Name: high-speed human temporal bone sectioning for the assessment of covid-19-associated middle ear pathology
Uploaded: 2022-05-18T14:00:00
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이 프로젝트에 도움을 주신 모하메드 리하르에게 감사드립니다. 이 연구는 부분적으로 국립 보건원 (T32DC000027, NSA)에 의해 지원되었습니다.

이 프로토콜은 IRB (IRB00250002) 승인과 인간 조직 및 감염성 물질의 사용에 대한 제도적 정책에 따라 개발되었습니다. 각 측두골 기증자는 사망 전에 서면 동의를 제공했거나 기증자의 가족으로부터 사후 동의를 얻었습니다. 이 프로토콜에 사용되는 모든 재료, 장비 및 소프트웨어에 대한 자세한 내용은 재료 표를 참조하십시오.
1. 측두골 수확
<ol><li>?...

<ol>
	<li>Nogueira, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+brief+history+of+otorhinolaryngology:+Otology,+laryngology+and+rhinology.">A brief history of otorhinolaryngology: Otology, laryngology and rhinology.</a> Brazilian Journal of Otorhinolaryngology. 73 (5), 693-703 (2007).</li><li>Pappas, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Otology+through+the+ages.">Otology through the ages.</a> Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 114 (2), 173-196 (1996).</li><li>Schuknecht, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Otopathology:+The+past,+present,+and+future.">Otopathology: The past, present, and future.</a> Auris Nasus Larynx. 23, 43-45 (1996).</li><li>Monsanto, R. D. C., Pauna, H. F., Paparella, M. M., Cureoglu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Otopathology+in+the+United+States:+History,+current+situation,+and+future+perspectives.">Otopathology in the United States: History, current situation, and future perspectives.</a> Otology &amp; Neurotology. 39 (9), 1210-1214 (2018).</li><li>Crowe, S. J., Guild, S. R., Polvogt, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Observations+on+the+pathology+of+high-tone+deafness.">Observations on the pathology of high-tone deafness.</a> Journal of Nervous and Mental Disease. 80, 480 (1934).</li><li>Andresen, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insights+into+presbycusis+from+the+first+temporal+bone+laboratory+within+the+United+States.">Insights into presbycusis from the first temporal bone laboratory within the United States.</a> Otology &amp; Neurotology. 43 (3), 400-408 (2022).</li><li>Schuknecht, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pathology of the Ear. , (1993).</li><li>Chole, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Labs+in+crisis:+Protecting+the+science--and+art--of+otopathology.">Labs in crisis: Protecting the science--and art--of otopathology.</a> Otology &amp; Neurotology. 31 (4), 554-556 (2010).</li><li>Nager, G. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pathology of the Ear and Temporal Bone. , (1993).</li><li>. COVID-19 Personal Protective Equipment (PPE) Available from: <a target="_blank" href="https://www.cdc.gov/niosh/emres/2019_ncov_ppe.html">https://www.cdc.gov/niosh/emres/2019_ncov_ppe.html</a> (2022)</li><li>Essalmani, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinctive+roles+of+Furin+and+TMPRSS2+in+SARS-CoV-2+infectivity.">Distinctive roles of Furin and TMPRSS2 in SARS-CoV-2 infectivity.</a> Journal of Virology. 96 (8), 0012822 (2022).</li><li>Ueha, R., Kondo, K., Kagoya, R., Shichino, S., Yamasoba, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ACE2,+TMPRSS2,+and+Furin+expression+in+the+nose+and+olfactory+bulb+in+mice+and+humans.">ACE2, TMPRSS2, and Furin expression in the nose and olfactory bulb in mice and humans.</a> Rhinology. 59 (1), 105-109 (2021).</li><li>Frazier, K. M., Hooper, J. E., Mostafa, H. H., Stewart, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SARS-CoV-2+virus+isolated+from+the+mastoid+and+middle+ear:+Implications+for+COVID-19+precautions+during+ear+surgery.">SARS-CoV-2 virus isolated from the mastoid and middle ear: Implications for COVID-19 precautions during ear surgery.</a> JAMA Otolaryngology - Head &amp; Neck Surgery. 146 (10), 964-966 (2020).</li><li>Cunningham, C. D., Schulte, B. A., Bianchi, L. M., Weber, P. C., Schmiedt, B. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microwave+decalcification+of+human+temporal+bones.">Microwave decalcification of human temporal bones.</a> Laryngoscope. 111 (2), 278-282 (2001).</li><li>Stephenson, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+location+of+Na+,+K+-ATPase+&#945;1+subunit+in+the+human+inner+ear.">Immunohistochemical location of Na+, K+-ATPase &#945;1 subunit in the human inner ear.</a> Hearing Research. 400, 108113 (2021).</li><li>McCall, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extralabyrinthine+manifestations+of+DFNA9.">Extralabyrinthine manifestations of DFNA9.</a> Journal of the Association for Research in Otolaryngology. 12 (2), 141-149 (2011).</li><li>Wu, P. Z., O'Malley, J. T., de Gruttola, V., Liberman, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+hearing+loss+is+dominated+by+damage+to+inner+ear+sensory+cells,+not+the+cellular+battery+that+powers+them.">Age-related hearing loss is dominated by damage to inner ear sensory cells, not the cellular battery that powers them.</a> The Journal of Neuroscience. 40 (33), 6357-6366 (2020).</li><li>Miller, M. E., Lopez, I. A., Linthicum, F. H., Ishiyama, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Connexin+26+immunohistochemistry+in+temporal+bones+with+cochlear+otosclerosis.">Connexin 26 immunohistochemistry in temporal bones with cochlear otosclerosis.</a> Annals of Otology, Rhinology &amp; Laryngology. 127 (8), 536-542 (2018).</li><li>Lopez, I. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+techniques+for+the+human+inner+ear.">Immunohistochemical techniques for the human inner ear.</a> Histochemistry and Cell Biology. 146 (4), 367-387 (2016).</li></ol>

인간의 측두골 연구는 내과 중이 병리학을 연구하는 데 중요하지만 시간과 자원 집약적 인 노력으로 남아 있습니다. 이 논문은 다이아몬드 마이크로 톱을 사용하여 추가 절편화 전에 신속하게 탈석회화 할 수있는 두꺼운 측두골 절편을 생성하여 조직 수확에서 연구까지의 시간을 9-10 개월에서 10-14 일로 단축 할 수있는 기술을 설명합니다. 이 기술은 측두골 처리에 필요한 자원을 줄이고 COVID-19 중...

인간의 측두골 연구는 내이와 중이의 병리학 및 병리 생리학을 연구하는 데 귀중한 자원을 제공합니다. 19세기 이전에는 이비인후과 질환 1,2,3에 대해 알려진 바가 거의 없었다. 이비인후과 질환을 더 잘 이해하고 "돌팔이의 손에서 청각 수술을 구하기"위해 Joseph Toynbee (1815-1866)는 인간 측두골의 조직 학적 섹션을 연구하는 방법을 개발했습니다3. 이 연구는 19 세기의 나머지 기간 동안 비엔나와 유럽 전역의 Adam Politzer (1835-1920)에 의해 촉진되었으며, 그는 측두골 섹션을 사용하여 귀 2,3,4에 영향을 미치는 많은 일반적인 조건의 조직 병리학을 설명했습니다.
미국 최초의 인간 측두골 실험실은 1927 년 존스 홉킨스 병원 (Johns Hopkins Hospital)에 문을 열었으며, 스테이시 길드 (Stacy Guild, 1890-1966)는 측두골 절편 5,6 방법을 개발했습니다. 길드가 개발 한 방법은 사후 수확, 고정, 질산에서의 탈석회화, 에탄올에서의 탈수, 셀로이드 임베딩, 절개, 염색 및 장착을 포함하는 9-10 개월 과정으로 구성되었습니다. 이 기술에 대한 수정은 나중에 Harold Schuknecht (1917-1996)7에 의해 이루어졌습니다. 그러나이 프로세스의 기본 구성 요소는 본질적으로 변경되지 않습니다.
측두골 실험실을 유지하는 데 필요한 중요한 자원은 측두골 연구에 대한 도전을 제시했으며 지난 30 년 동안 4,8 년 동안 인기가 감소하는 데 기여했을 가능성이 큽니다. 측두골 실험실 자원의 상당 부분은 측두골 준비의 9-10 개월 과정에 전념해야합니다. 준비에서 가장 시간이 많이 걸리는 단계 중 하나는 인체에서 가장 밀도가 높은 뼈 인 측두골의 탈석회화입니다. 탈석회화는 일반적으로 질산 또는 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA)에서 수행되며 용액 7,9를 자주 교체해야 하는 동안 몇 주에서 몇 달이 걸립니다. 또한, COVID-19 전염병과 관련된 것과 같이 인간의 귀에 대한 시간에 민감한 연구는 이러한 느린 준비 과정에 의해 방해받을 수 있습니다. 이 논문은 다이아몬드 마이크로 톱을 사용하여 측두골 수확 후 10-14 일 이내에 신속한 탈석회화 및 조직 분석을 가능하게하는 두꺼운 섹션을 생성하는 고속 측두골 절편화 기술을 설명합니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-ACE-2 Antibody (1:50 applied dilution)</td>
			<td>Novus Biologicals</td>
			<td>SN0754</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Furin Antibody (1:250 dilution)</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>EPR 14674</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-TMPRSS2 Antibody (1:1,000 dilution)</td>
			<td>Novus Biologicals</td>
			<td>NBP1-20984</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BX43 Manual System Microscope</td>
			<td>Olympus Life Science Solutions</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CBN/Diamond Hybrid Wafering Blade</td>
			<td>Pace Technologies</td>
			<td>WB-007GP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collin Mallet - 8&#39;&#39;</td>
			<td>Surgical Mart</td>
			<td>SM1517</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DS-Fi3 Microscope Camera</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dual Endogenous Enzyme Block (commercial blocking solution)</td>
			<td>Dako</td>
			<td>S2003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eaosin Stain</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>548-24-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formalin solution, neutral buffered 10%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>HT501128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formical-4 Decalcifier (formic acid decalcifying solution)</td>
			<td>StatLab</td>
			<td>1214-1 GAL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin Stain</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H9627</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HRP-Conjugated Anti-Rabbit Secondary Antibody (1:100 dilution)</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>PV6119</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImmPRESS HRP Horse Anti-Goat igG Detection Kit, Peroxidase (1:100 dilution)</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>MP-7405</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lambotte Osteotome</td>
			<td>Surgical Mart</td>
			<td>SM1553</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metallographic PICO 155P Precision Saw</td>
			<td>Pace Technologies</td>
			<td>PICO 155P</td>
			<td>microsaw</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NIS Elements Software Version 4.6</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraplast Plus</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P3683</td>
			<td>paraffin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Positive Charged Microscope Slides with White Frosted End</td>
			<td>Walter Products</td>
			<td>1140B15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Shandon Crytome FSE Cryostat Microtome</td>
			<td>New Life Scientific Inc.</td>
			<td>A78900104</td>
			<td>cryotome</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triology Pretreatment Solution (commercial pretreatment solution)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>920P-05</td>
			<td></td>
		</tr>		
 <tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>920P-05</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high-speed human temporal bone sectioning for the assessment of covid-19-associated middle ear pathology

인간의 측두골 절편의 조직병리학적 분석은 내이 및 중이 병리학을 연구하기 위한 근본적인 기술이다. 측두골 절편은 사후 측두골 수확, 고정, 탈석회화, 임베딩 및 염색에 의해 준비됩니다. 측두골의 밀도로 인해 탈석회화는 시간이 많이 걸리고 자원 집약적 인 과정입니다. 완전한 조직 준비는 평균 9-10 개월이 걸릴 수 있습니다. 이것은 이비병리학 연구를 늦추고 COVID-19 전염병과 관련된 연구와 같이 시간에 민감한 연구를 방해합니다. 이 논문은 조직 처리 속도를 높이기 위해 측두골 절편의 신속한 준비 및 탈석회화 기술을 설명합니다.
측두골은 표준 기술을 사용하여 사후 수확하고 10% 포르말린으로 고정하였다. 트윈 다이아몬드 블레이드가 달린 정밀 마이크로 톱을 사용하여 각 섹션을 세 개의 두꺼운 섹션으로 절단했습니다. 두꺼운 측두골 절편을 파라핀에 매립하기 전에 7-10일 동안 탈석회화 용액에서 탈석회시키고, 냉동고를 사용하여 얇은 (10 μm) 절편으로 절편화하고, 충전되지 않은 슬라이드에 장착하였다. 이어서, 조직 샘플을 탈파라핀화하고 항체 염색 (ACE2, TMPRSS2, Furin)을 위해 재수화시키고, 이미지화하였다. 이 기술은 수확에서 조직 분석까지의 시간을 9-10 개월에서 10-14 일로 단축했습니다. 고속 측두골 절제술은 이비병리학 연구의 속도를 높이고 조직 준비에 필요한 자원을 줄이는 동시에 COVID-19와 관련된 것과 같은 시간에 민감한 연구를 촉진 할 수 있습니다.

중이 점막 및 유스타키오관의 헤마톡실린 및 에오신 염색은 처리 후 중이 점막 및 중이 조직의 보존을 나타내었다(도 1). 면역조직화학 이미지는 중이 점막 및 유스타키오관 내에서 ACE2, TMPRSS2, 및 퓨린 단백질의 발현을 보여주었다(도 1). 중이 내에 이러한 단백질의 존재는 SARS-CoV-2가 중이 내의 호흡기 상피를 감염시킬 수있는 가능한 경로를 제공합니다<...

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High-Speed Human Temporal Bone Sectioning for the Assessment of COVID-19-Associated Middle Ear Pathology

이 기사에서는 트윈 다이아몬드 블레이드가있는 마이크로 소를 사용하여 측두골 면역 조직 화학의 신속한 탈석회화 및 분석을 위해 얇은 조각을 생성하는 신속한 인간 측두골 절편 기술을 설명합니다.

COVID-19 관련 중이 병리학 평가를위한 고속 인간 측두골 절편

Histopathologic analysis of human temporal bone sections is a fundamental technique for studying inner and middle ear pathology. Temporal bone sections ...

이 프로토콜은 측두골 처리 시간을 9 개월에서 10 개월에서 10 일에서 14 일로 줄입니다. 이 기술의 가장 큰 장점은 우리의 경우 COVID-19 관련 중이 병리학의 평가와 관련된 이토 병리학의 신속한 평가를 가능하게한다는 것입니다. 이 기술은 측두골의 시간에 민감한 연구에 특히 유용할 수 있다.앞으로는 내이 병리학을 연구하는 데 더 최적화 될 수 있습니다. 부검 중에 수확을 시작하고 두개골 신경을 내부 청각 운하로 급격하게 나눕니다. 첫 번째 뼈 절개를 골골과 평행하게하고 측두골의 편평한 부분에 내측으로 만듭니다.그런 다음 두 번째 뼈 절개를 측두골의 내측 경계에서 첫 번째 뼈와 평행하게 수행하십시오. 세 번째 절개를 서너 센티미터 앞쪽에 놓고 페트로우스 능선과 평행하게 만듭니다. 다음으로, 네 번째 절개를 페트로우스 능선에 두 센티미터 후방에서 세 번째 절개와 대략 평행하게 만듭니다.날카로운 해부를 사용하여 표본의 열등한 가장자리를 따라 부착 된 연조직을 제거하고 측두골을 제거하십시오. 수확 후, 즉시 조직을 10 % 완충 포르말린의 200 ~ 300 밀리리터에 잠급니다. 그런 다음 트윈 다이아몬드 블레이드가있는 정밀 마이크로 톱을 다섯 밀리미터 거리로 설정하십시오.신속한 조직 탈석회화를 위해 각 표본을 세 개의 섹션으로 잘라 측두골의 중앙 부분이 다섯 밀리미터 두께이고 양쪽 끝에있는 부분이 세 밀리미터에서 다섯 밀리미터 두께가되도록하십시오. 절편을 연화를 위해 실온에서 7 ~ 10 일 동안 0.37 몰 EDTA의 200 내지 300 밀리리터에 놓습니다. 중이 점막 및 유스타키오 관의 헤마톡실린 및 에오신 염색은 이러한 프로토콜을 사용하여 처리 후 조직이 보존되는 것으로 나타났다.면역 조직 화학 분석은 ACE2, 막횡단 프로테아제 세린 및 퓨린 단백질의 존재를 보여 주었고, 중이의 호흡기 상피에서 SARS-CoV2 감염의 가능한 뿌리를 제공했습니다. 측두골 조직을 다이아몬드 톱 내에 적절히 위치시키는 것이 중요합니다. 이 방법과 조합될 수 있는 대안적인 기술은 상이한 단백질, 상이한 조직 얼룩, 및 전사체학에 대한 면역조직화학을 포함한다.이 기술을 통해 우리는 COVID-19 전염병 기간 동안 중이 내에서 SARS-CoV2 감염에 관련된 단백질의 존재를 신속하게 평가할 수있었습니다.

Research

JoVE Journal

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Bioenergetics and the Oxidative Burst: Protocols for the Isolation and Evaluation of Human Leukocytes and Platelets

인간 백혈구 및 혈소판의 분리 및 평가를위한 프로토콜 : 생물 에너지와 산화 버스트

Mitochondrial dysfunction is known to play a significant role in a number of pathological conditions such as atherosclerosis, diabetes, septic shock, and ...

연구

면역학 및 감염병학

A Novel In vitro Model for Studying the Interactions Between Human Whole Blood and Endothelium

A Novel In vitro Model for Studying the Interactions Between Human Whole Blood and Endothelium

소설<em&gt; 시험관</em&gt; 인간의 전체 혈액과 내피 세포 사이의 상호 작용 유학을위한 모델

The majority of all known diseases are accompanied by disorders of the cardiovascular system. Studies into the complexity of the interacting pathways ...

Super-resolution Imaging of the Natural Killer Cell Immunological Synapse on a Glass-supported Planar Lipid Bilayer

유리 - 지원 평면 지질 이중층에 자연 살해 세포 면역 시냅스의 슈퍼 해상도 이미징

The glass-supported planar lipid bilayer system has been utilized in a variety of disciplines. One of the most useful applications of this technique has ...

Assessment of the Immunomodulatory Properties of Human Mesenchymal Stem Cells (MSCs)

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인간 중간 엽 줄기 세포의 면역 속성 (MSCS)의 평가

The immunomodulatory properties of multilineage human mesenchymal stem cells (MSCs) appear to be highly relevant for clinical use towards a wide-range of ...

Magnetic Stirrer Method for the Detection of Trichinella Larvae in Muscle Samples

Magnetic Stirrer Method for the Detection of Trichinella Larvae in Muscle Samples

의 검출을위한 자석 교반기 방법<em&gt; 선모충</em근육 샘플에서&gt; 애벌레

Trichinellosis is a debilitating disease in humans and is caused by the consumption of raw or undercooked meat of animals infected with the nematode ...

A Flow Cytometry-Based Cytotoxicity Assay for the Assessment of Human NK Cell Activity

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세포 독성의 평가 인간의 정밀 컷 폐 분할 영역에서 물질의 Immunomodulatory 효과

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말 초 혈액 및 림프 조직에서 기본 인간 T 세포의 시 냅 스 인터페이스의 평가

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