Name: lipid supplementation for longevity and gene transcriptional analysis in caenorhabditis elegans
Uploaded: 2022-12-09T13:05:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Lipid Supplementation for Longevity and Gene Transcriptional Analysis in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Vi takker P. Svay for vedlikeholdsstøtte. Dette arbeidet ble støttet av NIH-tilskudd R01AG045183 (MCW), R01AT009050 (MCW), R01AG062257 (MCW), DP1DK113644 (MCW), March of Dimes Foundation (MCW), Welch Foundation (MCW), HHMI investigator (M.C.W.) og NIH T32 ES027801 pre-doctoral student fellow (MS). Noen stammer ble levert av CGC, som er finansiert av NIH Office of Research Infrastructure Programs (P40 OD010440).

Figur 1 viser et skjema for lipidfôring ved hjelp av forskjellige eksperimentelle innstillinger.
1. Fremstilling av lipidbetingede bakterier
<ol><li>Forbered bakteriell fortynning diettbegrensning (BDR) baseløsning ved å oppløse 5,85 g NaCl, 1,0 g K 2 HPO 4 og6,0 g KH2PO4 (se materialtabell) i 999 ml avionisert vann. Juster pH til 6,0 med 0,5 M KOH, og filtrer deretter gjennom et 0...

<ol>
	<li>Fahy, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Update+of+the+LIPID+MAPS+comprehensive+classification+system+for+lipids+1.">Update of the LIPID MAPS comprehensive classification system for lipids 1.</a> Journal of Lipid Research. 50, 9-14 (2009).</li><li>Liebisch, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Update+on+LIPID+MAPS+classification,+nomenclature,+and+shorthand+notation+for+MS-derived+lipid+structures.">Update on LIPID MAPS classification, nomenclature, and shorthand notation for MS-derived lipid structures.</a> Journal of Lipid Research. 61 (12), 1539-1555 (2020).</li><li>Mutlu, A. S., Duffy, J., Wang, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+metabolism+and+lipid+signals+in+aging+and+longevity.">Lipid metabolism and lipid signals in aging and longevity.</a> Developmental Cell. 56 (10), 1394-1407 (2021).</li><li>Kimura, T., Jennings, W., Epand, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+specific+lipid+species+in+the+cell+and+their+molecular+mechanism.">Roles of specific lipid species in the cell and their molecular mechanism.</a> Progress in Lipid Research. 62, 75-92 (2016).</li><li>Duffy, J., Mutlu, A. S., Wang, M. C., Olsen, A., Gill, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+Metabolism,+Lipid+Signalling+and+Longevity.">Lipid Metabolism, Lipid Signalling and Longevity.</a> Ageing: Lessons from C. elegans. Healthy Ageing and Longevity. , 307-329 (2017).</li><li>Lesa, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long+chain+poly-unsaturated+fatty+acids+are+required+for+efficient+neurotransmission+in+C.+elegans.">Long chain poly-unsaturated fatty acids are required for efficient neurotransmission in C. elegans.</a> Journal of Cell Science. 116 (24), 4965-4975 (2003).</li><li>Folick, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lysosomal+signaling+molecules+regulate+longevity+in+Caenorhabditis+elegans.">Lysosomal signaling molecules regulate longevity in Caenorhabditis elegans.</a> Science. 347 (6217), 83-86 (2015).</li><li>Ramachandran, P. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lysosomal+signaling+promotes+longevity+by+adjusting+mitochondrial+activity.">Lysosomal signaling promotes longevity by adjusting mitochondrial activity.</a> Developmental Cell. 48 (5), 685-696 (2019).</li><li>Byrne, E. F. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+basis+of+Smoothened+regulation+by+its+extracellular+domains.">Structural basis of Smoothened regulation by its extracellular domains.</a> Nature. 535 (7613), 517-522 (2016).</li><li>Corsi, A. K., Wightman, B., Chalfie, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transparent+window+into+biology:+a+primer+on+Caenorhabditis+elegans.">Transparent window into biology: a primer on Caenorhabditis elegans.</a> Genetics. 200 (2), 387-407 (2015).</li><li>Nigon, V. M., F&#233;lix, M. -. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=History+of+research+on+C.+elegans+and+other+free-living+nematodes+as+model+organisms.">History of research on C. elegans and other free-living nematodes as model organisms.</a> WormBook. , 1-84 (2017).</li><li>Kutscher, L. M., Shaham, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Forward+and+reverse+mutagenesis+in+C.+elegans.">Forward and reverse mutagenesis in C. elegans.</a> WormBook. , 1-26 (2014).</li><li>Brooks, K. K., Liang, B., Watts, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+bacterial+diet+on+fat+storage+in+C.+elegans.">The influence of bacterial diet on fat storage in C. elegans.</a> PloS ONE. 4 (10), 7545 (2009).</li><li>Brock, T. J., Browse, J., Watts, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fatty+acid+desaturation+and+the+regulation+of+adiposity+in+Caenorhabditis+elegans.">Fatty acid desaturation and the regulation of adiposity in Caenorhabditis elegans.</a> Genetics. 176 (2), 865-875 (2007).</li><li>Brock, T. J., Browse, J., Watts, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+regulation+of+unsaturated+fatty+acid+composition+in+C.+elegans.">Genetic regulation of unsaturated fatty acid composition in C. elegans.</a> PloS Genetics. 2 (7), 108 (2006).</li><li>Watts, J. L., Phillips, E., Griffing, K. R., Browse, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deficiencies+in+C20+poly-unsaturated+fatty+acids+cause+behavioral+and+developmental+defects+in+Caenorhabditis+elegans+fat-3+mutants.">Deficiencies in C20 poly-unsaturated fatty acids cause behavioral and developmental defects in Caenorhabditis elegans fat-3 mutants.</a> Genetics. 163 (2), 581-589 (2003).</li><li>Watts, J. L., Browse, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+dissection+of+poly-unsaturated+fatty+acid+synthesis+in+Caenorhabditis+elegans.">Genetic dissection of poly-unsaturated fatty acid synthesis in Caenorhabditis elegans.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 99 (9), 5854-5859 (2002).</li><li>Watts, J. L., Browse, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Palmitoyl-CoA-specific+&#916;9+fatty+acid+desaturase+from+Caenorhabditis+elegans.">Palmitoyl-CoA-specific &#916;9 fatty acid desaturase from Caenorhabditis elegans.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 272 (1), 263-269 (2000).</li><li>Watts, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fat+synthesis+and+adiposity+regulation+in+Caenorhabditis+elegans.">Fat synthesis and adiposity regulation in Caenorhabditis elegans.</a> Trends in Endocrinology &amp; Metabolism. 20 (2), 58-65 (2009).</li><li>Peyou-Ndi, M. M., Watts, J. L., Browse, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+characterization+of+an+animal+&#916;12+fatty+acid+desaturase+gene+by+heterologous+expression+in+Saccharomyces+cerevisiae.">Identification and characterization of an animal &#916;12 fatty acid desaturase gene by heterologous expression in Saccharomyces cerevisiae.</a> Archives of Biochemistry and Biophysics. 376 (2), 399-408 (2000).</li><li>Spychalla, J. P., Kinney, A. J., Browse, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+an+animal+&#969;-3+fatty+acid+desaturase+by+heterologous+expression+in+Arabidopsis.">Identification of an animal &#969;-3 fatty acid desaturase by heterologous expression in Arabidopsis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 94 (4), 1142-1147 (1997).</li><li>Watts, J. L., Browse, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+characterization+of+a+&#916;5-fatty+acid+desaturase+from+Caenorhabditis+elegans.">Isolation and characterization of a &#916;5-fatty acid desaturase from Caenorhabditis elegans.</a> Archives of Biochemistry and Biophysics. 362 (1), 175-182 (1999).</li><li>Deline, M. L., Vrablik, T. L., Watts, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+supplementation+of+polyunsaturated+fatty+acids+in+Caenorhabditis+elegans.">Dietary supplementation of polyunsaturated fatty acids in Caenorhabditis elegans.</a> Journal of Visualized Experiments. (81), e50879 (2013).</li><li>Estes, R. E., Lin, B., Khera, A., Davis, M. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+metabolism+influence+on+neurodegenerative+disease+progression:+is+the+vehicle+as+important+as+the+cargo.">Lipid metabolism influence on neurodegenerative disease progression: is the vehicle as important as the cargo.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 14, 788695 (2021).</li><li>Sunshine, H., Iruela-Arispe, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membrane+lipids+and+cell+signaling.">Membrane lipids and cell signaling.</a> Current Opinion in Lipidology. 28 (5), 408-413 (2017).</li><li>Han, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mono-unsaturated+fatty+acids+link+H3K4me3+modifiers+to+C.+elegans+lifespan.">Mono-unsaturated fatty acids link H3K4me3 modifiers to C. elegans lifespan.</a> Nature. 544 (7649), 185-190 (2017).</li><li>O'Rourke, E. J., Kuballa, P., Xavier, R., Ruvkun, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#969;-6+Poly-unsaturated+fatty+acids+extend+life+span+through+the+activation+of+autophagy.">&#969;-6 Poly-unsaturated fatty acids extend life span through the activation of autophagy.</a> Genes &amp; Development. 27 (4), 429-440 (2013).</li><li>Steinbaugh, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid-mediated+regulation+of+SKN-1/Nrf+in+response+to+germ+cell+absence.">Lipid-mediated regulation of SKN-1/Nrf in response to germ cell absence.</a> eLife. 4, 07836 (2015).</li><li>Blackwell, T. K., Steinbaugh, M. J., Hourihan, J. M., Ewald, C. Y., Isik, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SKN-1/Nrf,+stress+responses,+and+aging+in+Caenorhabditis+elegans.">SKN-1/Nrf, stress responses, and aging in Caenorhabditis elegans.</a> Free Radical Biology and Medicine. 88, 290-301 (2015).</li><li>Ezzili, C., Otrubova, K., Boger, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fatty+acid+amide+signaling+molecules.">Fatty acid amide signaling molecules.</a> Bioorganic &amp; Medicinal Chemistry Letters. 20 (20), 5959-5968 (2010).</li><li>Qi, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+&#969;-3+fatty+acid+&#945;-linolenic+acid+extends+Caenorhabditis+elegans+lifespan+via+NHR-49/PPAR&#945;+and+oxidation+to+oxylipins.">The &#969;-3 fatty acid &#945;-linolenic acid extends Caenorhabditis elegans lifespan via NHR-49/PPAR&#945; and oxidation to oxylipins.</a> Aging Cell. 16 (5), 1125-1135 (2017).</li><li>Shemesh, N., Meshnik, L., Shpigel, N., Ben-Zvi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary-induced+signals+that+activate+the+gonadal+longevity+pathway+during+development+regulate+a+proteostasis+switch+in+Caenorhabditis+elegans+adulthood.">Dietary-induced signals that activate the gonadal longevity pathway during development regulate a proteostasis switch in Caenorhabditis elegans adulthood.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 10, 254 (2017).</li><li>Savini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lysosome+lipid+signalling+from+the+periphery+to+neurons+regulates+longevity.">Lysosome lipid signalling from the periphery to neurons regulates longevity.</a> Nature Cell Biology. 24 (6), 906-916 (2022).</li><li>Stiernagle, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+of+C.+elegans.">Maintenance of C. elegans.</a> WormBook. , (2006).</li><li>Wang, M. C., O'Rourke, E. J., Ruvkun, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fat+metabolism+links+germline+stem+cells+and+longevity+in+C.+elegans.">Fat metabolism links germline stem cells and longevity in C. elegans.</a> Science. 322 (5903), 957-960 (2008).</li><li>Jacob, T. C., Kaplan, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+EGL-21+carboxypeptidase+E+facilitates+acetylcholine+release+at+Caenorhabditis+elegans+neuromuscular+junctions.">The EGL-21 carboxypeptidase E facilitates acetylcholine release at Caenorhabditis elegans neuromuscular junctions.</a> The Journal of Neuroscience. 23 (6), 2122-2130 (2003).</li><li>Kass, J., Jacob, T. C., Kim, P., Kaplan, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+EGL-3+proprotein+convertase+regulates+mechanosensory+responses+of+Caenorhabditis+elegans.">The EGL-3 proprotein convertase regulates mechanosensory responses of Caenorhabditis elegans.</a> The Journal of Neuroscience. 21 (23), 9265-9272 (2001).</li><li>Bael, S. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mass+spectrometric+evidence+for+neuropeptide-amidating+enzymes+in+Caenorhabditis+elegans.">Mass spectrometric evidence for neuropeptide-amidating enzymes in Caenorhabditis elegans.</a> Journal of Biological Chemistry. 293 (16), 6052-6063 (2018).</li><li>Fu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+metabolic+fingerprinting+of+neutral+lipids+with+hyperspectral+stimulated+Raman+scattering+microscopy.">In vivo metabolic fingerprinting of neutral lipids with hyperspectral stimulated Raman scattering microscopy.</a> Journal of the American Chemical Society. 136 (24), 8820-8828 (2014).</li></ol>

Lipidtilskudd har blitt brukt i aldringsforskning for å belyse den direkte effekten av visse lipidarter på sunn aldring 6,7,23,26,27,31. Imidlertid kan lipidtilskuddsprosedyren være utfordrende, og enhver inkonsekvens mellom eksperimenter kan forårsake ikke-reproduserbare resultater. Her er den første detaljerte trinnvis...

Lipider Lipider er små hydrofobe eller amfipatiske molekyler som er oppløselige i organiske løsningsmidler, men uoppløselige i vann 1,2. Distinkte lipidmolekyler skiller seg fra hverandre basert på antall karboner inneholdt i deres kjeder, plassering, antall dobbeltbindinger og bundne strukturer, inkludert glyserol eller fosfater. Lipider spiller avgjørende roller i og på tvers av forskjellige celler for å regulere organismefunksjoner, inkludert konstituering av membran dobbeltlag, gir energilagring og fungerer som signalmolekyler 3,4.
For det første er lipider strukturelle komponenter av biologiske membraner, inkludert plasmamembranen og intracellulære subcellulære membraner som deler de indre rommene fra det ekstracellulære miljøet. For det andre er lipider den viktigste formen for energilagring hos virveldyr og virvelløse dyr. Nøytrale lipider, inkludert triacylglyceroler, lagres i lengre tid i forskjellige vev, inkludert i fettvev. I nematoden Caenorhabditis elegans er tarmen det viktigste metabolske fettlagringsorganet; Dens funksjon er ikke bare involvert i fordøyelse og absorpsjon av næringsstoffer, men også i avgiftningsprosessen, som ligner aktiviteten til pattedyrs hepatocytter. Andre fettlagringsvev inkluderer kimlinjen, der lipider er essensielle for å utvikle oocytter, og hypodermis, som består av hudlignende epidermale celler 3,5. For det tredje har flere bevis de siste årene antydet at lipider er kraftige signalmolekyler involvert i intra- og ekstracellulær signalering ved å virke direkte på en rekke reseptorer, inkludert G-proteinkoblede og nukleære reseptorer, eller indirekte via membranfluiditetsmodulasjon eller posttranslasjonelle modifikasjoner 6,7,8,9 . Videre studier vil fortsette å belyse de underliggende molekylære mekanismene for lipidsignalering for å fremme lang levetid og helsespan.
Modellorganismer er viktige for å løse spesifikke biologiske spørsmål som er for komplekse til å studere hos mennesker. For eksempel er rundorm C. elegans en utmerket modell for å gjennomføre genetisk analyse for å dissekere biologiske prosesser som er relevante for menneskelig ernæring og sykdom10. De svært konserverte molekylære veiene som er relevante for menneskelig fysiologi, komplekse vev, atferdsmønstre og rikelig genetiske manipulasjonsverktøy gjør C. elegans til en bemerkelsesverdig modellorganisme11. For eksempel er C. elegans utmerket i å videresende genetiske skjermer for å identifisere fenotypespesifikke gener, så vel som i genom-brede omvendte genetiske skjermer via RNA-interferens12.
I laboratorier dyrkes nematodene på agar petriplater frøet med en plen av Escherichia coli-bakterier, som gir makronæringsstoffer som proteiner, karbohydrater og mettede og umettede fettsyrer som energikilder og byggesteiner, og mikronæringsstoffer som kofaktorer og vitaminer13. I likhet med pattedyr syntetiserer nematoder fettsyremolekyler fra både palmitinsyre og stearinsyre (henholdsvis mettet 16-karbon og 18-karbonmolekyler) som er sekvensielt desaturert og langstrakt til en rekke mono-umettede fettsyrer (MUFA) og poly-umettede fettsyrer (PUFA) 14,15,16,17,18. Interessant nok er C. elegans i stand til de novo syntese av alle nødvendige fettsyrer og kjerneenzymer involvert i fettsyrebiosyntese, desaturasjon og forlengelse, noe som letter syntesen av langkjedede PUFA19. Forskjellig fra andre dyrearter, kan C. elegans konvertere 18-karbon og 20-karbon ω-6 fettsyrer til ω-3 fettsyrer med egne ω-3 desaturase enzymer. I tillegg har ormer en Δ12 desaturase som katalyserer dannelsen av linolsyre (LA) fra oljesyre (OA, 18: 1) 20,21. De fleste dyr eller planter mangler både Δ12 og ω-3 desaturaser og er dermed avhengige av diettinntak på ω-6 og ω-3 for å få sine PUFAer, mens C. elegans ikke krever diettfettsyrer22. Isolerte mutanter som mangler funksjonelle desaturase enzymer har blitt brukt til å studere funksjonene til spesifikke fettsyrer i forskjellige biologiske prosesser, inkludert reproduksjon, vekst, lang levetid og nevrotransmisjon. Effekten av individuelle fettsyrer på spesifikke biologiske veier kan løses ved hjelp av både en genetisk tilnærming og dietttilskudd16,17,23. Hittil har lipidforskning fokusert på å karakterisere gener involvert i lipidsyntese, nedbrytning, lagring og nedbrytning i nevrologiske og utviklingsmessige forhold24. Imidlertid begynner lipidens roller i levetidsregulering bare å bli avslørt.
Lipidsignalering i levetidsregulering Lipider spiller avgjørende roller i levetidsregulering ved å aktivere cellulære signalkaskader i forskjellige vev og celletyper. Nylige studier har fremhevet lipidens aktive roller i modulering av transkripsjon og cellecellekommunikasjon via lipidbindende proteiner eller anerkjennelse av membranreseptorer25. I tillegg tilbyr kosttilskudd lipidtilskudd et utmerket verktøy for å dissekere hvordan lipidmetabolismen påvirker levetiden i C. elegans. Distinkte MUFAer og PUFAer har vist seg å fremme lang levetid ved å aktivere transkripsjonsfaktorer26,27.
Levetidsmodeller, inkludert insulin / IGF-1-signalering og ablasjon av kimlinjeforløperceller, er assosiert med MUFA-biosynteseveien, og MUFA-tilskudd, inkludert oljesyre, palmitolsyre og cis-vaccenic, er tilstrekkelig til å forlenge C. elegans levetid26. Selv om levetidseffekten gitt av MUFA-administrasjonen krever ytterligere undersøkelser, vil den underliggende mekanismen sannsynligvis bli formidlet av SKN-1/Nrf2-transkripsjonsfaktoren, som er en nøkkelaktivator for oksidativ stressrespons og levetidsregulering28,29. Blant MUFA spiller en bestemt klasse av fete acyletanolamider kalt N-acyletanolaminer (NAE) avgjørende roller i forskjellige mekanismer, inkludert betennelse, allergier, læring, minne og energimetabolisme30. Spesielt har lipidmolekylet kjent som oleoyletanolamid (OEA) blitt identifisert som en positiv regulator av lang levetid ved å fremme translokasjonen av det lipidbindende proteinet 8 (LBP-8) inn i kjernen for å aktivere nukleære hormonreseptorer NHR-49 og NHR-807. Tilskudd av OEA-analogen KDS-5104 er tilstrekkelig til å forlenge levetiden, og induserer uttrykket av gener involvert i oksidative stressresponser og mitokondriell β-oksidasjon 7,8.
Samtidig har PUFA-rollen også vært knyttet til levetidsregulering. Administrering av PUFA ω-3 fettsyre α-linolensyre (ALA) fremmer lang levetid ved å aktivere transkripsjonsfaktorene NHR-49/PPARα, SKN-1/NRF og indusere mitokondriell β-oksidasjon31. Interessant nok aktiverer peroksiderte produkter av ALA, referert til som oksylipiner, SKN-1 / NRF, noe som tyder på at både PUFA og deres oksidative derivater kan gi levetidsfordeler23. Tilskudd av ω-6 fettsyre arakidonsyre (AA) og dihomo-γ-linolensyre (DGLA) forlenger levetiden via autofagiaktivering, fremmer proteinkvalitetskontroll og resulterer i nedbrytning av bortkastede og giftige proteinaggregater27,32. Mer nylig har en celle-ikke-autonom signalregulering mediert av lipidbindende protein 3 (LBP-3) og DGLA vist seg å være avgjørende for å fremme lang levetid ved å sende perifere signaler til nevroner, noe som tyder på en langdistanserolle av lipidmolekyler i kommunikasjon mellom vev på systemiske nivåer33. Den foreliggende studien rapporterer hvert trinn for å utføre lipidtilskudd med bakterier frøet på plater eller bakteriell suspensjon i flytende kultur. Disse metodene brukes til å vurdere levetid og transkripsjonsanalyse, ved hjelp av helkroppsinnhold eller dissekert vev avledet fra noen få ormer. Følgende teknikker kan tilpasses en rekke ernæringsstudier og tilbyr et gyldig verktøy for å dissekere hvordan lipidmetabolismen påvirker lang levetid og sunn aldring.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.5 mL Pestle</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>93-165P15</td>
			<td>For worm grinding with Trizol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9639-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AmfiRivert cDNA Synthesis Platinum Master Mix</td>
			<td>GenDEPOT</td>
			<td>R5600</td>
			<td>For reverse transcription from bulk worm samples</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Applied Biosystems QuanStudio 3 Real-Time PCR</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>A28567</td>
			<td>For qRT-PCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benchmark Scientific StripSpin 12 Microcentrifuge</td>
			<td>Benchmark Scientific</td>
			<td>C1248</td>
			<td>For spin down PCR tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Branson 450 Digital Sonifier, w/ 1/8&#34; tip</td>
			<td>Branson Ultrasonic Corporation</td>
			<td>100-132-888R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>C298-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholesterol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C8503-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D8418-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf 5424 R centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22620444R</td>
			<td>For RNA extraction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf vapo protect mastercycler pro</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>950030010</td>
			<td>For reverse transcription</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, Absolute (200 Proof)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP2818-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Greiner Bio-One CELLSTAR, 12 W Plate</td>
			<td>Neta Scientific</td>
			<td>665180</td>
			<td>12-well plates for licuid feeding</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Greiner Bio-One Petri Dish, Ps, 100 x 20 mm</td>
			<td>Neta Scientific</td>
			<td>664161</td>
			<td>For bacterial LB plates and worm 10-cm NGM plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Greiner Bio-One Petri Dish, Ps, 60 x 15 mm</td>
			<td>Neta Scientific</td>
			<td>628161</td>
			<td>For worm6-cm NGM plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Invitrogen nuclease-free water</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>AM9937</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoproanol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>PX1835-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Levamisole hydrochloride</td>
			<td>VWR</td>
			<td>SPCML1054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lipl-4Tg</td>
			<td>MCW Lab</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Transgenic C. elegans</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lipl-4Tg;fat-3(wa22)</td>
			<td>MCW Lab</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Transgenic C. elegans</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luria Broth Base</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>12795-084</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate (MgSO4)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M2643-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroAmp EnduraPlate Optical 96-Well Fast Clear Reaction Plate with Barcode</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>4483354</td>
			<td>96-well qPCR plate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroAmp Optical Adhesive Film</td>
			<td>Applied BioSystem</td>
			<td>4311971</td>
			<td>For sealing the 96-well qPCR plate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milli-Q Advantage A10 Water Purification System</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>Z00Q0V0WW</td>
			<td>Deionized water used to make all reagents, including buffer and cultural media, unless specified as nuclease-free water in the protocol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center</td>
			<td>N/A</td>
			<td>C. elegans wild isolate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoDrop ND-1000 Spectrophotometer</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For measuring RNA concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OP50</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Bacteria used as C. elegans food</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potasium phosphate dibasic trihydrate (K2HPO4&#183;3H2O)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P5504-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potasium phosphate monobasic (KH2PO4)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P0662-2.5KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power SYBR Green cells-to-Ct kit</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>4402953</td>
			<td>For reverse transcription and qPCR from a few worms or worm tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power SYBR Green Master Mix</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>4367659</td>
			<td>For qPCR from bulk worm samples</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pure Bright germicidal ultra bleach&#160;</td>
			<td>KIK International LLC.</td>
			<td>59647210143</td>
			<td>6% house bleach For worm egg preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyrex spot plate with nine depressions</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>CLS722085-18EA</td>
			<td>Watch glass for dissecting the worms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNaseZap RNase Decontamination Solution</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>AM9780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium cloride (NaCl)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S7653-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide (NaOH)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>SX0590-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate dibasic heptahydrate (Na2HPO4&#183;7H2O)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S9390-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Sorvall Legend Mach 1.6R Centrifuge</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>7500-4337</td>
			<td>For bacteria collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Sorvall ST 8 centrifuge</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>7500-7200</td>
			<td>For worm egg preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRIzol Reagent</td>
			<td>TheroFisher</td>
			<td>15596018</td>
			<td>RNA extraction reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Turbo DNA-free kit</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>AM1907</td>
			<td>For removing DNA contamination in RNA extractions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortexer 59</td>
			<td>Denville Scientific INV</td>
			<td>S7030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VWR Disposable Pellet Mixers and Cordless Motor</td>
			<td>VWR</td>
			<td>47747-370</td>
			<td>For worm grinding with Trizol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VWR Kinetic Energy 26 Joules Mini Centrifuge C1413 V-115</td>
			<td>VWR</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For worm collection. Discontinued model, a similar one available at VWR with Cat# 76269-064</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Worm picker</td>
			<td>WormStuff</td>
			<td>59-AWP</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

lipid supplementation for longevity and gene transcriptional analysis in caenorhabditis elegans

Aldring er en kompleks prosess preget av progressive fysiologiske endringer som følge av både miljømessige og genetiske bidrag. Lipider er avgjørende for å utgjøre strukturelle komponenter i cellemembraner, lagre energi og som signalmolekyler. Regulering av lipidmetabolisme og signalering er viktig for å aktivere forskjellige levetidsveier. Rundorm Caenorhabditis elegans er en utmerket og kraftig organisme for å dissekere bidraget av lipidmetabolisme og signalering i levetidsregulering. Flere forskningsstudier har beskrevet hvordan dietttilskudd av spesifikke lipidmolekyler kan forlenge C. elegans levetid; Imidlertid kan mindre forskjeller i tilskuddsbetingelsene forårsake reproduserbarhetsproblemer blant forskere i forskjellige laboratorier. Her rapporteres to detaljerte tilskuddsmetoder for C. elegans ved bruk av lipidtilskudd enten med bakterier frøet på plater eller bakteriell suspensjon i flytende kultur. Også gitt her er detaljene for å utføre levetidsanalyser med livslang lipidtilskudd og qRT-PCR-analyse ved hjelp av et helt ormlysat eller dissekert vev avledet fra noen få ormer. Ved hjelp av en kombinasjon av longitudinelle studier og transkripsjonsundersøkelser ved lipidtilskudd, gir fôringsanalysene pålitelige tilnærminger for å dissekere hvordan lipider påvirker levetid og sunn aldring. Denne metoden kan også tilpasses ulike ernæringsmessige screeningtilnærminger for å vurdere endringer i en delmengde av transkripsjoner ved hjelp av enten et lite antall dissekerte vev eller noen få dyr.

Validering av transkripsjonsendringer ved bruk av noen få hele ormer ved lipidtilskudd For å undersøke om protokollen for å trekke ut og retrotranskribere RNA til cDNA fra noen få hele ormer er reproduserbar og sammenlignbar med dataene fra bulkormer, ble en langlivet ormstamme som overuttrykker lysosomalsyrelipase lipl-4 i tarmen ansatt 7,8,33,35. Transkripsjo...

Watch this Scientific Journal Video about Lipid Supplementation for Longevity and Gene Transcriptional Analysis in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Lipid Supplementation for Longevity and Gene Transcriptional Analysis in Caenorhabditis elegans

Den nåværende protokollen beskriver lipidtilskuddsmetoder i flytende og on-plate kulturer for Caenorhabditis elegans, kombinert med longitudinelle studier og gentranskripsjonsanalyse fra bulk eller noen få ormer og ormvev.

Lipidtilskudd for lang levetid og gentranskripsjonsanalyse i Caenorhabditis elegans

Aging is a complex process characterized by progressive physiological changes resulting from both environmental and genetic contributions. Lipids are ...

Denne protokollen beskriver to lipidtilskuddsstrategier med en kombinasjon av langsgående og transkripsjonsanalyse i modellorganismen, C.elegans. Teknikken beskriver hvordan man undersøker transkripsjonsendringer ved hjelp av få ormer eller dissekerte ormvev og hvordan væskefôring for en insektpopulasjon kan kombineres med hydroteknikker. Personer som utfører denne teknikken må praktisere vevsdisseksjon på grunn av det korte tidsvinduet for å utføre eksperimentet for å oppnå tilstrekkelig transkripsjonsanalyse.For å begynne, samle OP50-bakterier ved å sentrifugere den dyrkede kulturen over natten ved 4.000 G i 10 minutter ved romtemperatur. Kast supernatanten. Suspender bakteriepelleten i 20 ml bakteriell fortynning, diettbegrensning eller BDR-base ved vortexing og igjen, gjenta sentrifugeringen i 10 minutter.Etter å ha kastet supernatanten, suspendere bakteriepelleten i BDR-mediet på nytt for å forberede en 20 X BDR bakteriell bestand. Fortynn bakterielageret til 5X ved hjelp av et BDR-medium før bruk. Bruk etanol eller dimetylsulfoksid som løsningsmiddel, lag en lipidstamløsning i et nytt autoklavert hetteglass og fyll glassflasken med argon eller nitrogen for å forhindre oksidasjon.Overfør lipidstamløsningen til BDR-bakterieløsningen for å oppnå ønsket sluttkonsentrasjon under fôringsforhold. Bland det grundig ved å vortexing i 20 sekunder. Forbered kjøretøyet kontrollert ved å blande de samme volumene filtrert etanol eller dimetylsulfat med BDR-bakterier.Utfør lipidtilskudd og væskekultur ved å overføre ønsket mengde lipid eller kjøretøykontroll til hver brønn på en 12-brønnplate med tre til fire replikasjoner for hver fôringstilstand. Bland den synkroniserte Caenorrhabditis elegans ormsuspensjonen med 5X BDR-bakterier i et en-til-en-forhold for å oppnå en endelig konsentrasjon på 1.500 ormer per milliliter og 2.5X for bakterier. Overfør deretter to milliliter av ormbakterieblandingen til hver brønn på 12-brønnplaten.Når du er ferdig, pakk 12-brønnplaten med folie og rist platen i en 20 grader Celsius inkubator ved 100 RPMM for ønsket inkubasjonslengde. For lipidtilskudd på plater, frø en milliliter av lipidbetingede bakterier på midten av et 10 centimeter nematode vekstmedium eller NGM agarplate. Sørg for at den endelige arbeidsløsningen virvles flere ganger mellom såing av de to platene når du arbeider med et høyt antall plater.Tørk platen i mørket inne i en biosikkerhetshette. Overfør 3000 ormer fra den synkroniserte ormkulturen til 10 centimeter platen. Tørk platen i en biosikkerhetshette til ormer som svømte på lipidsupplerte plater, begynner å krype.Når den er tørket, inkuberer du den lipidkondisjonerte platen i en 20 grader Celsius inkubator i ønsket tidsperiode, og hvis du bruker flerumettede lipider, beskytter platen mot lys. Forbered 20 mikroliter endelig lysisløsning for hver prøve ved å blande 0,2 mikroliter DNase I med 19,8 mikroliter lysisløsning i et PCR-rør og bland det godt ved pipettering opp og ned fem ganger. For å trekke ut RNA fra det lille antallet hele ormer, fjern bakteriene ved å overføre 15 til 20 ormer fra bakterieplenen til en nyfrøet NGM-plate.Overfør 15 til 20 ormer fra den useedede NGM-platen til PCR-røret som inneholder 20 mikroliter av den nytilberedte endelige lysisoppløsningen med minimum antall bakterier og inkuber lysisreaksjonen i fem minutter ved romtemperatur. Når inkubasjonen er over, hold prøven i et fint kaldt vannbad og sonde sonde ormene fire ganger, fem sekunder hver gang med 30% amplitude og puls i 15 sekunder mellom hver sonikeringstid. Inkuber røret ved romtemperatur i fem minutter før du tilsetter to mikroliter stoppoppløsning i lysisreaksjonen og bland det ved forsiktig tapping.Inkuber reaksjonen i to minutter ved romtemperatur og sett deretter røret på is. For å trekke ut RNA fra ormvevet, plukk rundt 20 ormer fra bakterieplenen og legg dem i en fersk useedet NGM-plate for å fjerne bakteriene fra ormene. Overfør 20 ormer med så få bakterier som mulig til et klokkeglass som inneholder 500 mikroliter M9-oppløsning som inneholder fire mikromolar levamisol.Når ormene er immobilisert, dissekere germline eller tarmen ved hjelp av en 25 gauge nål som kan festes til en milliliter sprøyte. Bruk en autoklavert glasspipette, overfør det dissekerte vevet til PCR-røret og sett røret på is i to minutter, slik at materialet kan deponeres i bunnen. Fjern supernatanten fra PCR-røret før du tilsetter 20 mikroliter sluttlyseløsning og bland den godt ved å tappe.Etter å ha inkubert lysisreaksjonen i fem minutter, tilsett to mikroliter stoppløsning og trykk på røret flere ganger. Inkuber røret i to minutter før du fortsetter til revers transkripsjon. I valideringsstudien viste RNA ekstrahert fra en stor populasjon og noen få ormer lignende induksjon av neuropeptidbehandlingsgenene, egl-3 og egl-21.Det antyder at RNA-ekstraksjonen fra noen få ormer kan være et gyldig alternativ til standard CDNA-synteseteknikker fra store populasjoner. I den dissekerte tarmen til lipl-4-transgene ormer, supplert med dihomo-gamma-linolensyre, eller DGLA, ble de neuronale neuropeptidbehandlingsgenene ikke indusert. DGLA-tilskudd i forskjellige konsentrasjoner reddet levetidsforlengelse i ormene ved fett-3 knockdown.Ormer med lipidtilskudd kan også behandles for RNA-sekvensering, proteomikk, metabolomikk og atferdsstudier for å identifisere ytterligere fenotyper under disse spesifikke forholdene. Denne metoden kan brukes på aldringsforskning, lipidbiologi og ethvert annet forskningsområde som tar sikte på å etablere et forhold mellom en bestemt fenotype og en ernæringsmessig faktor eller metabolitt.

Research

JoVE Journal

Biology

Lipid Supplementation for Longevity and Gene Transcriptional Analysis in Caenorhabditis elegans

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Males and hermaphrodites are the two naturally found sexual forms in the nematode C. elegans. The amoeboid sperm are produced by both males and ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Grunnleggende<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; Metoder: Synkronisering og observasjon

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Utvinning og analyse i<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Dietary Supplementation of Polyunsaturated Fatty Acids in Caenorhabditis elegans

Dietary Supplementation of Polyunsaturated Fatty Acids in Caenorhabditis elegans

Dietary Tilskudd av flerumettede fettsyrer i<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Fatty acids are essential for numerous cellular functions. They serve as efficient energy storage molecules, make up the hydrophobic core of membranes, ...

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Metoder for å studere endringer i iboende Protein samling med alder i Caenorhabditis elegans

In the last decades, the prevalence of neurodegenerative disorders, such as Alzheimer's disease (AD) and Parkinson's disease (PD), has grown. These ...

Quantification of Lipid Abundance and Evaluation of Lipid Distribution in Caenorhabditis elegans by Nile Red and Oil Red O Staining

Quantification of Lipid Abundance and Evaluation of Lipid Distribution in Caenorhabditis elegans by Nile Red and Oil Red O Staining

Kvantifisering av Lipid overflod og evaluering av Lipid distribusjon i Caenorhabditis elegans av Nilen rød og olje Red O flekker

Caenorhabditis elegans is an exceptional model organism in which to study lipid metabolism and energy homeostasis. Many of its lipid genes are conserved ...

Combined Nucleotide and Protein Extractions in Caenorhabditis elegans

Combined Nucleotide and Protein Extractions in Caenorhabditis elegans

Kombinert Nucleotide og Protein utdrag i Caenorhabditis elegans

A single biological sample holds a plethora of information, and it is now common practice to simultaneously investigate several macromolecules to capture ...

Purification and Analysis of Caenorhabditis elegans Extracellular Vesicles

Purification and Analysis of Caenorhabditis elegans Extracellular Vesicles

Rensing og analyse av Caenorhabditis elegans Ekstracellulære vesikler

The secretion of small membrane-bound vesicles into the external environment is a fundamental physiological process of all cells. These extracellular ...

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

Modellering Alder-Assosiert Neurodegenerative Sykdommer i Caenorhabditis elegans

Battling human neurodegenerative pathologies and managing their pervasive socioeconomic impact is becoming a global priority. Notwithstanding their ...