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•
08:25 min
April 21st, 2022
DOI :
10.3791/63874-v
Chapters
0:05
Introduction
1:04
Tissue Preparation
2:21
Fine Dissection of the Cochlea
4:39
Synapse Quantification
6:52
Results: Immunostaining of the Processed Cochleae
7:50
Conclusion
Transcript
このプロトコルは、すべての年齢のスナネズミの蝸牛におけるシナプス完全性の評価を可能にする。これは、特に加齢による聴覚障害の基礎研究にとって重要です。このプロトコルは比較的高速で、蝸牛に沿ったいくつかの場所から定量データを生成します。
さらに、自己蛍光消光剤を用いて組織の老化という特定の問題に対処する。シナプスの変性は、蝸牛における機能喪失の最も初期の徴候である。それを定量することは、シナプタパシーのための非侵襲的診断ツールの開発に向けた研究において重要なツールである。
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Summary
求心性シナプス構造および有毛細胞を免疫標識し、加齢組織における自己蛍光を消光し、蝸牛の長さを解剖および推定し、共焦点イメージングで得られた画像スタック中のシナプスを定量することによって、若年成人および加齢スナネズミ蝸牛を処理するためのプロトコールが提示される。
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