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•
07:39 min
June 23rd, 2022
DOI :
10.3791/63927-v
Chapters
0:04
Introduction
0:49
Buffer Preparation
2:05
Antigen Immobilization and Blocking Nonspecific Sites with BSA
3:21
Serial Dilutions and Addition of the Radiolabeled Antibody (rAb) Solution
5:08
Wash Plates and Assay Radioactivity
6:07
Results: Determination of Binding Affinity
7:04
Conclusion
Transcript
该方法可以确定放射性标记抗体与其抗原的结合亲和力。它还将测量结合的特异性。这种简单方法的主要优点是仅对放射性标记抗体的结合亲和力进行特异性表征,而不受未结合亲本抗体的干扰。
该技术定量验证放射性标记抗体与其靶标结合的能力。这对于核成像和各种疾病的核治疗中的应用非常重要。演示该程序的将是Erika Belitzky,一位来自我实验室的研究生助理。
首先,通过在50毫升锥形管中加入191毫克碳酸氢钠和23.9毫克碳酸钠来制备固定缓冲液。然后,加入40毫升18兆欧水,通过
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Summary
在这里,描述了一种确定放射性标记抗体与固定化抗原的结合亲和力(KD)的方法。KD 是平衡解离常数,可以通过测量放射性标记抗体在不同浓度下与其抗原的总,特异性和非特异性结合来确定饱和结合实验。
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