Name: lineage tracing of inducible fluorescently-labeled stem cells in the adult mouse brain
Uploaded: 2022-05-20T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Lineage Tracing of Inducible Fluorescently-Labeled Stem Cells in the Adult Mouse Brain at JoVE.com

يود المؤلفون أن يشكروا الدكتورة ديانا كارلون (مستشفى بوسطن للأطفال، كلية الطب بجامعة هارفارد) والدكتور ماثيو لينز (مركز جوسلين للسكري. معهد أبحاث مركز مين الطبي) للإرشاد باستخدام mTert-rtTA.

تمت الموافقة على جميع الطرق الموضحة هنا من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانات (IACUC) بجامعة ولاية أوهايو.
1. إنشاء خط فأر Tet-On لتتبع السلالات ، واستراتيجيات التربية ، والتنميط الجيني للفئران الأترابية التجريبية
ملاحظة: هنا ، نوجز إنشاء نظام م...

     

يتم وصف طريقة لإنشاء واستخدام وتحليل خط الفأر الثلاثي المعدل وراثيا الذي يتتبع خط الفئران الذي يميز الخلايا الجذعية داخل دماغ الفأر البالغ في الجسم الحي. عندما يقترن ذلك بالتلطيخ المناعي أو تطهير الدماغ ، يمكن تحقيق تحديد وتوصيف الخلايا الفلورية المتعقبة عبر الدماغ. توفر هذه التقني?...

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Antibody diluent</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>S080983-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antigen Retrieval Solution</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>S2367</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-GFP antibody</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A2311</td>
			<td>Use at 1:500-1:000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A18-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B6.Cg-Tg(tet0-cre)1Jaw/J</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>JAX:006234</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B6.129(Cg)-Gt(ROSA)26Sortm4(ACTB-tdTomato,-EGFP)Luo/J</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>JAX:007676</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blocking Solution (IHC)</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>20773</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt needle</td>
			<td>BSTEAN</td>
			<td>X0012SYHIV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coronal brain block</td>
			<td>Braintree</td>
			<td>BS-2000C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover slip</td>
			<td>Corning</td>
			<td>2850-22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>Leica</td>
			<td>CM1900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dibenzyl ether</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>33630</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>270997</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl Sulfoxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D8418</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey Serum</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D9663</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Doxycycline Hyclate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D9891</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycine</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>161-0718</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin Sodium Salt from Porcine Mucosa</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H3393</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histochoice Molecular Biology Tissue Fixative</td>
			<td>Amresco</td>
			<td>H120</td>
			<td>This product has since been discontinued, but can be replaced with Glyo-Fixx (Thermo Scientific, 6764265)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen Peroxide Solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>516813</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IHC Select TBS Rinse Buffer</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>20845</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Westward</td>
			<td>0143-95095-10</td>
			<td>This product requires a DEA license for storage and use.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A452-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope Slides</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>12-550-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milipore Block</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>20773</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting medium</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>5013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optimal Cutting Temperature Solution</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4583</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P6148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS Solution (10X)</td>
			<td>Teknova</td>
			<td>P0496</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sagittal brain block</td>
			<td>Braintree</td>
			<td>RBM-2000S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline</td>
			<td>Braun</td>
			<td>S8004-5264</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S7903</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sudan (Typogen) Black</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>199664</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetrahydrofuran</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>186562</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue cartridge</td>
			<td>Simport</td>
			<td>M512</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>1610407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween-20</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>655205</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>AnaSed</td>
			<td>sc-362950Rx</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

lineage tracing of inducible fluorescently-labeled stem cells in the adult mouse brain

تم تطوير خط فأر تتبع النسب التيلوميراز العكسي (Tert) للتحقيق في سلوك ومصير الخلايا الجذعية للأنسجة البالغة ، عن طريق عبور نظام "Tet-On" oTet-Cre mouse مع محول تنشط تتراسيكلين عكسي جديد (rtTA) مرتبط بمروج Tert ، والذي أثبتنا أنه يمثل مجموعة جديدة من الخلايا الجذعية الدماغية البالغة. هنا ، فإن إعطاء الدوكسيسيكلين المشتق من التتراسيكلين إلى mTert-rtTA::oTet-Cre الفئران سيحدد بشكل لا يمحى مجموعة من الخلايا التي تعبر عن جزء 4.4 كيلو بايت من المنطقة المروجة للجين Tert. عند الجمع بين مراسل Rosa-mTmG ، فإن الفئران mTert-rtTA::oTet-Cre::Rosa-mTmG ستعبر عن غشاء tdTomato (mTomato) حتى يحفز علاج الدوكسيسيكلين على استبدال تعبير mTomato بالغشاء EGFP (mGFP) في الخلايا التي تعبر أيضا عن Tert. لذلك ، عندما تتلقى هذه الفئران التي تتعقب النسب الثلاثي المعدل وراثيا الدوكسيسيكلين (فترة "النبض" التي يتم خلالها وضع علامة على الخلايا المعبرة عن TERT) ، ستصبح هذه الخلايا خلايا mGFP + ذات علامات لا تمحى ، والتي يمكن تتبعها لأي فترة زمنية مرغوب فيها بعد إزالة الدوكسيسيكلين (فترة "المطاردة") ، حتى لو فقد تعبير Tert لاحقا. ثم يتم تثبيت الأدمغة ومعالجتها من أجل التألق المناعي والتطبيقات النهائية الأخرى من أجل تفسير التغييرات في تنشيط الخلايا الجذعية ، والانتشار ، والالتزام بالنسب ، والهجرة إلى منافذ الدماغ المختلفة ، والتمايز إلى أنواع الخلايا الناضجة. باستخدام هذا النظام ، يمكن تزاوج أي فأر rtTA مع oTet-Cre ومراسل Rosa لإجراء تجارب تتبع السلالات "مطاردة النبض" التي يمكن تحريضها بالدوكسيسيكلين باستخدام علامات الخلايا الجذعية.

في حين أن إشارة الفلورسنت الناتجة عن نظام Tet-On مع مراسل الفلورسنت ستختلف اعتمادا على المروج للاهتمام والفلوروفور (الفلوروفور) المستخدم ، سنصف كيف تم تحليل النتائج مع mTert-rtTA::oTet-Cre::Rosa-mTmG. أدى تحليل أدمغة البالغين بعد مطاردة النبض إلى خلايا غشائية تعبر عن GFP في جميع أنحاء المنافذ التشريحية الم?...

Watch this Scientific Journal Video about Lineage Tracing of Inducible Fluorescently-Labeled Stem Cells in the Adult Mouse Brain at JoVE.com

Lineage Tracing of Inducible Fluorescently-Labeled Stem Cells in the Adult Mouse Brain

تسمح القدرة على وضع علامة دائمة على الخلايا الجذعية وذريتها باستخدام الفلوروفور باستخدام خط فأر تتبع النسب المعدلة وراثيا القابل للتحريض بإجراء تحليل مكاني وزمني للتنشيط والانتشار والهجرة و / أو التمايز في الجسم الحي. يمكن أن يكشف تتبع النسب عن معلومات جديدة حول الالتزام بالنسب ، والاستجابة للتدخل (التدخلات) ، وتعدد القدرات.

تتبع نسب الخلايا الجذعية المستحثة ذات العلامات الفلورية في دماغ الفأر البالغ

A telomerase reverse transcriptase (Tert) lineage-tracing mouse line was developed to investigate the behavior and fate of adult tissue stem cells, by ...

إن وضع علامة على الخلايا الجذعية وذريتها باستخدام خط فأر تتبع النسب المعدلة وراثيا القابل للحث يسمح بالتحليل المكاني والزماني للتنشيط والانتشار والهجرة و / أو التمايز بين الخلايا الجذعية البالغة في الدماغ في الجسم الحي. يمكن أن يكشف تتبع النسب عن معلومات جديدة حول الالتزام بالنسب ، والاستجابة للتدخلات ، والقوة المتعددة. تشمل مزايا نهج تتبع السلالات المعدلة وراثيا خصوصية تتبع سلالة خلية معينة ، والتعبير الذي لا يمحى عن البروتين الفلوري بغض النظر عن دوران الخلايا أو التمايز ، وانخفاض سمية الدوكسيسلين ، والتنشيط الشرطي ، وسهولة الاستخدام مع الفحوصات الشائعة في اتجاه المصب على أنسجة تتبع النسب بما في ذلك التلطيخ المناعي والتألق المناعي.نظرا للتأثير الواسع النطاق للدونة والخلية في دماغ البالغين ، فإن توصيف وتحليل الخلايا الجذعية البالغة سيساعد في الإبلاغ عن دراسة الأمراض العصبية التنكسية ، والتأثيرات الأيضية على لدونة الدماغ ، والشيخوخة ، وغيرها من الحالات ذات الصلة. للبدء ، قم بتسخين الشرائح إلى درجة حرارة الغرفة وبعد الإصلاح باستخدام الأسيتون البارد المثلج لمدة 15 دقيقة. اغسل الشرائح لمدة خمس دقائق في مخزن مؤقت للشطف 1X ، مع الاهتزاز بمعدل 60 دورة في الدقيقة في درجة حرارة الغرفة بين كل خطوة.تخلل لوقوف المستضدات النووية مع 0.3٪ Triton X-100 لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. Permeabilize لوقوف المستضدات السيتوبلازمية مع 0.3 ٪ Tween-20 لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. قم بإجراء استرجاع المستضد عن طريق شرائح الميكروويف في 50 إلى 100 ملليلتر من محلول استرجاع مستضد DAKO 1x على مستوى منخفض لمدة 10 دقائق ، مرتين.بعد ذلك ، اشطف بالمخزن المؤقت لمدة خمس دقائق في درجة حرارة الغرفة. احتضان الشرائح في 0.3٪ Typogen Black في 70٪ من الإيثانول لمدة 20 دقيقة في درجة حرارة الغرفة ثم اغسلها بمخزن مؤقت للشطف. ارسم حاجزا مسعورا حول الأنسجة.كتلة لمدة 20 دقيقة في 37 درجة مئوية مع حجب كاشف. وتحضن مع الأجسام المضادة الأولية المخففة في الأجسام المضادة المخففة بين عشية وضحاها عند أربع درجات مئوية. اغسل الشرائح لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة.في اليوم التالي ، احتضان الأقسام في الأجسام المضادة الثانوية Alexa Fluor لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. ثم اغسل الشرائح مرتين في المخزن المؤقت للشطف لمدة 10 دقائق. قم بتغطية أقسام الدماغ في 100 ميكرولتر من واحد إلى 500 جسم مضاد مضاد ل GFP مقترن ب AlexaFluor 488 ، واحتضن بين عشية وضحاها عند أربع درجات مئوية لتعزيز Fluor4 الداخلي ، ووضع علامة على الخلايا التي تم تتبعها.في اليوم التالي ، اغسل بمخزن مؤقت للشطف مرتين. ثم يغسل في الماء DI الجاري لمدة خمس دقائق. Counterstain مع 100 نانوغرام لكل ملليلتر 4'6-diamidino-2-phenylindole لمدة خمس دقائق.ثم يغسل في الماء DI الجاري لمدة خمس دقائق. أضف قطرة من وسط التركيب الآمن الفلورسنت فوق كل قسم من أقسام الأنسجة وأغلقها بغطاء 22 ملم × 22 ملم. يوصى بالتصوير في يوم التركيب لضمان الإشارة المثلى.لبدء التثبيت والتقسيم بعد التروية عبر القلب بعد إصلاح الأدمغة في 4٪ PFA بين عشية وضحاها عند أربع درجات مئوية. ثم مرة أخرى لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة. اغسل الأدمغة في 1x PBS لمدة ساعة مرتين في درجة حرارة الغرفة.قطع الدماغ إلى أقسام سميكة ملليمتر واحد باستخدام كتلة الدماغ السهمية ووضعها في خمسة ملليلتر أنابيب الطرد المركزي الصغيرة التي تحتوي على 1x PBS. بالنسبة للمعالجة المسبقة للميثانول ، ابدأ بالغسيل باستخدام 1x PBS لمدة ساعة واحدة مرتين في درجة حرارة الغرفة. يغسل في 50٪ الميثانول لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة.يغسل في 80٪ من الميثانول لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة. يغسل في الميثانول 100٪ لمدة ساعة واحدة ، مرتين ، في درجة حرارة الغرفة. عينات التبييض مع 5٪ بيروكسيد الهيدروجين في 20٪ ثنائي ميثيل سلفوكسيد والميثانول عند أربع درجات مئوية بين عشية وضحاها.بعد التبييض ، اغسل العينات في الميثانول لمدة ساعة واحدة مرتين في درجة حرارة الغرفة. يغسل في 20٪ ثنائي ميثيل سلفوكسيد والميثانول لمدة ساعة واحدة مرتين في درجة حرارة الغرفة. يغسل في 80٪ من الميثانول لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة.يغسل في 50٪ الميثانول لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة. يغسل في PBS لمدة ساعة واحدة مرتين في درجة حرارة الغرفة. يغسل في PBS 0.2٪ Triton X-100 لمدة ساعة واحدة مرتين في درجة حرارة الغرفة.بالنسبة للبقع المناعية لتطهير الأدمغة ، ابدأ باحتضان العينات في 1x PBS ، 0.2٪ Triton X-100 ، 20٪ DMSO ، 0.3 glycine molar ، عند 37 درجة مئوية بين عشية وضحاها على شاكر مداري. كتلة في 1x PBS ، 0.2 ٪ Triton X-100 ، 10 ٪ DMSO ، 6 ٪ مصل الماعز عند 37 درجة مئوية لمدة ثلاثة أيام على شاكر مداري. اغسل العينات في 1x PBS ، 0.2٪ Tween-20 ، 10 ميكروغرام لكل ملليلتر من ملح الصوديوم الهيبارين من الغشاء المخاطي للخنزير لمدة ساعة واحدة مرتين عند 37 درجة مئوية.بعد ذلك ، احتضان في 1x PBS ، 0.2 ٪ Tween-20 ، 10 ميكروغرام لكل ملليلتر الهيبارين ، 5 ٪ DMSO ، 3 ٪ مصل الماعز الذي يحتوي على تركيز واحد إلى 500 من الأرانب المضادة GFP AlexaFluor 488 عند 37 درجة مئوية على شاكر مداري لمدة يومين. اغسل العينات في 1x PBS ، 0.2٪ Tween-20 مع 10 ميكروغرام لكل ملليلتر من الهيبارين لمدة ساعة واحدة عند 37 درجة مئوية على شاكر مداري ثلاث مرات ثم مرة واحدة في اليوم لمدة يومين. احتضان العينات بين عشية وضحاها في ملليلتر واحد من 50٪ Tetrahydrofuran والماء.احتضان العينات لمدة ساعة واحدة في ملليلتر واحد من 80٪ THF Tetrahydrofuran والماء. احتضان العينات مرتين لمدة ساعة واحدة في 100٪ Tetrahydrofuran. جفف العينات بمنديل معقم واحتضنها في ثنائي كلورو الميثان حتى تغرق في قاع القارورة.لا تحضن لأكثر من 60 دقيقة. احتضان العينات في ملليلتر واحد من ثنائي بنزيل الأثير حتى تصبح واضحة. تخزين العينات في ثنائي البنزيل الأثير في درجة حرارة الغرفة حتى تصبح جاهزة للتصوير.لتصوير أقسام الدماغ الملطخة بالمناعة، قم بتحليل الشرائح عبر المجهر البؤري، حيث يمكن تأكيد التعبير المشترك عن الأجسام المضادة المتعددة. نحن نستخدم مجهر Leica Stellaris خمسة مع كاشفات HyD S الهجينة. لتصوير الأدمغة التي تم تطهيرها ، استخدم مجهرا بؤريا مقلوبا مع مرحلة آلية ووظيفة تبليط آلية.ابدأ بوضع قسم دماغي مسطح على طبق زجاجي سفلي في المغمورة في إيثر ثنائي البنزيل. لوحظ اختلاف ملحوظ في كثافة الفلورسنت عبر مناطق مختلفة من الدماغ وأنواع مختلفة من الخلايا بعد فترة مطاردة النبض في السلالات التي تتبعت الأدمغة. كان للخلايا الظهارية المشيمية في الضفيرة المشيمية غشاء خلية سميك وإشارة فلورسنت خضراء قوية تشير إلى أنها مشتقة من خلايا تيرت الإيجابية التي يمكن تمييزها بسهولة عن الخلايا المحيطة.كانت أنواع الخلايا الأصغر الأخرى في سدى الضفيرة المشيمية تحتوي على إشارة GFP أضعف. في المخيخ ، عبرت الخلايا الدبقية Bergmann عن مستويات أعلى من GFP من خلايا السلة ، كما كان هناك اختلاف في تعبير GFP بين خلايا السلة الفردية. بالنسبة للمحاور العصبية الحسية للمصنع داخل الطبقة الكبيبية للمصباح الشمي ، عبرت أيضا عن مستويات عالية من محاور الخلايا العصبية الحسية GFP الشمية التي تملأ الطبقة الكبيبية من المصباح الشمي عبرت عن مستويات عالية من الطماطم الغشائية ، أو التألق الأحمر عند مقارنتها بمعظم مناطق الدماغ الأخرى حتى عندما تكون نفس الخلايا العصبية إيجابية GFP مما يشير إلى أن بعض الخلايا يبدو أنها تفقد إشارة الطماطم ببطء أكبر أثناء تتبع الأنساب.في المقابل ، في الضفيرة المشيمية GFP عبرت الخلايا الإيجابية عن الطماطم المنخفضة. في معظم مناطق الدماغ الأخرى ، يتم التعبير عن إشارات الطماطم بمستوى منخفض عبر معظم أنواع الخلايا مع الخلايا البطانية كونها بعض الخلايا الوحيدة التي كانت إشارة الفلورسنت ساطعة بما يكفي لتبرز بشكل واضح من خلفية الفلورسنت الحمراء لأنسجة المخ. أهم شيء يجب تذكره هو أن إشارة الفلورسنت في الأدمغة التي تم تطهيرها تتلاشى بشكل أسرع من معظم الفحوصات المناعية الأخرى.تذكر أن تصور عيناتك في أقرب وقت ممكن وفي غضون سبعة أيام. بعد ذلك ، يمكن إجراء تصوير شرائح الدماغ أو الأدمغة الواضحة ، وتلوين العلامات بإشارات GFP وقياسنا الكمي ل Fluorence باستخدام برامج برمجية.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Isolation and Expansion of the Adult Mouse Neural Stem Cells Using the Neurosphere Assay

العزل والتوسع في الخلايا الجذعية العصبية الكبار باستخدام الفحص Neurosphere

Isolation and expansion of the putative neural stem cells (NSCs) from the adult murine brain was first described by Reynolds and Weiss in 1992 employing a ...

Growing Neural Stem Cells from Conventional and Nonconventional Regions of the Adult Rodent Brain

تزايد الخلايا الجذعية العصبية من المناطق التقليدية وغير التقليدية من الدماغ الكبار القوارض

Recent work demonstrates that central nervous system (CNS) regeneration and tumorigenesis involves populations of stem cells (SCs) resident within the ...

Electrophysiological Recording in the Brain of Intact Adult Zebrafish

تسجيل الكهربية في الدماغ سليمة من اسماك الزرد الكبار

Previously, electrophysiological studies in adult zebrafish have been limited to slice preparations or to eye cup preparations and electrorentinogram ...

Assessing Cell Cycle Progression of Neural Stem and Progenitor Cells in the Mouse Developing Brain after Genotoxic Stress

تقييم التقدم دورة الخلية الجذعية العصبية من الخلايا والسلف في تطوير الدماغ ماوس بعد الإجهاد السمية الوراثية

Neurons of the cerebral cortex are generated during brain development from different types of neural stem and progenitor cells (NSPC), which form a ...

Lineage-reprogramming of Pericyte-derived Cells of the Adult Human Brain into Induced Neurons

النسب-إعادة برمجة الخلايا المشتقة من خلية حوطية الدماغ البشري الكبار في الخلايا العصبية المستحثة

Direct lineage-reprogramming of non-neuronal cells into induced neurons (iNs) may provide insights into the molecular mechanisms underlying neurogenesis ...

Conditional Genetic Transsynaptic Tracing in the Embryonic Mouse Brain

شرطي عبر التشابك الوراثية للبحث عن المفقودين في المخ الجنينية الماوس

Anatomical path tracing is of pivotal importance to decipher the relationship between brain and behavior. Unraveling the formation of neural circuits ...

Laser-guided Neuronal Tracing In Brain Explants

موجهة بالليزر العصبية للبحث عن المفقودين في إإكسبلنتس الدماغ

We present a technique which combines an in vitro tracer injection protocol, which uses a series of electrical and pressure pulses to increase dye uptake ...

Isolation and Culture of Adult Neural Stem Cells from the Mouse Subcallosal Zone

العزلة والثقافة من الخلايا الجذعية البالغة العصبية من المنطقة تحت الثفني ماوس

Adult neural stem cells (aNSCs) can be used for the regeneration of damaged brain tissue. NSCs have the potential for differentiation and proliferation ...

An In Vivo Blood-brain Barrier Permeability Assay in Mice Using Fluorescently Labeled Tracers

An In Vivo Blood-brain Barrier Permeability Assay in Mice Using Fluorescently Labeled Tracers

في فيفو حاجز الدم في الدماغ نفاذية مقايسة في الفئران باستخدام المسمى فلوريسسينتلي تتبع

Blood-brain barrier (BBB) is a specialized barrier that protects the brain microenvironment from toxins and pathogens in the circulation and maintains ...

Intra-Arterial Delivery of Neural Stem Cells to the Rat and Mouse Brain: Application to Cerebral Ischemia

التسليم داخل الشرايين للخلايا الجذعية العصبية إلى الدماغ الفئران والفأر: تطبيق على الإقفاري الدماغي

Neural stem cell (NSC) therapy is an emerging innovative treatment for stroke, traumatic brain injury and neurodegenerative disorders. As compared to ...