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1.9K Views
•
11:34 min
May 10th, 2022
DOI :
10.3791/63761-v
Chapters
0:05
Introduction
0:50
Measuring the Sodium Taurocholate Co-Transporting Polypeptide (NTCP) Using Flow Cytometry
4:30
Anti-HBV (Hepatitis B Virus) Entry Assay
6:13
HBV (Hepatitis B Virus) -Cell Binding Assay
6:50
Taurocholic Acid Uptake Assay
7:34
Determination of Protein-Ligand Interactions Using Isothermal Titration Calorimetry
9:14
Results: Screening of Anti-Hepatitis B Virus Using Isothermal Titration Calorimetry
10:36
Conclusion
Transcript
このプロトコルは、候補抗HBV化合物が、特にNTCP結合をブロックすることによってウイルスの侵入を阻害するかどうかを検証するように設計されています。この技術は、HBVの侵入または感染の初期ステップが候補化合物によって中断される可能性があるかどうかを調査することを目的としています。手順を実演するのは、私の研究室のPSPの学生であるピヤノット・トンスリです。
タウロコール酸ナトリウム共輸送ポリペプチド(NTCP)の測定を開始するには、成熟肝細胞を8ミル以上のエチレンジアミン四酢酸ま
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Summary
等温滴定熱量測定を使用して、ウイルス侵入前後のライフサイクル段階を標的とする抗B型肝炎ウイルス(HBV)化合物をスクリーニングするためのプロトコルを提示し、宿主タウロコール酸ナトリウム共輸送ポリペプチドとの結合親和性(KD)を測定します。抗ウイルス効果は、ウイルスライフサイクルマーカー(cccDNA形成、転写、およびウイルス集合)の抑制によって決定されました。
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