2.2K Views
•
12:49 min
•
August 17th, 2022
DOI :
August 17th, 2022
•0:05
Introduction
0:39
Donor Liver Procurement
5:10
Back-Table Preparation of the Liver
6:02
Recipient Hepatectomy
7:58
Donor Liver Engraftment and Perioperative Management
11:04
Results: Graft Performance, Intraoperative Vital Parameters, and the Liver Maximum Function Capacity Test
12:23
Conclusion
Transcript
Aktuella frågor inom levertransplantation kräver implementering av stora djurmodeller. Detta protokoll beskriver tekniken för ortotopisk levertransplantation hos svin utan användning av en veno-venös bypass. Denna teknik minskar avsevärt procedurens logistiska och tekniska komplexitet.
Dessutom, genom att engrafera lever efter 20 timmars statisk kylförvaring, simulerar vår modell utökade kriterier donatorförhållanden. Börja med att placera den bedövade donatorgrisen i ryggläge och fixera lemmarna vid basen av operationsbordet med elastiska band. Skrubba huden med ett antiseptiskt medel och täck djuret med sterila draperier.
Efter att ha bekräftat förlusten av kronbladsreflex, utför en midline laparotomi som börjar vid xiphoidprocessen genom att använda monopolar cautery och skära av falciformen och de triangulära ligamenten med sax och bipolär cautery. Efter tillräcklig leverdissektion, skär den vänstra delen av membranet över ett avstånd av 5 till 10 centimeter med sax för att lokalisera bröstkorgssegmentet i den nedåtgående aortan. Omsluta och placera en 3-0 polyfilamentligatur utan åtdragning.
Skär den högra delen av membranet över ett avstånd av 5 till 10 centimeter med sax och identifiera den suprahepatiska vena cava sämre. Flytta tarmen till övre vänstra delen av givaren och gå in i retroperitonealutrymmet genom tvärgående snitt av bukhinnan över ett avstånd av 5 till 10 centimeter med sax. Placera två 3-0 polyfilamentligaturer runt bukaortan.
En kranial av iliac bifurcation och en ca 3 centimeter kranialt utan åtdragning. Placera en annan ligatur runt den infrahepatiska vena cava underlägsen utan att dra åt. Dra åt den kaudalt belägna första ligaturen runt bukaortan.
Efter att ha täppt bukaortan kranialt i den andra ligaturen, gör ett tvärgående snitt mellan båda ligaturerna med sax. Sätt in kanylen i snittet och säkra den med den återstående ligaturen. Med sax skär du av den suprahepatiska underlägsna vena cava långt kranialt nära det högra förmaket.
Efter blodförlust på cirka 1 500 till 2 000 ml korsklämmer du bröstsegmentet av den nedåtgående aortan genom att binda ligaturen och börja förgradera perfusion. Dra åt ligaturen placerad runt den infrahepatiska vena cava underlägsen. Skär kärlet kranialt i ligaturen och sätt in den kirurgiska aspiratorn.
Efter perfusion med 3 500 ml konserveringslösning under cirka 10 till 15 minuter, skära av insidan av supra hepatisk vena cava underlägsen donatorgrisen och skära sedan av den infrahepatiska vena cava underlägsen vid nivån av vänster njurven. Sever gallgången kranial i bukspottskörtelvävnaden mellan två 3-0 polyfilamentligaturer för att undvika gallspill och skär sedan av portalvenen kranial i bukspottkörteln. Leta reda på celiakiartären efter trubbig förberedelse och följ dorsalt till bukaortan.
Punktmarkera respektive aortasegment för att skapa en lapp för engraftmentet. Skär ut membranet runt superhepatisk vena cava sämre och skär av de återstående vidhäftningarna med sax. Extrahera levern och lägg på is.
Utför en cholecystektomi eller dra åt en ligatur runt den cystiska kanalen och spola sedan den gemensamma gallgången med minst 20 ml konserveringslösning. Placera perfusionskanylen i portalvenen och spola transplantatet med 500 ml konserveringslösning. Placera transplantatet i en steril skål placerad på is.
Ta bort lymfvävnaden i aortasegmentet och leverartären och därigenom identifiera och täppa till de arteriella sidogrenarna och lymfkärlen med antingen klämmor, ligaturer eller suturer. Fortsätt på samma sätt med portalvenen. Utför förkortning av kärlen och beredning av aortaplåstret endast vid och engraftment för att ta hänsyn till de enskilda anatomiska omständigheterna.
Identifiera den superhepatiska vena cava inferior och placera suturer runt båda membranvenerna efter att ha tagit bort omgivande membranvävnad. Placera den bedövade mottagargrisen i ryggläge. Gå in i bukhålan och skär av de falciforma och triangulära ligamenten hos det bedövade djuret med sax och bipolär cautery som visats tidigare.
Efter tillräcklig leverdissektion, omsluta både supra och infrahepatisk vena cavae sämre nära leverparenkymen. Incise det ytliga peritoneala skiktet som täcker hepatoduodenalt ligament och identifiera leverartärerna innan du går in i leverparenkymen. Dissekera med bipolär cautery eller placera klämmor, ligaturer eller suturer.
Dissekera och skära av den gemensamma gallgången under den cystiska kanalkorsningen mellan två ligaturer. Identifiera portalvenen och omsluta nära leverparenkymen. Identifiera bukaortan efter att ha snittat det avaskulära skiktet mellan höger och vänster membranmuskler.
Förbered aortan för aortainostomos genom avlägsnande av den omgivande vävnaden. Utför mottagarhepatektomi genom att placera i en traumatisk vaskulär klämma på portalvenen och skära av portalvenen nära leverparenkymen följt av den infrahepatiska vena cava. Placera en atraumatisk vaskulär klämma på den suprahepatiska vena cava inklusive det omgivande membranet medan du caudally drar tillbaka levern och skär kärlet nära leverparenkymen.
Ta bort mottagarleveren från bukhålan. Placera donatorlevern i bukhålan och förkorta givaren eller mottagaren suprahepatisk vena cava sämre än en tillräcklig längd samtidigt som man undviker kinking eller för mycket spänning på anastomosen. Placera en enda 5-0 monofilament sutur som en stödjande tråd som anpassar det högra hörnet av givaren och mottagaren supra hepatisk vena cavae sämre.
Börja dorsalsidan av anastomosen från fartygens vänstra hörn med en 5-0 monofilament dubbelarmad löpande sutur. Ta bort stödtråden när du når det högra hörnet och säkra den löpande suturen med en klämma, fortsätt sedan med den ventrala sidan av anastomosen igen, med början från kärlens vänstra hörn. Efter att ha slutfört den ventrala sidan av anastomosen, dra åt suturen med flera knutar utan att begränsa kärldiametern för att undvika stenos.
Utför en vaskulär anastomos av givar- och mottagarportalvenen som visats tidigare med hjälp av en 6-0 monofilament dubbelarmad sutur. Börja portalens venösa reperfusion genom att ta bort kärlklämman, täppa till mottagarportalvenen och ockludera givarens infrahepatiska vena cava sämre med en vaskulär klämma efter att ha tömt cirka 200 till 400 ml blod. Ta långsamt bort kärlklämman som täcker mottagaren supra hepatisk vena cava inferior och sök efter aktiv blödning.
Förkorta givaren och/eller mottagaren infrahepatisk vena cava inferior. utför sedan en vaskulär anastomos av givaren och mottagaren infrahepatisk vena cavae underlägsen. Efter att ha klämt bukaortan och gjort ett snitt för att passa plåstret, börja aortaastomosen med en 6-0 monofilament dubbelarmad löpande sutur vid kranialhörnet av snittet eller plåstret.
När du når det kaudala hörnet, säkra den löpande suturen med en klämma och slutför anastomosen igen som börjar vid kranialhörnet. Dra åt suturen med flera knutar och ta långsamt bort kärlklämman efter att ha kontrollerat alla vaskulära anastomoser. Placera en kateter i den gemensamma gallgången och säkra den med en enda ligatur.
Stäng buken tillfälligt genom att anpassa muskelfascian och huden med en löpande sutur och täck buken med klamrande film eller draperier för att undvika termisk förlust. Den genomsnittliga operationstiden var 103,50 minuter inklusive en medel- och leverfas på 27,13 minuter. Endast två mottagare genomgick en anhepatisk fas på mer än 30 minuter medan alla mottagare visade sjunkande laktatserumkoncentrationer 4 timmar efter portal venös reperfusion.
Mottagarna krävde ökade koncentrationer av noradrenalin omedelbart före och under hela den anhepatiska fasen för att stabilisera det genomsnittliga artärtrycket vid 60 millimeter kvicksilver eller högre. Låga adrenalinkoncentrationer användes samtidigt för att öka hjärtminutvolymen under denna sårbara tidsperiod. Efter engraftment förblev det genomsnittliga arteriella trycket och erforderliga doser av vasopressorer stabila.
LiMAx-värdena som erhölls 6 timmar efter venös reperfusion var jämförbara med de värden som uppmättes hos leverdonatorerna före organtillvaratagande hos alla mottagare utom en med en anhepatisk fas på 34 minuter. Denna modell kan vara av särskilt intresse som avläsning för workups med fokus på mekanismer för ischemi och reperfusionsskada och rekonditionering av donatororgan med utökade kriterier.
I detta protokoll beskrivs en modell av ortotopisk levertransplantation hos svin efter statisk kylförvaring av donatororgan i 20 timmar utan användning av en veno-venös bypass under engraftment. Tillvägagångssättet använder en förenklad kirurgisk teknik med minimering av den anhepatiska fasen och sofistikerad volym- och vasopressorhantering.
Explore More Videos
ABOUT JoVE
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved