Name: technical refinement of a bilateral renal ischemia-reperfusion mouse model for acute kidney injury research
Uploaded: 2023-11-03T14:20:00
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이 모델은 대만 과학기술부(MOST 109-2320-B-030-006-MY3)의 재정 지원으로 개발되었습니다. 이 원고는 Wallace Academic Editing에서 편집했습니다.

모든 동물 실험은 미국 국립보건원(National Institutes of Health)에서 발행한 실험동물 관리 및 사용 가이드(NIH publication no. 85-23, 1996년 개정)에 따라 수행되었습니다. 연구 프로토콜은 Fu-Jen Catholic University의 Institutional Animal Care and Use Committee의 지침에 따라 승인되었습니다. 이 프로토콜에 사용된 모든 재료 및 도구에 대한 자세한 내용은 재료 표를 참조하십시오.
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제안된 양측 IR-AKI 프로토콜은 양쪽 신장의 저관류 및 재관류 손상 메커니즘을 조사하는 데 적합합니다. 이 프로토콜은 가벼운 마우스, 이소플루란을 사용한 전신 마취, 수술에 대한 배측 접근 및 수술 중 체온 유지가 관련 기술적 어려움을 완화하고 수술 기간을 단축하며 급성 양측 신장 IR-AKI 연구를 위한 절차의 일관성을 높일 것을 제안합니다.
양측 신장 IR-AKI 수술에서 신장...

미국에서는 매년 80,000회 이상 심정지가 발생합니다 1,2. 심정지의 사망률은 매우 높습니다 3,4,5,6. AKI는 ROSC 7,8,9,10,11,12,13 후 심정지 환자의 높은 사망률 및 열악한 신경학적 결과와 관련된 주요 위험 인자입니다. AKI로부터의 회복은 양호한 신경학적 결과와 퇴원에 대한 좋은 예측 변수이다14,15,16. 그러나 IR-AKI에 대한 효과적인 치료법은 여전히부족하다 15,16,17,18,19. 질병의 임상 결과를 더욱 개선하기 위해서는 추가적인 치료 전략이 필요합니다.
양측 신장 허혈 접근법을 가진 IR-AKI는 AKI 연구에 사용되는 동물 모델 중 하나입니다 20,21,22,23,24,25,26. 신장 IR-AKI 동물 모델은 ROSC 6,27,28,29,30에 따른 급성 심정지 환자의 AKI 연구를 위한 전신 IR 손상 모델보다 덜 복잡합니다. 이는 신장 IR-AKI 동물 모델의 일관된 결과가 실험에서 교란 요인이 적기 때문에 더 쉽게 얻을 수 있음을 의미합니다. 또한, 신장 IR-AKI 프로토콜은 일반적으로 편측 또는 양측 신장 척추경 폐색을 포함합니다. 양측 신장 IR-AKI에 대한 실험의 조건은 성공적인 심폐 소생술 후 급성 심정지 환자에서 ROSC 후 AKI의 임상 상태와 유사합니다. 두 모델 모두에서 신장의 병리학적 특성은 인간 신장 IR 손상의 병리학적 특성을 반영하지만(31,32,33), 양측 신장 허혈 접근법은 심부전, 혈관 수축 및 패혈성 쇼크와 같은 인간 병리학적 조건에서 AKI와 더 관련이 있다 35. 양측 신장 IR-AKI 동물 모델은 ROSC 후 심정지 시 신장 IR 손상에 초점을 맞춘 연구에 적합합니다.
양측 신장 IR-AKI 모델은 기술적 어려움, 실험 복잡성 및 긴 수술 기간과 관련이 있다 23,26,32,33,35,36. 이러한 기술적 어려움을 극복하기 위해 본 연구는 몇 가지 기술적 수정을 통해 마우스에서 신뢰할 수 있는 양자 IR-AKI 연구 프로토콜을 확립했습니다. 제안된 프로토콜은 수술 합병증을 줄이고 조직 손상을 줄이며 수술 중 사망 가능성을 낮췄습니다. 따라서 ROSC 후 AKI의 병태생리학적 과정을 조사하여 신장 저관류 및 재관류 손상에 대한 새로운 치료 전략을 개발하는 데 사용할 수 있습니다37,38,39.

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	<tbody>
		<tr>
			<td>Absorbable Suture, 6-0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J510G-BX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine solution</td>
			<td>Shineteh Istrument</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>PHR1452</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton balls</td>
			<td>Shineteh Istrument</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11051-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Shineteh Istrument</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal Critical Care Inc.</td>
			<td>26675-46-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moria Vessel Clamp</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18320-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olsen-Hegar needle holder</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12002 - 12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline</td>
			<td>Shineteh Istrument</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blades</td>
			<td>Shinva</td>
			<td>s2646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Anesthesia Machine</td>
			<td>Sheng-Cing Instruments Co.</td>
			<td>STEP AS-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14072 - 10</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

technical refinement of a bilateral renal ischemia-reperfusion mouse model for acute kidney injury research

심정지는 공중 보건에 큰 부담을 줍니다. 급성 신장 손상(AKI)은 성공적인 심폐 소생술 후 자연 순환 복귀(ROSC)에 따른 심정지 생존자의 부작용 지표입니다. 반대로, AKI에서 신장 기능의 회복은 양호한 신경학적 결과와 퇴원을 예측하는 변수입니다. 그러나 ROSC 후 심정지로 인한 신장 손상을 예방하기 위한 효과적인 중재가 부족하여 추가적인 치료 전략이 필요한 것으로 나타났다. 신장 저관류와 재관류는 심정지 후 AKI를 유발하는 두 가지 병태생리학적 기전입니다. 양쪽 신장의 허혈-재관류 유도 AKI(IR-AKI) 동물 모델은 임상 환경에서 ROSC 후 AKI 환자와 유사합니다. 그러나 두 신장의 IR-AKI는 모델이 높은 사망률과 신장 손상의 광범위한 변동과 관련이 있어 분석에 영향을 미칠 수 있기 때문에 기술적으로 분석하기 어렵습니다. 경량 마우스를 선택하여 이소플루란으로 전신 마취를 하고 배측 접근법으로 수술을 하고 수술 중 체온을 유지하여 조직 손상을 줄이고 재현 가능한 급성 신장 IR-AKI 연구 프로토콜을 확립했습니다.

양측 신장 IR-AKI 수술의 질은 추가 현미경 또는 분자 분석 전에 평가되어야 합니다. 수술 중 신장 허혈은 신장 척추경을 미세혈관 클립으로 고정한 직후 신장의 색이 분홍색에서 짙은 빨간색으로 변했는지 여부를 확인하여 확인해야 합니다(그림 1). 수술 후 IR-AKI 수술로 인한 신장 손상은 생화학적 분석을 위한 턱밑 혈액 채취를 통해 몇 마이크로리터의 혈청으로 추가로 검증?...

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Technical Refinement of a Bilateral Renal Ischemia-Reperfusion Mouse Model for Acute Kidney Injury Research

이 연구는 급성 신장 손상 연구를 위한 양측 신장 허혈 재관류의 마우스 모델의 기술적 개선에 중점을 둔 프로토콜을 수립했습니다.

급성 신장 손상 연구를 위한 양측 신장 허혈-재관류 마우스 모델의 기술적 개선

Cardiac arrest poses a large public health burden. Acute kidney injury (AKI) is an adverse marker in survivors of cardiac arrest following the return of ...

급성 신장 손상은 혈액 순환 복귀 후 심정지 환자의 높은 사망률과 관련된 주요 위험 요인입니다. 이 시술은 급성 신장 손상을 유도하기 위해 수행될 수 있습니다. 이 프로토콜은 신장 허혈 재관류를 정확하고 안전하며 일관되게 유도하는 것입니다.절차를 시연하는 것은 내 실험실의 조수인 Huang Cheng-Wei입니다. 먼저 마취된 8주 된 C57BL/6 수컷 쥐를 수술 플랫폼에 엎드린 자세로 전기 담요를 씌워 체온을 유지합니다. 그런 다음 등을 만지고 요추를 찾아 마지막 갈비뼈의 양쪽 아래에 늑골 각을 찾습니다.제모 로션을 바르고 늑골 삼각각 부위의 양쪽 근처의 머리카락을 면도하고 문지릅니다. 베타딘 용액과 면봉을 사용하여 75% 알코올을 사용하여 수술 부위를 소독합니다. 끝이 가는 집게를 사용하여 왼쪽 늑골 각도 아래로 피부를 부드럽게 들어 올립니다.그런 다음 가위를 사용하여 왼쪽 옆구리의 요추 정중선에서 피부 장력 라인을 따라 1cm 비스듬한 배외측 절개를 만듭니다. 그런 다음 왼쪽 옆구리의 근육벽을 가로질러 왼쪽 신장을 시각화합니다. 왼쪽 신장을 집게로 조심스럽게 밀어서 주변 조직에서 분리합니다.그런 다음 신장 척추경을 확인합니다. 미세혈관 클립으로 왼쪽 신장 척추경을 고정합니다. 분홍색에서 짙은 빨간색으로 신장 색상의 눈에 띄는 변화로 허혈을 확인합니다.클램핑 중 건조를 방지하려면 멸균 식염수에 젖은 면봉으로 신장을 덮으십시오. 25분 후 왼쪽 미세혈관 클립을 열어 왼쪽 신장의 재관류를 시작합니다. 신장을 복강으로 되돌립니다.6/0 흡수성 봉합사 재료로 복강을 닫습니다. 쥐가 자유롭게 움직이고 먹이를 먹기 시작할 때까지 관찰하십시오. 신장 척추경 클램핑 후 신장 허혈이 여기에 나와 있습니다.신장 색깔이 분홍색에서 짙은 빨간색으로 변하면 신장 관류가 부적절해졌음을 알 수 있습니다. 대조군과 비교했을 때, 혈중 요소 질소와 크레아티닌의 혈청 수치는 신장 재관류 이틀 후에 증가했다. 이 기술은 연구자들이 급성 신장 손상에 대한 새로운 치료 접근법을 탐구할 수 있는 길을 열어줍니다.

Research

JoVE Journal

Medicine

Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

Normothermic 심장 마비와 심폐 소생술의 : 국소 빈혈 - Reperfusion 상해의 마우스 모델

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

연구

의학

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

마우스의 급성 신장 손상 및 사후 상해 섬유증의 허혈 - 재관류 모델

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

왼쪽 앞쪽에 내림차순 동맥의 결찰을 통해 심근 허혈 - 재관류 손상의 생쥐 모델

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Renal Ischaemia Reperfusion Injury: A Mouse Model of Injury and Regeneration

신장 허혈 재관류 상해 : 상해의 마우스 모델 및 재생

Renal ischaemia reperfusion injury (IRI) is a common cause of acute kidney injury (AKI) in patients and occlusion of renal blood flow is unavoidable ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

창자 허혈 - 재관류 손상의 쥐 모델

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

안압 상승을 통해 망막 허혈 - 재관류 손상의 마우스 모델

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

Inducing Ischemia-reperfusion Injury in the Mouse Ear Skin for Intravital Multiphoton Imaging of Immune Responses

면역 반응의 생체 내에 다중 광자 이미징을위한 마우스 귀 피부에 유도 허혈 - 재관류 손상

Ischemia-reperfusion injury (IRI) occurs when there is transient hypoxia due to the obstruction of blood flow (ischemia) followed by a subsequent ...

Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

대뇌 국 소 빈 혈 reperfusion의 2 배 폐색 마우스 모델

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

쥐의 심근 허혈 재관류 후 관상 동맥 흐름 예비의 평가

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...

A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery

재건 미세 수술에서 허혈 재관류 손상의 연구를위한 전 임상 쥐 모델

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many ...