Name: induction of ocular surface inflammation and collection of involved tissues
Uploaded: 2022-08-04T13:10:00
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यह काम आंशिक रूप से जर्मन रिसर्च फाउंडेशन (डीएफजी) 2886 पेंडोरा प्रोजेक्ट-नंबर बी 3 द्वारा समर्थित था; एससीएचए 2040/1-1; एमयू 4240/2-1; सीआरसी 1181 (सी 03); टीआरआर 241 (बी 04), एच 2020-एफटोपेन-2018-2020 परियोजना 861878, और वोक्सवैगन-स्टिफटंग (अनुदान 97744) द्वारा एमएच को।

जानवरों से जुड़ी सभी प्रक्रियाओं को पशु कल्याण पर संस्थागत दिशानिर्देशों के अनुसार आयोजित किया गया था और फ्रेडरिक-अलेक्जेंडर-यूनिवर्सिटी एर्लांगेन-नूर्नबर्ग (एफएयू) (परमिट संख्या: 55.2.2-2532-2-1217) के पशु कल्...

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	<li>Gilbard, J. P., Rossi, S. R., Heyda, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tear+film+and+ocular+surface+changes+after+closure+of+the+meibomian+gland+orifices+in+the+rabbit.">Tear film and ocular surface changes after closure of the meibomian gland orifices in the rabbit.</a> Ophthalmology. 96 (8), 1180-1186 (1989).</li><li>Mishima, S., Maurice, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+oily+layer+of+the+tear+film+and+evaporation+from+the+corneal+surface.">The oily layer of the tear film and evaporation from the corneal surface.</a> Experimental Eye Research. 1, 39-45 (1961).</li><li>Gipson, I. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ocular+surface:+The+challenge+to+enable+and+protect+vision:+The+Friedenwald+lecture.">The ocular surface: The challenge to enable and protect vision: The Friedenwald lecture.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 48 (10), 4391-4398 (2007).</li><li>Hahn, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aggregated+neutrophil+extracellular+traps+resolve+inflammation+by+proteolysis+of+cytokines+and+chemokines+and+protection+from+antiproteases.">Aggregated neutrophil extracellular traps resolve inflammation by proteolysis of cytokines and chemokines and protection from antiproteases.</a> The FASEB Journal. 33 (1), 1401-1414 (2019).</li><li>Leppkes, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+occlusion+by+neutrophil+extracellular+traps+in+COVID-19.">Vascular occlusion by neutrophil extracellular traps in COVID-19.</a> EBioMedicine. 58, 102925 (2020).</li><li>Munoz, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps+initiate+gallstone+formation.">Neutrophil extracellular traps initiate gallstone formation.</a> Immunity. 51 (3), 443-450 (2019).</li><li>Schapher, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps+promote+the+development+and+growth+of+human+salivary+stones.">Neutrophil extracellular traps promote the development and growth of human salivary stones.</a> Cells. 9 (9), 2139 (2020).</li><li>Mahajan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Frontline+science:+Aggregated+neutrophil+extracellular+traps+prevent+inflammation+on+the+neutrophil-rich+ocular+surface.">Frontline science: Aggregated neutrophil extracellular traps prevent inflammation on the neutrophil-rich ocular surface.</a> Journal of Leukocyte Biology. 105 (6), 1087-1098 (2019).</li><li>DEWS Definition and Classification Subcommittee. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+definition+and+classification+of+dry+eye+disease:+Report+of+the+Definition+and+Classification+Subcommittee+of+the+International+Dry+Eye+Workshop.">The definition and classification of dry eye disease: Report of the Definition and Classification Subcommittee of the International Dry Eye Workshop.</a> The Ocular Surface. 5 (2), 75-92 (2007).</li><li>Nichols, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+international+workshop+on+meibomian+gland+dysfunction:+Executive+summary.">The international workshop on meibomian gland dysfunction: Executive summary.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (4), 1922-1929 (2011).</li><li>Mahajan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aggregated+neutrophil+extracellular+traps+occlude+Meibomian+glands+during+ocular+surface+inflammation.">Aggregated neutrophil extracellular traps occlude Meibomian glands during ocular surface inflammation.</a> The Ocular Surface. 20, 1-12 (2021).</li><li>Jester, B. E., Nien, C. J., Winkler, M., Brown, D. J., Jester, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Volumetric+reconstruction+of+the+mouse+meibomian+gland+using+high-resolution+nonlinear+optical+imaging.">Volumetric reconstruction of the mouse meibomian gland using high-resolution nonlinear optical imaging.</a> The Anatomical Record. 294 (2), 185-192 (2011).</li><li>Nien, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+changes+in+the+meibomian+gland.">Age-related changes in the meibomian gland.</a> Experimental Eye Research. 89 (6), 1021-1027 (2009).</li><li>Parfitt, G. J., Xie, Y., Geyfman, M., Brown, D. J., Jester, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absence+of+ductal+hyper-keratinization+in+mouse+age-related+meibomian+gland+dysfunction+(ARMGD).">Absence of ductal hyper-keratinization in mouse age-related meibomian gland dysfunction (ARMGD).</a> Aging. 5 (11), 825-834 (2013).</li><li>Lambert, R. W., Smith, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogenesis+of+blepharoconjunctivitis+complicating+13-cis-retinoic+acid+(isotretinoin)+therapy+in+a+laboratory+model.">Pathogenesis of blepharoconjunctivitis complicating 13-cis-retinoic acid (isotretinoin) therapy in a laboratory model.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 29 (10), 1559-1564 (1988).</li><li>Jester, J. V., Nicolaides, N., Kiss-Palvolgyi, I., Smith, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meibomian+gland+dysfunction.+II.+The+role+of+keratinization+in+a+rabbit+model+of+MGD.">Meibomian gland dysfunction. II. The role of keratinization in a rabbit model of MGD.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 30 (5), 936-945 (1989).</li><li>Jester, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+biomicroscopy+and+photography+of+meibomian+glands+in+a+rabbit+model+of+meibomian+gland+dysfunction.">In vivo biomicroscopy and photography of meibomian glands in a rabbit model of meibomian gland dysfunction.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 22 (5), 660-667 (1982).</li><li>Lambert, R., Smith, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperkeratinization+in+a+rabbit+model+of+meibomian+gland+dysfunction.">Hyperkeratinization in a rabbit model of meibomian gland dysfunction.</a> American Journal of Ophthalmology. 105 (6), 703-705 (1988).</li><li>Knop, E., Knop, N., Millar, T., Obata, H., Sullivan, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+international+workshop+on+meibomian+gland+dysfunction:+Report+of+the+subcommittee+on+anatomy,+physiology,+and+pathophysiology+of+the+meibomian+gland.">The international workshop on meibomian gland dysfunction: Report of the subcommittee on anatomy, physiology, and pathophysiology of the meibomian gland.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (4), 1938-1978 (2011).</li><li>Huang, W., Tourmouzis, K., Perry, H., Honkanen, R. A., Rigas, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+dry+eye+disease:+Useful,+varied+and+evolving+(Review).">Animal models of dry eye disease: Useful, varied and evolving (Review).</a> Experimental and Therapeutic Medicine. 22 (6), 1394 (2021).</li><li>Reyes, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+cause+obstruction+of+eyelid+sebaceous+glands+in+inflammatory+eye+disease+in+mice.">Neutrophils cause obstruction of eyelid sebaceous glands in inflammatory eye disease in mice.</a> Science Translational Medicine. 10 (451), (2018).</li><li>Knop, E., Korb, D. R., Blackie, C. A., Knop, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+lid+margin+is+an+underestimated+structure+for+preservation+of+ocular+surface+health+and+development+of+dry+eye+disease.">The lid margin is an underestimated structure for preservation of ocular surface health and development of dry eye disease.</a> Developments in Ophthalmology. 45, 108-122 (2010).</li><li>Knop, N., Knop, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meibomian+glands.+Part+I:+anatomy,+embryology+and+histology+of+the+Meibomian+glands.">Meibomian glands. Part I: anatomy, embryology and histology of the Meibomian glands.</a> Ophthalmologe. 106 (10), 872-883 (2009).</li><li>Nien, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+age+and+dysfunction+on+human+meibomian+glands.">Effects of age and dysfunction on human meibomian glands.</a> Archives of Ophthalmology. 129 (4), 462-469 (2011).</li><li>Lio, C. T., Dhanda, S. K., Bose, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cluster+analysis+of+dry+eye+disease+models+based+on+immune+cell+parameters+-+New+insight+into+therapeutic+perspective.">Cluster analysis of dry eye disease models based on immune cell parameters - New insight into therapeutic perspective.</a> Frontiers in Immunology. 11, 1930 (2020).</li><li>Nguyen, D. D., Luo, L. J., Lai, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermogels+containing+sulfated+hyaluronan+as+novel+topical+therapeutics+for+treatment+of+ocular+surface+inflammation.">Thermogels containing sulfated hyaluronan as novel topical therapeutics for treatment of ocular surface inflammation.</a> Materials Today Bio. 13, 100183 (2022).</li><li>Lin, P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alleviation+of+dry+eye+syndrome+with+one+dose+of+antioxidant,+anti-inflammatory,+and+mucoadhesive+lysine-carbonized+nanogels.">Alleviation of dry eye syndrome with one dose of antioxidant, anti-inflammatory, and mucoadhesive lysine-carbonized nanogels.</a> Acta Biomaterialia. 141, 140-150 (2022).</li><li>Yu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+beta+epithelial+sodium+channel+function+in+meibomian+glands+produces+pseudohypoaldosteronism+1-like+ocular+disease+in+mice.">Loss of beta epithelial sodium channel function in meibomian glands produces pseudohypoaldosteronism 1-like ocular disease in mice.</a> American Journal of Pathology. 188 (1), 95-110 (2018).</li><li>Mauris, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+CD147+results+in+impaired+epithelial+cell+differentiation+and+malformation+of+the+meibomian+gland.">Loss of CD147 results in impaired epithelial cell differentiation and malformation of the meibomian gland.</a> Cell Death &amp; Disease. 6 (4), 1726 (2015).</li><li>Ibrahim, O. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidative+stress+induced+age+dependent+meibomian+gland+dysfunction+in+Cu,+Zn-superoxide+dismutase-1+(Sod1)+knockout+mice.">Oxidative stress induced age dependent meibomian gland dysfunction in Cu, Zn-superoxide dismutase-1 (Sod1) knockout mice.</a> PloS One. 9 (7), 99328 (2014).</li><li>McMahon, A., Lu, H., Butovich, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+role+for+ELOVL4+in+the+mouse+meibomian+gland+and+sebocyte+cell+biology.">A role for ELOVL4 in the mouse meibomian gland and sebocyte cell biology.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 55 (5), 2832-2840 (2014).</li><li>Miyake, H., Oda, T., Katsuta, O., Seno, M., Nakamura, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meibomian+gland+dysfunction+model+in+hairless+mice+fed+a+special+diet+with+limited+lipid+content.">Meibomian gland dysfunction model in hairless mice fed a special diet with limited lipid content.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 57 (7), 3268-3275 (2016).</li><li>Schaumberg, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+international+workshop+on+meibomian+gland+dysfunction:+Report+of+the+subcommittee+on+the+epidemiology+of,+and+associated+risk+factors+for,+MGD.">The international workshop on meibomian gland dysfunction: Report of the subcommittee on the epidemiology of, and associated risk factors for, MGD.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (4), 1994-2005 (2011).</li><li>Lee, S. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+tear+cytokines+and+clinical+correlations+in+Sjogren+syndrome+dry+eye+patients+and+non-Sjogren+syndrome+dry+eye+patients.">Analysis of tear cytokines and clinical correlations in Sjogren syndrome dry eye patients and non-Sjogren syndrome dry eye patients.</a> American Journal of Ophthalmology. 156 (2), 247-253 (2013).</li><li>Nakae, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antigen-specific+T+cell+sensitization+is+impaired+in+IL-17-deficient+mice,+causing+suppression+of+allergic+cellular+and+humoral+responses.">Antigen-specific T cell sensitization is impaired in IL-17-deficient mice, causing suppression of allergic cellular and humoral responses.</a> Immunity. 17 (3), 375-387 (2002).</li><li>von Vietinghoff, S., Ley, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IL-17A+controls+IL-17F+production+and+maintains+blood+neutrophil+counts+in+mice.">IL-17A controls IL-17F production and maintains blood neutrophil counts in mice.</a> Journal of Immunology. 183 (2), 865-873 (2009).</li><li>Langrish, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IL-23+drives+a+pathogenic+T+cell+population+that+induces+autoimmune+inflammation.">IL-23 drives a pathogenic T cell population that induces autoimmune inflammation.</a> Journal of Experimental Medicine. 201 (2), 233-240 (2005).</li><li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-IL-23+therapy+inhibits+multiple+inflammatory+pathways+and+ameliorates+autoimmune+encephalomyelitis.">Anti-IL-23 therapy inhibits multiple inflammatory pathways and ameliorates autoimmune encephalomyelitis.</a> Journal of Clinical Investigation. 116 (5), 1317-1326 (2006).</li></ol>

मेइबोमियन ग्रंथियों का तैलीय स्राव एकस्वस्थ आंख के लिए बहुत महत्वपूर्ण है। हालांकि, एकत्रित न्यूट्रोफिल एक्स्ट्रासेल्युलर ट्रैप (एजीएनईटी) द्वारा इन वसामय ग्रंथियों की रुकावट जो दोनों पल?...

पलक झपकना कॉर्निया पर बिखरे हुए चिकनी आंसू फिल्म को फिर से भर देता है। ओकुलर सतह एपिथेलिया ओकुलर सतह पर आंसू फिल्म के वितरण और सही अभिविन्यास की सुविधा प्रदान करता है। म्यूसिन को कॉर्निया और नेत्रश्लेष्मला उपकला कोशिकाओं द्वारा प्रदान किया जाता है ताकि आंखों की सतह पर लैक्रिमल ग्रंथियों से आने वाली आंसू फिल्म के जलीय भाग को स्थिति में मदद मिल सके। अंत में, एमजी लिपिड का स्राव करता है जो एक कवर परत बनाता है जो आंसू फिल्म 1,2,3 के जलीय भाग के वाष्पीकरण को रोकता है। इस तरह, सभी ओकुलर अंगों के समन्वित कार्य ओकुलर सतह को हमलावर रोगजनकों या चोट से बचाते हैं और किसी भी दर्द या असुविधा के बिना क्रिस्टल स्पष्ट दृष्टि का समर्थन करते हैं।
एक स्वस्थ ओकुलर सतह में, ओकुलर फ्लोइंग डिस्चार्ज या आंखों की गठिया धूल, मृत उपकला कोशिकाओं, बैक्टीरिया, बलगम और प्रतिरक्षा कोशिकाओं को दूर करती है। समेकित न्यूट्रोफिल एक्स्ट्रासेल्युलर ट्रैप (एजीएनईटी) बाह्य क्रोमैटिन से बना एक जाल जैसा मैट्रिक्स तैयार करते हैं और इन घटकों को आंखों के गठिया में शामिल करते हैं। एजीजीएनईटी प्रो-भड़काऊ साइटोकिन्स और केमोकाइन्स के प्रोटियोलिटिक क्षरण द्वारासूजन को हल करते हैं। हालांकि, जब वे निष्क्रिय हो जाते हैं, तो ये असामान्य एग्जेएनईटी कोविड-195, पित्त पथरी6 और सियालोलिथियासिस7 में संवहनी अवरोधन जैसी बीमारियों के रोगजनन को चलाते हैं। इसी तरह, ओकुलर सतह पर एजीएनईटी एक सुरक्षात्मक भूमिका निभाते हैं और अत्यधिक उजागर सतह 8 की सूजन को हल करने में योगदान करतेहैं। या तो एक अतिरंजित गठन या ओकुलर सतह में एजीएनईटी की कमी आंसू फिल्म स्थिरता को खराब कर सकती है और / या कॉर्नियल घावों, नेत्रश्लेष्मलाशोथ और सूखी आंख की बीमारी का कारण बन सकती है। उदाहरण के लिए, एमजी की रुकावट सूखी आंख की बीमारी का एक प्रमुख कारण है। एजीजीएनईटी को एमजी की नलिकाओं से लिपिड स्राव के प्रवाह को प्लग करने और मेबोमियन ग्रंथि शिथिलता (एमजीडी) का कारण बनने के लिए भी जाना जाता है। एजीजीएनईटी द्वारा एमजी छिद्रों की भीड़ ओकुलर सतह और प्रतिगामी बोतलबंद तरल पदार्थ को ढंकने वाले फैटी द्रव की कमी का कारण बनती है, जिसके परिणामस्वरूप ग्रंथि समारोह की शिथिलता और एसिनार क्षति होती है। इस शिथिलता के परिणामस्वरूप आंसू फिल्म वाष्पीकरण, पलकों पर मार्जिन का फाइब्रोसिस, आंखों की सूजन और एमजी10,11 को हानिकारक नुकसान हो सकता है।
मनुष्यों में एमजीडी की पैथोलॉजिकल प्रक्रिया की नकल करने के लिए वर्षों से कई पशु मॉडल विकसित किए गए हैं। उदाहरण के लिए, 1 वर्ष की आयु के सी 57बीएल / 6 चूहों ने सूखी आंख रोग (डीईडी) और एमजीडी पर उम्र से संबंधित प्रभावों का अध्ययन करने में मदद की है, जो 50 वर्ष औरउससे अधिक उम्र के रोगियों में ओकुलर रोग विकृति को दर्शाता है। इसके अलावा, खरगोश औषधीय हस्तक्षेप के प्रभावों की जांच के लिए उपयुक्त मॉडल हैं। इसलिए, खरगोशों में एमजीडी को प्रेरित करने की सूचना या तो एपिनेफ्रीन के सामयिक प्रशासन या 13-सीआईएस-रेटिनोइक एसिड (आइसोट्रेटिनॉइन) 15,16,17,18,19 के प्रणालीगत परिचय द्वारा दी गई है।
यद्यपि ये पशु मॉडल एमजीडी के पैथोफिज़ियोलॉजी में योगदान देने वाले विभिन्न कारकों को निर्धारित करने के लिए पर्याप्त थे, वे उनके उपयोग में प्रतिबंधित थे। उदाहरण के लिए, उम्र से संबंधित एमजीडी का मुराइन मॉडल केवल पुराने वयस्कों में तत्वों को समझने के लिए आदर्श था, और इसलिए, खरगोश ओकुलर सतह रोगों का अध्ययन करने के लिए सबसे उपयुक्त पशु मॉडल प्रतीत होते हैं, क्योंकि वे कई पैथोफिजियोलॉजिकल तंत्र की जांच को सक्षम करते हैं। हालांकि, ओकुलर सतह पर प्रोटीन का पता लगाने के लिए व्यापक विश्लेषणात्मक उपकरणों की कमी के कारण और क्योंकि खरगोश जीनोम के कई हिस्से अननोटेटेड हैं, वे जांच के लिए सीमित हैं20,21।
इसके अलावा, सूखी आंख की बीमारी के रोगजनन की जांच करने के लिए उपयोग किए जाने वाले इन पशु मॉडलों ने विकार के प्रतिरक्षात्मक हाथ का विश्लेषण करने के लिए पर्याप्त विवरण प्रदान नहीं किया जो ओकुलर सतह की सूजन को उकसाता है। तदनुसार, रेयेस एट अल द्वारा विकसित एमजीडी के मुराइन मॉडल ने चूहों में एलर्जी आंखों की बीमारी और मनुष्यों में एमजीडी के बीच एक संबंध दिखाया और प्रतिरोधी एमजीडी21 के लिए जिम्मेदार प्रतिरक्षा एटियलजि पर प्रकाश डाला। यह मॉडल एलर्जी आंखों की बीमारी को टीएच 17 प्रतिक्रिया के साथ जोड़ता है जो न्यूट्रोफिल को नेत्रश्लेष्मला और पलक में भर्ती करता है, जिससे एमजीडी और पुरानी ओकुलर सूजन21 होती है। इस मुराइन मॉडल में एमजीडी और ओकुलर सूजन का प्रेरण चल रही प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया21 द्वारा संचालित स्थानीय सूजन के विकास के दौरान अपस्ट्रीम घटनाओं की जांच के लिए एक मूल्यवान उपकरण है। वर्तमान प्रोटोकॉल ऑब्सट्रक्टिव एमजीडी के साथ ओकुलर सतह सूजन का वर्णन करता है। इस विधि में, चूहों को प्रतिरक्षित किया जाता है और, 2 सप्ताह के बाद, 7 दिनों के लिए इम्यूनोजेन के साथ ओकुलर सतह पर चुनौती दी जाती है। इसके अलावा, तीव्र सूजन और कॉर्निया, नेत्रश्लेष्मला और पलकों के विच्छेदन के दौरान ओकुलर एक्स्यूडेट और संबंधित ओकुलर अंगों को अलग करने के चरणों का वर्णन किया गया है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1x PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aluminium Hydroxide</td>
			<td>Imject alum Adjuvant</td>
			<td>77161</td>
			<td>40 mg/ mL 
			Final Concentration: in vivo: 1 mg/ 100 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57Bl/6 mice, aged 7&#8211;9 weeks</td>
			<td>Charles River Laboratories&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium</td>
			<td>Carl roth</td>
			<td>CN93.1</td>
			<td>1 M 
			Final Concentration: 5 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps</td>
			<td>FST by Dumont SWITZERLAND</td>
			<td>5/45 11251-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine sharp scissor</td>
			<td>FST Stainless steel, Germany</td>
			<td>15001-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar safety cabinet</td>
			<td>Herasafe</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Macrophotography Camera</td>
			<td>Canon</td>
			<td>EOS6D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Macrophotography Camera (without IR filter)</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>D5300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mnase</td>
			<td>New England biolabs</td>
			<td>M0247S</td>
			<td>2 x 106 gel U/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi-analyte flow assay kit (Custom mouse 13-plex panel)</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>CLPX-200421AM-UERLAN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl 0,9% (Saline)</td>
			<td>B.Braun</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ovalbumin (OVA)</td>
			<td>Endofit, Invivogen</td>
			<td>9006-59-1</td>
			<td>10 mg/200 &#181;L in saline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pertussis toxin&#160;</td>
			<td>ThermoFisher Scientific&#160;</td>
			<td>PHZ1174</td>
			<td>50 &#181;g/ 500 &#181;L in saline 
			Final Concentration: in vivo: 100 &#181;g/ 100 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petridish</td>
			<td>Greiner bio-one</td>
			<td>628160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Feather disposable scalpel</td>
			<td>No. 21&#160;</td>
			<td>Final Concentration: in vivo:&#160; 300 ng/ 100 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Zaiss</td>
			<td>Stemi508</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (corneal/iris washing)</td>
			<td>BD Microlane</td>
			<td>27 G x 3/4 - Nr.20 0,4 x 19 mm</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (i.p immunization)</td>
			<td>BD Microlane</td>
			<td>24 G1&#34;-Nr 17, 055* 25 mm</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of ocular surface inflammation and collection of involved tissues

नेत्र संबंधी सतह रोगों में विकारों की एक श्रृंखला शामिल है जो कॉर्निया, नेत्रश्लेष्मला और संबंधित ओकुलर सतह ग्रंथि नेटवर्क के कार्यों और संरचनाओं को परेशान करती है। मेबोमियन ग्रंथियां (एमजी) लिपिड का स्राव करती हैं जो एक आवरण परत बनाती हैं जो आंसू फिल्म के जलीय हिस्से के वाष्पीकरण को रोकती है। न्यूट्रोफिल और बाह्य डीएनए जाल एलर्जी आंखों की बीमारी के माउस मॉडल में एमजी और ओकुलर सतह को आबाद करते हैं। समेकित न्यूट्रोफिल एक्स्ट्रासेल्युलर ट्रैप (एजीएनईटी) बाह्य क्रोमैटिन से बना एक जाल जैसा मैट्रिक्स तैयार करता है जो एमजी आउटलेट और एमजी डिसफंक्शन की स्थिति को रोकता है। यहां, ओकुलर सतह सूजन और एमजी डिसफंक्शन को प्रेरित करने के लिए एक विधि प्रस्तुत की गई है। ओकुलर सतह से संबंधित अंगों को इकट्ठा करने की प्रक्रियाएं, जैसे कॉर्निया, नेत्रश्लेष्मला और पलकें, विस्तार से वर्णित हैं। प्रत्येक अंग को संसाधित करने के लिए स्थापित तकनीकों का उपयोग करते हुए, एमजी डिसफंक्शन की प्रमुख रूपात्मक और हिस्टोपैथोलॉजिकल विशेषताओं को भी दिखाया गया है। ओकुलर एक्स्यूडेट्स ओकुलर सतह की भड़काऊ स्थिति का आकलन करने का अवसर प्रदान करते हैं। ये प्रक्रियाएं प्रीक्लिनिकल स्तर पर सामयिक और प्रणालीगत विरोधी भड़काऊ हस्तक्षेप की जांच को सक्षम करती हैं।

वर्तमान प्रोटोकॉल ओकुलर सतह सूजन के एक मुराइन मॉडल की स्थापना के लिए अनुक्रमिक चरणों का वर्णन करता है। प्रोटोकॉल का उद्देश्य यह दिखाना है कि स्थानीय स्तर पर चिकित्सीय लागू कैसे करें, ओकुलर एक्स्यूडे?...

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Induction of Ocular Surface Inflammation and Collection of Involved Tissues

ओकुलर सतह की सूजन ओकुलर सतह के ऊतकों को नुकसान पहुंचाती है और आंख के महत्वपूर्ण कार्यों से समझौता करती है। वर्तमान प्रोटोकॉल ओकुलर सूजन को प्रेरित करने और मेबोमियन ग्रंथि शिथिलता (एमजीडी) के माउस मॉडल में समझौता किए गए ऊतकों को इकट्ठा करने के लिए एक विधि का वर्णन करता है।

ओकुलर सतह सूजन का प्रेरण और शामिल ऊतकों का संग्रह

Ocular surface diseases include a range of disorders that disturb the functions and structures of the cornea, conjunctiva, and the associated ocular ...

यह प्रोटोकॉल क्रमिक रूप से ओकुलर सतह की सूजन के प्रेरण और मेबोमियन ग्रंथि की शिथिलता में शामिल संबंधित प्रभावित अंगों के संग्रह में शामिल चरणों का वर्णन करता है। एमजीडी का यह नया मॉडल रोग के जन्मजात प्रतिरक्षा पहलू की जांच को सक्षम बनाता है, विशेष रूप से मेबोमियन ग्रंथि को अवरुद्ध करने वाले न्यूट्रोफिल बाह्य जाल का गठन। प्रोटोकॉल में प्रदर्शित तकनीक को पूर्व-नैदानिक चरण में सामयिक चिकित्सीय हस्तक्षेप पेश करने के लिए बढ़ाया जा सकता है।इसके अलावा, ओकुलर एक्स्यूडेट्स और अंगों का संग्रह उपचार की प्रभावकारिता को दर्शाता है। इम्यूनोजेन समाधान के इंट्रापरिटोनियल इंजेक्शन का प्रदर्शन करने के लिए, पिंजरे ग्रिड को पकड़ते समय पूंछ से सात से नौ सप्ताह पुराने सी 57 काले छह गैर एनेस्थेटाइज्ड मादा माउस को धीरे से पकड़ें। फिर अंगूठे और तर्जनी उंगली के बीच पीठ और गर्दन के क्षेत्र की त्वचा को मजबूती से पकड़ें और अंगूठी और छोटी उंगली के बीच पूंछ और निचले अंगों को हथेली के खिलाफ ठीक करें।माउस को अपने सिर के साथ नीचे की ओर स्थिर रखते हुए, तैयार इम्युनोजेन समाधान के 100 माइक्रोलीटर को निचले पेट की गुहा के दाएं या बाएं चतुर्थांश में इंजेक्ट करें। टीकाकरण के बाद ओकुलर सतह चुनौती करने के लिए, एक एनेस्थेटाइज्ड माउस की प्रति आंख ओवलबुमिन या ओवा या खारा के पांच माइक्रोलीटर लागू करें, और आंख द्वारा अवशोषित बूंद प्राप्त करने के लिए पांच मिनट तक प्रतीक्षा करें। इसके बाद, चुनौती के तुरंत बाद आंखों में बाँझ खारा के 50 माइक्रोलीटर लगाकर ओकुलर एक्स्यूडेट्स एकत्र करें।ओकुलर सतह के ऊतकों के छांटने के लिए, माउस को एक समान सतह पर रखें और 70% इथेनॉल स्वैब के साथ आंख के चारों ओर कक्षीय क्षेत्र को कीटाणुरहित करें। आंख के चारों ओर चीरा बनाने के लिए, कान और रेट्रोऑर्बिटल साइनस के बीच और स्क्वैमस हड्डी के ऊपर की सतह के साथ लंबवत रूप से एक चीरा लगाएं, जो कि मैक्सिलरी हड्डी के साथ निचली पलक के नीचे और ललाट की हड्डी के साथ ऊपरी पलक के ऊपर क्षैतिज रूप से चीरा फैलाएं। घुमावदार बल का उपयोग करके आंख के चारों ओर विच्छेदित ऊतक को सावधानीपूर्वक पकड़ें, और ऊतक और नेत्रगोलक को बाहर खींचें।उत्पादित अंगों को बाँझ पीबीएस में रखें। फिर स्टीरियो माइक्रोस्कोप के तहत एक स्केलपेल का उपयोग करके, उत्पादित ऊपरी पलकों के आसपास अतिरिक्त चेहरे की मांसपेशियों के ऊतकों को ट्रिम करें। नेत्रश्लेष्मला एकत्र करने के लिए ऊपरी पलक को सूखी पेट्री डिश पर रखें।फिर बारीक चिमटी और एक स्केलपेल का उपयोग करके सफेद बलगम परत को पलक की आंतरिक सतह से धीरे-धीरे बाहर निकालें। कॉर्निया को विच्छेदित करने के बगल में, सूखी बर्फ के शीर्ष पर एक नए सूखे पेट्री डिश पर आंखों के ग्लोब को रखें। तीन मिनट के बाद, डिश को एक स्थिर स्थिति में बेंच की सतह पर रखें।लिम्बस के बगल में कॉर्निया की सीमा पर एक छोटा सा चीरा बनाने के लिए ठीक, तेज कैंची का उपयोग करें। आंखों के ग्लोब के चारों ओर स्केलपेल के साथ चीरा जारी रखें, स्क्लेरा को कॉर्निया से अलग करें। फिर नमकीन घोल के साथ उदारतापूर्वक फ्लश करके कॉर्निया के पीछे से आईरिस और लेंस अवशेषों को हटा दें।मेइबोमियन ग्रंथि और उसके छिद्रों का आकलन करने के लिए, स्टीरियो माइक्रोस्कोप के नीचे एक सीधी स्थिति में उत्पादित पलकें रखें। फिर कैमरा एक्सपोज़र समय और आईएसओ सेटिंग्स के अनुसार, सफेद प्रकाश एपि-रोशनी के तहत छवियों को कैप्चर करें। मेबोमियन ग्रंथि क्षेत्र का आकलन करने के लिए, उत्पादित पलकों को क्षैतिज स्थिति में रखें और इन्फ्रारेड कैमरे से लैस स्टीरियो माइक्रोस्कोप की बैकलाइट चालू करें।कैमरा आईएसओ के अनुसार एक्सपोज़र समय को समायोजित करके छवियों को कैप्चर करें। खारा प्रशासित चूहों ने आंखों को चौड़ा खुला रखने के साथ स्वस्थ ओकुलर सतहों को दिखाया। इसकी तुलना में, ओवा आवेदन गंभीर ओकुलर सतह सूजन, आंखों के संकीर्ण उद्घाटन और केमोसिस के संकेतों को प्रेरित करता है।एक्साइज्ड पलकों ने मेइबोमियन ग्रंथि और एडिमा के छिद्रों को प्लग करने वाले बड़े अवरोध दिखाए, जबकि स्वस्थ पलकें पलकें ग्रंथि के छोटे प्लग दिखाती हैं। ग्रंथि के अवरक्त ट्रांसिल्युमिनेशन की आगे की जांच से मेइबोमियन ग्रंथि के एसिनी की रेसमिक उपस्थिति का पता चलता है। खारा चुनौती वाले चूहों की पलकों ने गोल एसिनी दिखाया।इसकी तुलना में, ओवा अनुप्रयोगों ने एलर्जी नेत्र रोग या एईडी के साथ कुछ ग्रंथियों के विनाश और हानि को प्रेरित किया। पलकों के हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण ने केवल खारा के साथ प्रशासित चूहों की तुलना में पतला मेइबोमियन ग्रंथियों को प्रदर्शित किया। सूखी बर्फ पर नेत्रगोलक को इनक्यूबेट करने से लिम्बस के बगल में कॉर्निया पर चीरा लगाने और श्वेतपटल से कॉर्निया को अलग करने की अनुमति मिलती है।इस अध्ययन ने कॉर्निया के संग्रह की सुविधा प्रदान की। इसके अलावा, ओवा प्रशासन ने हाइपरेमिक उपस्थिति के साथ नेत्रश्लेष्मला को गंभीर सूजन दी। केमोकाइन 1 के ऊंचे स्तर न्यूट्रोफिल एक्स्ट्रावेसेशन, फागोसाइटोसिस और डीग्रेनुलेशन की सुविधा प्रदान करते हैं, और इंटरल्यूकिन -6 तीव्र चरण प्रतिक्रिया और न्यूट्रोफिल घुसपैठ की मध्यस्थता करते हैं, एईडी चूहों के सुपरनैटेंट्स में देखे गए थे।दूसरी ओर, इंटरल्यूकिन -10 की एकाग्रता ने भोले और एईडी चूहों दोनों में कोई महत्वपूर्ण बदलाव नहीं दिखाया। यह नया मॉडल उन दवाओं की प्रभावकारिता के विकास और मूल्यांकन को सक्षम बनाता है जो जन्मजात प्रतिरक्षा मार्गों को लक्षित करते हैं, और विरोधी भड़काऊ एजेंटों के प्रशासन के तरीके से डेटा माइनिंग में बहुत मदद करते हैं। अंगों के उचित संग्रह के बाद, एकल कोशिका अनुक्रमण और इमेजिंग मास साइटोमेट्री जैसे अत्यधिक मल्टीप्लेक्स विधियां इस प्रोटोकॉल के साथ संगत हैं।

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Flow Cytometry Analysis of Immune Cells Within Murine Aortas

प्रतिरक्षा कोशिकाओं के भीतर murine aortas Cytometry विश्लेषण फ्लो

Atherosclerosis is a chronic inflammatory process of medium and large size vessels that is characterized by the formation of plaques consisting of foam ...

VIGS-Mediated Forward Genetics Screening for Identification of Genes Involved in Nonhost Resistance


	Nonhost disease resistance of plants against bacterial pathogens is controlled by complex defense pathways. Understanding this mechanism is important ...

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Effector के सीडी 4 की दत्तक हस्तांतरण द्वारा Murine आंतों में सूजन की प्रेरण<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; उच्च</sup&gt; Immunodeficient चूहों में टी कोशिकाओं

There are many different animal models available for studying the pathogenesis of human inflammatory bowel diseases (IBD), each with its own advantages ...

Co-immunoprecipitation of the Mouse Mx1 Protein with the Influenza A Virus Nucleoprotein

इन्फ्लुएंजा ए वायरस nucleoprotein के साथ माउस MX1 प्रोटीन की सह immunoprecipitation

Studying the interaction between proteins is key in understanding their function(s). A very powerful method that is frequently used to study interactions ...

An Optimized Method for Isolating and Expanding Invariant Natural Killer T Cells from Mouse Spleen

माउस तिल्ली से अपरिवर्तनीय प्राकृतिक हत्यारा टी कोशिकाओं को अलग करने और विस्तार के लिए एक अनुकूलित विधि

The ability to rapidly secrete cytokines upon stimulation is a functional characteristic of the invariant natural killer T (iNKT) cell lineage. iNKT cells ...

Isolation, Characterization and Functional Examination of the Gingival Immune Cell Network

अलगाव, लक्षण और मसूड़ों का प्रतिरक्षा सेल नेटवर्क के कार्यात्मक परीक्षा

Immune cell networks in tissues play a vital role in mediating local immunity and maintaining tissue homeostasis, yet little is known of the resident ...

Induction of Experimental Autoimmune Encephalomyelitis in Mice and Evaluation of the Disease-dependent Distribution of Immune Cells in Various Tissues

चूहे और विभिन्न ऊतकों में प्रतिरक्षा कोशिकाओं की रोग-निर्भर वितरण के मूल्यांकन में प्रायोगिक ऑटोइम्यून Encephalomyelitis की प्रेरण

Multiple sclerosis is presumed to be an inflammatory autoimmune disease, which is characterized by lesion formation in the central nervous system (CNS) ...

Microscopy-based Assays for High-throughput Screening of Host Factors Involved in Brucella Infection of Hela Cells

Microscopy-based Assays for High-throughput Screening of Host Factors Involved in Brucella Infection of Hela Cells

होस्ट में शामिल कारक के उच्च throughput स्क्रीनिंग के लिए माइक्रोस्कोपी आधारित assays<em&gt; ब्रूसिला</em&gt; हेला कोशिकाओं के संक्रमण

Brucella species are facultative intracellular pathogens that infect animals as their natural hosts. Transmission to humans is most commonly caused by ...

A Non-invasive and Technically Non-intensive Method for Induction and Phenotyping of Experimental Bacterial Pneumonia in Mice

चूहे में प्रेरण और प्रायोगिक बैक्टीरियल निमोनिया की phenotyping के लिए एक गैर-आक्रामक और तकनीकी तौर पर गैर-गहन विधि

Although community-acquired pneumonia remains a major public health problem, murine models of bacterial pneumonia have recently facilitated significant ...