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•
07:47 min
May 10th, 2022
DOI :
10.3791/63819-v
Chapters
0:04
Introduction
0:59
Assembly of the Microscopy Chamber
2:33
Imaging Microtubule Bundles with 3‐Color TIRF
3:41
Performing Optical Trap Experiments on Microtubule Bundles
6:02
Results: Measuring Force Production by Kinesin‐5 and Frictional Force by PRC1
7:06
Conclusion
Transcript
私たちのプロトコルにより、研究者は精製された成分から細胞骨格モチーフを構築し、これらのネットワークが生成する力を直接測定して、細胞のこれらの機械的構成要素が健康な状態と病状の両方でどのように機能するかを理解することができます。この方法により、力を定量化し、これらの数値を直接相関させて、タンパク質の濃度や密度など、関与するタンパク質のパラメータを維持することができます。セル内では一般的に取得できないパラメータ。
この方法は、有糸分裂や神経発達に関与するものなど、あらゆるタイプの細
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Summary
ここでは、微小管束を in vitroで 再構成し、光学トラップと全反射蛍光顕微鏡を同時に使用して、微小管束に及ぼされる力を直接定量化するためのプロトコルを紹介します。このアッセイは、活性微小管ネットワーク内のタンパク質アンサンブルによって生成される力と変位のナノスケールレベルの測定を可能にします。
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