Name: technical refinement of a bilateral renal ischemia-reperfusion mouse model for acute kidney injury research
Uploaded: 2023-11-03T14:20:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Technical Refinement of a Bilateral Renal Ischemia-Reperfusion Mouse Model for Acute Kidney Injury Research at JoVE.com

Bu model, Tayvan Bilim ve Teknoloji Bakanlığı'nın (MOST 109-2320-B-030-006-MY3) mali desteğiyle geliştirilmiştir. Bu makale Wallace Academic Editing tarafından düzenlenmiştir.

Tüm hayvan deneyleri, ABD Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından yayınlanan Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'na uygun olarak gerçekleştirilmiştir (NIH yayın no. 85-23, 1996'da revize edilmiştir). Çalışma protokolü, Fu-Jen Katolik Üniversitesi'ndeki Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından ve yönergelerine uygun olarak onaylandı. Bu protokolde kullanılan tüm malzemeler ve aletler hakkında ayrıntılı bilgi için Malzeme Tablosuna</strong...

Önerilen bilateral İR-ABH protokolü, her iki böbreğin hipoperfüzyon ve reperfüzyon hasarı mekanizmasını araştırmak için uygundur. Protokol, hafif farelerin, izofluran ile genel anestezinin, cerrahiye dorsolateral bir yaklaşımın ve operasyon sırasında vücut ısısının korunmasının, ilişkili teknik zorlukları hafiflettiğini, ameliyat süresini kısalttığını ve akut bilateral renal IR-ABH araştırması için prosedürün tutarlılığını artırdığını göstermektedir.
<p class="jove_c...

Kardiyak arrest, Amerika Birleşik Devletleri'nde yılda 80.000'den fazla kez meydana gelir 1,2. Kardiyak arrest mortalite oranı son derece yüksektir 3,4,5,6. ABH, ROSC 7,8,9,10,11,12,13 sonrası kardiyak arrest geçiren hastalarda yüksek mortalite ve kötü nörolojik sonuçlarla ilişkili majör bir risk faktörüdür. ABH'den iyileşme, olumlu nörolojik sonuçların ve hastaneden taburculuğun iyi bir göstergesidir14,15,16. Bununla birlikte, İİR-ABH için etkili tedaviler hala eksiktir 15,16,17,18,19. Hastalığın klinik sonuçlarını daha da iyileştirmek için ek terapötik stratejiler gereklidir.
Bilateral renal iskemi yaklaşımlı İR-ABH, ABH araştırmaları için kullanılan hayvan modellerinden biridir 20,21,22,23,24,25,26. Renal IR-ABH hayvan modelleri, ROSC6,27,28,29,30'u takiben ani kardiyak arrest geçiren hastalarda ABH çalışması için tüm vücut IR yaralanma modelinden daha az karmaşıktır. Bu, deneylerde daha az kafa karıştırıcı faktörün varlığı nedeniyle bir renal IR-ABH hayvan modelinden tutarlı sonuçların elde edilmesinin daha kolay olduğu anlamına gelir. Ayrıca, renal IR-ABH protokolleri sıklıkla tek taraflı veya iki taraflı renal pedikül tıkanıklığını içerir. Bilateral renal IR-ABH ile ilgili deneylerdeki koşullar, başarılı kardiyopulmoner resüsitasyondan sonra ani kardiyak arrest geçiren hastalarda ROSC'yi takiben ABH için klinik koşullarla karşılaştırılabilir. Her iki modelde de böbreklerin patolojik özellikleri insan renal IR hasarının patolojik özelliklerini yansıtsada 31,32,33, bilateral renal iskemi yaklaşımı, kalp yetmezliği, vazokonstriksiyon ve septik şok gibi insan patolojik koşulları altında ABH ile daha ilgilidir 35. Bilateral renal IR-ABH hayvan modelleri, ROSC'yi takiben kardiyak arrestte renal IR yaralanmalarına odaklanan çalışmalar için uygundur.
Bilateral renal IR-ABH modelleri teknik zorluklar, deneysel karmaşıklık ve uzun cerrahi süreile ilişkilidir 23,26,32,33,35,36. Bu teknik zorlukların üstesinden gelmek için, bu çalışma bazı teknik değişiklikler yaparak farelerde güvenilir bir bilateral IR-ABH araştırma protokolü oluşturmuştur. Önerilen protokol, daha az cerrahi komplikasyon, daha az doku hasarı ve ameliyat sırasında daha düşük mortalite olasılığı ile sonuçlandı. Bu nedenle, renal hipoperfüzyon ve reperfüzyon hasarına karşı yeni terapötik stratejiler geliştirmek için ROSC sonrası ABH'nin patofizyolojik süreçlerini araştırmak için kullanılabilir37,38,39.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Absorbable Suture, 6-0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J510G-BX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine solution</td>
			<td>Shineteh Istrument</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>PHR1452</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton balls</td>
			<td>Shineteh Istrument</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11051-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Shineteh Istrument</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal Critical Care Inc.</td>
			<td>26675-46-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moria Vessel Clamp</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18320-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olsen-Hegar needle holder</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12002 - 12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline</td>
			<td>Shineteh Istrument</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blades</td>
			<td>Shinva</td>
			<td>s2646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Anesthesia Machine</td>
			<td>Sheng-Cing Instruments Co.</td>
			<td>STEP AS-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14072 - 10</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

technical refinement of a bilateral renal ischemia-reperfusion mouse model for acute kidney injury research

Kardiyak arrest büyük bir halk sağlığı yükü oluşturmaktadır. Akut böbrek hasarı (ABH), başarılı kardiyopulmoner resüsitasyondan sonra spontan dolaşımın (ROSC) geri dönmesini takiben kardiyak arrestten kurtulanlarda olumsuz bir belirteçtir. Tersine, böbrek fonksiyonunun ABH'den geri kazanılması, olumlu nörolojik sonuçların ve hastaneden taburcu olmanın bir göstergesidir. Bununla birlikte, ROSC'den sonra kardiyak arrestin neden olduğu böbrek hasarını önlemek için etkili bir müdahale eksiktir, bu da ek terapötik stratejilerin gerekli olduğunu düşündürmektedir. Renal hipoperfüzyon ve reperfüzyon, kardiyak arrest sonrası ABH'ye neden olan iki patofizyolojik mekanizmadır. Her iki böbreğin iskemi-reperfüzyona bağlı AKI'SININ (IR-AKI) hayvan modelleri, klinik ortamda ROSC'yi takiben ABH'li hastalarla karşılaştırılabilir. Bununla birlikte, her iki böbreğin IR-AKI'sini analiz etmek teknik olarak zordur, çünkü model yüksek mortalite ve böbrek hasarında geniş varyasyon ile ilişkilidir ve bu da analizi etkileyebilir. Hafif fareler seçildi, izofluran ile genel anestezi altına alındı, dorsolateral yaklaşımla cerrahiye tabi tutuldu ve operasyon sırasında vücut sıcaklıkları korundu, böylece doku hasarı azaltıldı ve tekrarlanabilir bir akut renal IR-ABH araştırma protokolü oluşturuldu.

Bilateral renal IR-ABH cerrahisinin kalitesi, daha fazla mikroskobik veya moleküler analizden önce değerlendirilmelidir. Cerrahi sırasında, renal pedikül mikrovasküler klips ile klemplendikten hemen sonra böbreğin pembeden koyu kırmızıya renk değiştirip değiştirmediğine bakılarak renal iskemi doğrulanmalıdır (Şekil 1). Ameliyattan sonra, IR-ABH cerrahisinin neden olduğu böbrek hasarı, sonuçların başlangıçtan itibaren kan üre nitrojeni ve kreatinin seviyesinde b...

Watch this Scientific Journal Video about Technical Refinement of a Bilateral Renal Ischemia-Reperfusion Mouse Model for Acute Kidney Injury Research at JoVE.com

Technical Refinement of a Bilateral Renal Ischemia-Reperfusion Mouse Model for Acute Kidney Injury Research

Bu çalışma, akut böbrek hasarı araştırmaları için bilateral renal iskemi-reperfüzyonun bir fare modelinin teknik olarak iyileştirilmesine odaklanan bir protokol oluşturdu.

Akut Böbrek Hasarı Araştırmaları için Bilateral Renal İskemi-Reperfüzyon Fare Modelinin Teknik İyileştirilmesi

Cardiac arrest poses a large public health burden. Acute kidney injury (AKI) is an adverse marker in survivors of cardiac arrest following the return of ...

Akut böbrek hasarı, dolaşımın geri dönüşünden sonra kardiyak arrest olan hastalarda yüksek mortalite ile ilişkili önemli bir risk faktörüdür. Bu prosedür akut böbrek hasarını indüklemek için yapılabilir. Bu protokol, renal iskemi reperfüzyonunu doğru, güvenli ve tutarlı bir şekilde indüklemektir.Prosedürü gösteren, laboratuvarımdan bir asistan olan Huang Cheng-Wei olacak. Başlamak için, anestezi uygulanmış sekiz haftalık bir C57BL / 6 erkek fareyi, vücut ısısını korumak için elektrikli battaniyeli bir ameliyat platformuna yüzüstü pozisyonda yerleştirin. Ardından, arkaya dokunun, lomber omurgayı bulun ve son kaburganın her iki tarafının altındaki costovertebral açıları arayın.Tıraş etmek için epilasyon losyonu uygulayın ve costovertebral açı bölgesinin her iki tarafına yakın saçları ovalayın. Cerrahi bölgeyi bir Betadine solüsyonu ve pamuk topları kullanarak% 75 alkol kullanarak dezenfekte edin. Cildi sol costovertebral açının altına nazikçe kaldırmak için ince uçlu forseps kullanın.Daha sonra makas kullanarak sol kanatta lomber orta hattan cilt gerginlik çizgileri boyunca bir santimetre eğik dorsolateral kesi oluşturun. Ardından, sol böbreği görselleştirmek için sol kanadın kas duvarını kesin. Sol böbreği forseps ile çevre dokudan dikkatlice itin ve ayırın.Ardından, böbrek pedikülünü tanımlayın. Sol renal pedikülü mikrovasküler bir klipsle sıkıştırın. Böbrek renginde pembeden koyu kırmızıya gözle görülür bir değişiklikle iskemiyi doğrulayın.Sıkıştırma sırasında kurumayı önlemek için, böbreği steril tuzlu suyla ıslak pamuk topları ile örtün. 25 dakika sonra, sol böbreğin reperfüzyonunu başlatmak için sol mikrovasküler klipsi açın. Böbreği karın boşluğuna geri getirin.Karın boşluğunu 6/0 emilebilir dikiş materyalleri ile kapatın. Serbestçe hareket etmeye ve beslenmeye başlayana kadar fareyi gözlemleyin. Renal pedikül klemplemesi sonrası renal iskemi burada gösterilmiştir.Böbrek renginin pembeden koyu kırmızıya doğru değişmesi, böbrek perfüzyonunun yetersiz hale geldiğini ortaya koymaktadır. Kontrollerle karşılaştırıldığında, renal reperfüzyondan iki gün sonra serum kan üre azotu ve kreatinin düzeyleri arttı. Bu teknik, araştırmacıların akut böbrek hasarına karşı yeni terapötik yaklaşımları keşfetmeleri için bir yol açmaktadır.

Research

JoVE Journal

Medicine

Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

Normotermik Kardiyak Arrest ve Kardiyopulmoner Resusitasyon: İskemi-Reperfüzyon Hasarı Fare Modeli

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

Tıp

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Farelerde Akut Böbrek Hasarı ve Post Yaralanma Fibrozis iskemi-reperfüzyon Model

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Sol ön inen arter ligasyonu ile Miyokard İskemi-reperfüzyon Hasarı bir fare modeli

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Renal Ischaemia Reperfusion Injury: A Mouse Model of Injury and Regeneration

Renal İskemi Reperfüzyon Hasarı: Yaralanma Fare Modeli ve Rejenerasyon

Renal ischaemia reperfusion injury (IRI) is a common cause of acute kidney injury (AKI) in patients and occlusion of renal blood flow is unavoidable ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Bağırsak İskemi-reperfüzyon Hasarı Murin Modeli

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

Göz İçi Basıncı Yükselmesi ile Retina İskemi-Reperfüzyon Hasarı Fare Modeli

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

Inducing Ischemia-reperfusion Injury in the Mouse Ear Skin for Intravital Multiphoton Imaging of Immune Responses

Bağışıklık Yanıtları intravital multiphoton Görüntüleme Fare Kulak Skin uyaran İskemi-reperfüzyon yaralanması

Ischemia-reperfusion injury (IRI) occurs when there is transient hypoxia due to the obstruction of blood flow (ischemia) followed by a subsequent ...

Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

Serebral iskemi-reperfüzyon iki damar tıkanıklığı fare modeli

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

Farelerde miyokardiyal Iskemi reperfüzyon sonrası koroner akış rezervi değerlendirilmesi

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...

A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery

Rekonstrüktif Mikrocerrahide İskemi-Reperfüzyon Hasarı Nın İnceleştirilmesinde Klinik Öncesi Sıçan Modeli

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many ...