Name: technical refinement of a bilateral renal ischemia-reperfusion mouse model for acute kidney injury research
Uploaded: 2023-11-03T14:20:00
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该模型是在台湾科学技术部（MOST 109-2320-B-030-006-MY3）的资助下开发的。本文由Wallace Academic Editing编辑。

所有动物实验均按照美国国立卫生研究院出版的 《实验动物护理和使用指南》（NIH 出版物编号 85-23,1996 年修订）进行。该研究方案已获得辅仁大学机构动物护理和使用委员会的批准并符合其指南。有关本协议中使用的所有材料和仪器的详细信息，请参阅 材料表 。
1. 准备小鼠
<ol><li>选择体重为21-23g的8周龄C57BL / 6雄性小鼠。</li>
	<li>在受控温?...

拟议的双侧 IR-AKI 方案适用于研究双肾灌注不足和再灌注损伤的机制。该方案表明，轻量级小鼠、异氟醚全身麻醉、手术背外侧入路以及手术期间的体温维持减轻了相关的技术困难，缩短了手术持续时间，并增加了急性双侧肾脏 IR-AKI 研究的一致性。
技术难点影响双侧肾IR-AKI手术中肾损伤的严重程度33.除了小鼠品系、性别、年龄和加热系统36</sup...

在美国，心脏骤停每年发生超过 80,000 次 1,2。心脏骤停的死亡率极高 3,4,5,6。AKI 是 ROSC7、8、9、10、11、12、13 后心脏骤停患者高死亡率和不良神经系统结局的主要危险因素。AKI的恢复是有利的神经系统结局和出院的良好预测指标14,15,16。然而，IR-AKI的有效疗法仍然缺乏15,16,17,18,19。需要额外的治疗策略来进一步改善该疾病的临床结果。
IR-AKI与双侧肾缺血入路是用于AKI研究的动物模型之一20,21,22,23,24,25,26。肾脏 IR-AKI 动物模型在研究 ROSC6、27、28、29、30 后心脏骤停患者的 AKI 方面不如全身 IR 损伤模型复杂。这意味着肾脏IR-AKI动物模型的一致结果更容易实现，因为实验中存在的混杂因素较少。此外，肾脏 IR-AKI 方案通常涉及单侧或双侧肾蒂闭塞。双侧肾IR-AKI实验条件与成功心肺复苏后心脏骤停患者ROSC后AKI的临床条件相当。尽管两种模型中肾脏的病理特征都反映了人类肾IR损伤的病理特征31,32,33，但在人类病理条件下，如心力衰竭、血管收缩和感染性休克35，双侧肾缺血方法与AKI更相关。双侧肾脏 IR-AKI 动物模型适用于专注于 ROSC 后心脏骤停的肾 IR 损伤的研究。
双侧肾脏IR-AKI模型与技术难度、实验复杂性和手术时间长有关23,26,32,33,35,36。为了克服这些技术难题，本研究通过对小鼠进行一些技术修改，建立了可靠的双侧IR-AKI研究方案。所提出的方案减少了手术并发症，减少了组织损伤，并降低了手术期间的死亡可能性。因此，可用于研究ROSC后AKI的病理生理过程，以开发针对肾灌注不足和再灌注损伤的新治疗策略37,38,39。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Absorbable Suture, 6-0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J510G-BX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine solution</td>
			<td>Shineteh Istrument</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>PHR1452</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton balls</td>
			<td>Shineteh Istrument</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11051-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Shineteh Istrument</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal Critical Care Inc.</td>
			<td>26675-46-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moria Vessel Clamp</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18320-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olsen-Hegar needle holder</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12002 - 12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline</td>
			<td>Shineteh Istrument</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blades</td>
			<td>Shinva</td>
			<td>s2646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Anesthesia Machine</td>
			<td>Sheng-Cing Instruments Co.</td>
			<td>STEP AS-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14072 - 10</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

technical refinement of a bilateral renal ischemia-reperfusion mouse model for acute kidney injury research

心脏骤停会给公共卫生带来沉重的负担。急性肾损伤 （AKI） 是心肺复苏成功后自主循环 （ROSC） 恢复后心脏骤停幸存者的不良标志物。相反，AKI 肾功能恢复是有利神经系统结局和出院的预测指标。然而，缺乏有效的干预措施来预防ROSC后心脏骤停引起的肾脏损伤，这表明需要额外的治疗策略。肾灌注不足和再灌注是心脏骤停后引起AKI的两种病理生理机制。在临床环境中，双肾缺血再灌注诱导的 AKI （IR-AKI） 动物模型与 ROSC 后 AKI 患者相当。然而，双侧肾脏的IR-AKI在技术上难以分析，因为该模型与高死亡率和肾脏损伤的广泛差异相关，这可能会影响分析。选择轻量级小鼠，置于异氟醚全身麻醉下，采用背外侧入路进行手术，并在手术过程中保持体温，从而减少组织损伤并建立可重复的急性肾IR-AKI研究方案。

在进一步的显微镜或分子分析之前，应评估双侧肾脏 IR-AKI 手术的质量。在手术过程中，应通过观察肾脏是否在用微血管夹夹住肾蒂后不久将肾脏颜色从粉红色变为深红色来确认肾缺血（图1）。手术后，IR-AKI手术引起的肾脏损伤可以通过下颌下采血进行生化分析，用几微升血清进一步验证，结果表明血尿素氮和肌酐水平较基线增加（图2）。
<p class="...

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Technical Refinement of a Bilateral Renal Ischemia-Reperfusion Mouse Model for Acute Kidney Injury Research

本研究建立了一个方案，重点是对用于急性肾损伤研究的双侧肾缺血再灌注小鼠模型进行技术改进。

用于急性肾损伤研究的双侧肾缺血再灌注小鼠模型的技术改进

Cardiac arrest poses a large public health burden. Acute kidney injury (AKI) is an adverse marker in survivors of cardiac arrest following the return of ...

急性肾损伤是与循环恢复后心脏骤停患者高死亡率相关的主要危险因素。该手术可用于诱发急性肾损伤。该方案旨在准确、安全、一致地诱导肾缺血再灌注。演示该程序的将是我实验室的助手黄成伟。首先，将麻醉的八周龄C57BL / 6雄性小鼠以俯卧位放在手术平台上，并用电热毯保持体温。接下来，触摸背部，找到腰椎，并寻找最后一根肋骨两侧下方的肋脊角。涂抹脱毛化妆水剃须并擦洗肋脊角区域两侧附近的毛发。使用Betadine溶液和75%酒精使用棉球对手术区域进行消毒。使用细尖镊子轻轻提起左肋脊角以下的皮肤。然后，用剪刀从左侧腰椎中线沿着皮肤张力线做一个一厘米的斜背外侧切口。接下来，横断左侧的肌肉壁以可视化左肾。用镊子小心地将左肾与周围组织推开并分离。然后，识别肾蒂。用微血管夹夹住左肾蒂。通过肾脏颜色从粉红色到深红色的明显变化来确认缺血。为避免夹紧过程中干燥，请用无菌盐水湿棉球覆盖肾脏。25分钟后，打开左微血管夹，开始左肾再灌注。将肾脏送回腹腔。用 6/0 可吸收缝合材料封闭腹腔。观察鼠标，直到它开始自由移动和进食。此处显示了肾蒂钳夹术后的肾缺血。肾脏颜色从粉红色变为深红色表明肾脏灌注不足。与对照组相比，肾再灌注后两天血清尿素氮和肌酐水平升高。这项技术为研究人员探索针对急性肾损伤的新治疗方法铺平了道路。

Research

JoVE Journal

Medicine

Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

常温心脏骤停和心肺复苏术：缺血再灌注损伤的小鼠模型

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

科研

医学

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急性肾损伤和伤后纤维化小鼠缺血再灌注模型

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

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心肌缺血再灌注损伤的通过左前降支结扎小鼠模型

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

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Renal ischaemia reperfusion injury (IRI) is a common cause of acute kidney injury (AKI) in patients and occlusion of renal blood flow is unavoidable ...

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脑缺血再灌注的双血管闭塞小鼠模型

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