Transfection of HEK293T Cells Using Either Polymer Polyethylenimine (PEI) or Lipofectamine 3000 Reagent
2:48
Lentiviral Vectors (LVS) Collection and Ultracentrifugation
5:07
Results: Lentiviral Mediated Delivery of shRNAs in hESCs and NPCs Using Cationic Polymer PEI
6:19
Conclusion
Transcript
एचईके 293 टी कोशिकाओं का अभिकर्मक 90% संगम पर किया जाना चाहिए। इसके अलावा, लेंटिवायरल वेक्टर निस्पंदन के लिए 0.45-माइक्रोन कम प्रोटीन बाइंडिंग फिल्टर का उपयोग और अल्ट्रासेंट्रीफ्यूजेशन के लिए सुक्रोज कुशन का उपयोग आवश्यक है। डीएमईएम माध्यम में एचई
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कम लागत वाले धनायनिक बहुलक पॉलीथीलेनिमिन (पीईआई) का उपयोग करते हुए, हमने एच 9 मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं (एचईएससी) में एसएचआरएनए की स्थिर अभिव्यक्ति के लिए लेंटिवायरल कणों का उत्पादन किया और उच्च दक्षता पर क्षणिक रूप से ट्रांसड्यूस्ड एच 9-व्युत्पन्न तंत्रिका पूर्वज कोशिकाओं (एनपीसी)।