</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>561258</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline (PBS), pH=7.4</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>M1866</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin/EDTA solution (1x 0.25% Trypsin and 0.02% EDTA in Hanks Balanced Salt Solution (HBSS)</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>TCL049-100mL</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of mesenchymal stem cells from human umbilical cord tissue and their differentiation into the skeletal muscle lineage

Att utforska den terapeutiska potentialen hos mesenkymala stamceller är beroende av enkel isolering, styrka mot differentiering och källans tillförlitlighet och robusthet. Vi beskriver här ett stegvis protokoll för isolering av mesenkymala stamceller från human navelsträngsvävnad (uMSC), deras immunofenotypning och förökning av sådana kulturer över flera passager. I denna procedur är livskraften hos uMSC: erna hög eftersom det inte finns någon enzymatisk matsmältning. Vidare säkerställer avlägsnandet av blodkärl, inklusive navelsträngsartärerna och venen, att det inte finns någon förorening av celler av endotelursprung. Med hjälp av flödescytometri är uMSC vid isolering CD45−CD34−, vilket indikerar en frånvaro av celler från den hematopoetiska härstamningen. Det är viktigt att de uttrycker viktiga ytmarkörer, CD105, CD90 och CD73. Vid etablering av kulturer beskriver detta dokument en effektiv metod för att inducera differentiering i dessa uMSC till skelettmuskelns härstamning. En detaljerad analys av myogen progression i differentierade uMSCs avslöjar att uMSCs uttrycker Pax7, en markör för myogena förfäder i de inledande stadierna av differentiering, följt av uttrycket av MyoD och Myf5, och slutligen en terminal differentieringsmarkör, myosin tung kedja (MyHC).

Framgången för isolering av uMSC från navelsträngsvävnad är >95%, till skillnad från de dåliga framgångsgraderna från helsträngsblod. Vid framgångsrik isolering av uMSC visar FACS-analys att alla celler är CD34 −CD45−CD105+CD90+. Men i jämförande analys visar uMSC isolerade från navelsträngsblod heterogena populationer, där en andel celler visar CD34 + CD45 + CD105 + (~ 15%). Dessutom är dubbelpositiva CD105 + C...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of Mesenchymal Stem Cells from Human Umbilical Cord Tissue and their Differentiation into the Skeletal Muscle Lineage at JoVE.com

Generation of Mesenchymal Stem Cells from Human Umbilical Cord Tissue and their Differentiation into the Skeletal Muscle Lineage

Vi beskriver ett protokoll för isolering av mesenkymala stamceller från mänsklig navelsträngsvävnad och deras differentiering till skelettmuskelns härstamning.

Generering av mesenkymala stamceller från mänsklig navelsträngsvävnad och deras differentiering till skelettmuskellinjen

Exploring the therapeutic potential of mesenchymal stem cells is contingent upon the ease of isolation, potency toward differentiation, and the ...

Vi beskriver vårt protokoll för att isolera mesenkymala stamceller från mänsklig navelsträngsvävnad och en robust metod för att differentiera dem till skelettmuskulaturens härstamning. Denna teknik gör det möjligt för oss att isolera mesenkymala stamceller som har hög livskraft och värme, med liten eller ingen kontaminering av celler av endotelursprung och att inducera myogen differentiering effektivt vid dessa sjukdomar. Sladdvridning och mucoidkonsistens gör det svårt att hantera sladden.Vi visar hur man bearbetar sladden, att inte skrapa bort Whartons gelé och utesluta endotelceller från befolkningen. Efter att ha samlat upp sladdvävnaden vid leveranstiden, överför sladdvävnadsbiten från uppsamlingsröret till en 10 kvadratcentimeter vävnadskulturbehandlad skål och tvätta vävnaden noggrant med färsk PBS. För att ta hand om sladdvridningen och mucoidytan, stift ner vävnaden med ett par pincett som hålls i ena handen.Använd en skalpell och skiva sladdvävnaden vertikalt längs dess längsgående åtkomst för att få två halvcylindriska bitar. Observera vid denna tidpunkt navelartärerna och venerna. Använd en skalpell, ta bort blodkärlen genom att skrapa bort dem i en riktning från ytan och skölj strängvävnaden i PBS för att ta bort allt kvarvarande blod som är associerat med vävnaden.Hacka varje hälft av sladdvävnaden i fragment på 0,5 kubikcentimeter. Placera fragmenten med den lysande ytan nedåt på skålen och inkubera skålen kort i 10 minuter. Vid slutet av inkubationen tillsätt 20 ml medium innehållande MEM Alpha-modifiering försiktigt längs sidorna av skålen som innehåller sladdvävnaden.Se till att explantaten inte lossnar från sin orientering och tillsätt överflödigt medium för att ta hänsyn till en bråkdel som vävnadsexplantaten kommer att suga upp under inkubationen. Placera sedan skålen i inkubatorn i tre dagar. Efter inkubationens slut, tillsätt färskt medium till kulturen och se till att kulturerna skyddas mot stötar och rörelse av explantsna under hantering av diskarna.Efter en vecka, med sterila pincett, ta bort vävnadsfragmenten individuellt och kassera dem med lämpliga biohazardpåsar för bortskaffande. Behåll det befintliga mediet och tillsätt 10 ml färskt tillväxtmedium. Byt ut tillväxtmediet var fjärde dag tills enskilda kolonier når en sammanflöde på 70% Efter färgning av cellerna enligt beskrivningen i manuskriptet, analysera de märkta cellerna med flödescytometri och bestäm procentandelen CD105 CD90 positiva och CD105 CD73 positiva celler.Analysera CD105-positiva och CD34 CD45-negativa celler separat. Täck vävnadsodlingsplattan med 0,01% kollagen och 20 mikrogram per milliliter laminin i PBS och placera den på vippan i minst fyra timmar vid rumstemperatur. Efter inkubationen, ta bort kollagenet och tvätta plattan med PBS, platta sedan uMSC vid 10 000 celler per kvadratcentimeter densitet i tillväxtmediet.När cellerna uppnår 70% sammanflöde, aspirera tillväxtmediet och skölj odlingsplattan två gånger med PBS. För att bestämma kinetiken för myogen progression, lägg till M1-medium varannan dag till kulturerna och analysera uMSC för uttryck av pax7, MyoD, myogenin och myosin tung kedja på två dagar, fyra till fem dagar, sex till sju dagar respektive tio till fjorton dagar. uMSCs visar uttrycket av CD105 och CD90 och uttrycker inte hematopoetiska markörer CD34 och CD45.UMSC var också positiva för uttrycket av uMSCs-markör CD73, vilket indikerar att uMSC uttryckte flera nyckelmarkörer. uMSCs visade uttryck av pax7 inom de första två dagarna efter tillsatsen av M1, följt av MyoD-uttryck inom de första fyra dagarna av M1-tillägg. Celler uttrycker myogeninprotein vid sex dagars differentiering, följt av uttrycket av myosin tung kedja mellan 10 dagar och 14 dagar efter induktion av differentiering.970 gener uppreglerades som svar på induktionen av myogen differentiering jämfört med de odifferentierade uMSC: erna. Fler myogena gener uppreglerades i navelsträngsvävnadsderiverade uMSC jämfört med emaSC i navelsträngsblod. Både navelsträngsvävnad och navelsträngsblod visade uppreglering av gener relaterade till cytoskelettproteiner, associerade med aktinbindning och sarkomermontering, transportörer associerade med kontraktil funktion, underhåll av muskelmassa, kalciumsignalering och enzymatisk funktion.Samla vävnaden under aseptiskt tillstånd och behåll steril kultur. Sladden ska svepas externt med 70% etanol och bearbetas så snabbt som möjligt. Många regenerativa terapier kräver ett stort antal celler från tidiga passager.Det kan också användas som en modell för att efterlikna hela den torra miljön och återspegla postnatal metabolism.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Isolation of Human Mesenchymal Stem Cells and their Cultivation on the Porous Bone Matrix

Isolering av Human mesenkymala stamceller och deras Odling på Porös Bone Matrix

Mesenchymal stem cells (MSCs) have a differentiation potential towards osteoblastic lineage when they are stimulated with soluble factors or specific ...

Isolation and Quantitative Immunocytochemical Characterization of Primary Myogenic Cells and Fibroblasts from Human Skeletal Muscle

Isolering och Kvantitativ Immuncytokemiska karakterisering av primära myogena celler och fibroblaster från Human skelettmuskulatur

The repair and regeneration of skeletal muscle requires the action of satellite cells, which are the resident muscle stem cells. These can be isolated ...

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

Analys av Zebrafish Larver skelettmuskulatur Integrity med Evans Blue Dye

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Isolation and Expansion of Mesenchymal Stem/Stromal Cells Derived from Human Placenta Tissue

Isolering och Expansion av mesenkymala stam / stromaceller celler från Human Placenta Tissue

Mesenchymal stem/stromal cells (MSC) are promising candidates for use in cell-based therapies. In most cases, therapeutic response appears to be cell-dose ...

Isolation and Characterization of Mesenchymal Stromal Cells from Human Umbilical Cord and Fetal Placenta

Isolering och karakterisering av mesenkymala stromala celler från human navelsträng och Fetal Placenta

The human umbilical cord (UC) and placenta are non-invasive, primitive and abundant sources of mesenchymal stromal cells (MSCs) that have increasingly ...

In Vitro Differentiation of Human Mesenchymal Stem Cells into Functional Cardiomyocyte-like Cells

In Vitro Differentiation of Human Mesenchymal Stem Cells into Functional Cardiomyocyte-like Cells

In Vitro Differentiering av humana mesenkymala stamceller till funktionella hjärtmuskelcellen-liknande celler

Myocardial infarction and the subsequent ischemic cascade result in the extensive loss of cardiomyocytes, leading to congestive heart failure, the leading ...

Isolation of Endothelial Progenitor Cells from Human Umbilical Cord Blood

Isolering av Endothelial stamceller från mänskliga navelsträngsblod

The existence of endothelial progenitor cells (EPCs) in peripheral blood and its involvement in vasculogenesis was first reported by Ashara and ...

Identification of Skeletal Muscle Satellite Cells by Immunofluorescence with Pax7 and Laminin Antibodies

Identifiering av skelettmuskulaturen satellit celler genom immunofluorescens med Pax7 och Laminin antikroppar

Immunofluorescence is an effective method that helps to identify different cell types on tissue sections. In order to study the desired cell population, ...

Derivation and Differentiation of Canine Ovarian Mesenchymal Stem Cells

Härledning och differentiering av hundarnas cystor mesenkymala stamceller

Interest in mesenchymal stem cells (MSCs) has increased over the past decade due to their ease of isolation, expansion, and culture. Recently, studies ...