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•
13:22 min
September 13th, 2022
DOI :
10.3791/63967-v
Chapters
0:04
Introduction
1:00
Transforming cDNA Library into the QuerySchizosaccharomyces pombe Mutant Strain and Screening Multicopy Suppressors
5:16
Validating the Suppressors of the Phenotype Associated with the Query Mutant Strain
7:41
Isolation of the Plasmid from the Schizosaccharomyces pombeSuppressor Clones
9:55
Identification of the Gene Encoded by the Suppressor Clone
10:48
Results: Screening Multicopy Suppressor of ell1 Deletion-Associated Genotoxic Stress Sensitivity
12:49
Conclusion
Transcript
サプレッサースクリーニングは、目的の遺伝子の機能、およびそれらが生体内で関与する可能性のある経路および生物学的プロセスに光を当てる遺伝的相互作用を特定します。この手法は、他のアプローチでは実証されなかった可能性のある2つの遺伝子産物間の遺伝的関係を特定できます。酵母におけるこのようなスクリーニングの結果は、ほとんどの基本的な生物学的経路とプロセスが進化全体にわたって保存されているため、高真核生物にまで拡張できます。
このスキームの成功は、入手可能性、高品質、および酵母細胞への形
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Summary
この研究は、 シゾサッカロミセス・ポンベにおけるマルチコピーサプレッサー遺伝子スクリーニングのプロトコルについて説明しています。このスクリーニングでは、ゲノムワイドなプラスミドライブラリを使用して、クエリ変異株に関連する機能喪失表現型のサプレッサークローンを特定します。 ell1 null変異体の新規遺伝子抑制因子をこのスクリーンを用いて同定した。
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