Name: in vitro digestion of emulsions in a single droplet via multi subphase exchange of simulated gastrointestinal fluids
Uploaded: 2022-11-18T13:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vitro Digestion of Emulsions in a Single Droplet via Multi Subphase Exchange of Simulated Gastrointestinal Fluids at JoVE.com

تم تمويل هذا البحث من قبل المشاريع RTI2018-101309-B-C21 و PID2020-631-116615RAI00 ، بتمويل من MCIN / AEI / 10.13039 / 501100011033 ومن قبل "ERDF طريقة لصنع أوروبا". تم دعم هذا العمل (جزئيا) من قبل مجموعة فيزياء الغروانية الحيوية والسوائل (المرجع PAI-FQM115) بجامعة غرناطة (إسبانيا).

1. تسلسل التنظيف لجميع الأواني الزجاجية المستخدمة في تجارب علوم السطح
<ol><li>افرك الأواني الزجاجية بمحلول تنظيف مركز (انظر جدول المواد) مخفف بالماء (10٪).</li>
	<li>اشطفه جيدا بسلسلة من ماء الصنبور والبروبانول والماء المقطر والماء عالي النقاء. تجف في المقصورة وتخزينها في خزانة ?...

<ol>
	<li>McClements, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biophysics+of+digestion:+Lipids.">The biophysics of digestion: Lipids.</a> Current Opinion in Food Science. 21, 1-6 (2018).</li><li>McClements, D. J., Li, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structured+emulsion-based+delivery+systems:+Controlling+the+digestion+and+release+of+lipophilic+food+components.">Structured emulsion-based delivery systems: Controlling the digestion and release of lipophilic food components.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 159 (2), 213-228 (2010).</li><li>Corstens, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food-grade+micro-encapsulation+systems+that+may+induce+satiety+via+delayed+lipolysis:+A+review.">Food-grade micro-encapsulation systems that may induce satiety via delayed lipolysis: A review.</a> Critical Reviews in Food Science and Nutrition. 57 (10), 2218-2244 (2017).</li><li>Aguilera-Garrido, A., del Castillo-Santaella, T., Galisteo-Gonz&#225;lez, F., G&#225;lvez-Ruiz, M. J., Maldonado-Valderrama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigating+the+role+of+hyaluronic+acid+in+improving+curcumin+bioaccessibility+from+nanoemulsions.">Investigating the role of hyaluronic acid in improving curcumin bioaccessibility from nanoemulsions.</a> Food Chemistry. 351, 129301 (2021).</li><li>Rodr&#237;guez Patino, J. M., Carrera S&#225;nchez, C., Rodr&#237;guez Ni&#241;o, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implications+of+interfacial+characteristics+of+food+foaming+agents+in+foam+formulations.">Implications of interfacial characteristics of food foaming agents in foam formulations.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 140 (2), 95-113 (2008).</li><li>Wilde, P. J., Chu, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interfacial+&amp;+colloidal+aspects+of+lipid+digestion.">Interfacial &amp; colloidal aspects of lipid digestion.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 165 (1), 14-22 (2011).</li><li>Cabrerizo-V&#237;lchez, M. A., Wege, H. A., Holgado-Terriza, J. A., Neumann, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axisymmetric+drop+shape+analysis+as+penetration+Langmuir+balance.">Axisymmetric drop shape analysis as penetration Langmuir balance.</a> Review of Scientific Instruments. 70 (5), 2438-2444 (1999).</li><li>Maldonado-Valderrama, J., Muros-Cobos, J. L., Holgado-Terriza, J. A., Cabrerizo-V&#237;lchez, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bile+salts+at+the+air-water+interface:+Adsorption+and+desorption.">Bile salts at the air-water interface: Adsorption and desorption.</a> Colloids and surfaces B: Biointerfaces. 120, 176-183 (2014).</li><li>Maldonado-Valderrama, J., Terriza, J. A. H., Torcello-G&#243;mez, A., Cabrerizo-V&#237;lchez, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+digestion+of+interfacial+protein+structures.">In vitro digestion of interfacial protein structures.</a> Soft Matter. 9, 1043-1053 (2013).</li><li>Maldonado-Valderrama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Probing+in+vitro+digestion+at+oil-water+interfaces.">Probing in vitro digestion at oil-water interfaces.</a> Current Opinion in Colloid and Interface Science. 39, 51-60 (2019).</li><li>Brodkorb, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=INFOGEST+static+in+vitro+simulation+of+gastrointestinal+food+digestion.">INFOGEST static in vitro simulation of gastrointestinal food digestion.</a> Nature Protocols. 14 (4), 991-1014 (2019).</li><li>del Castillo-Santaella, T., Maldonado-Valderrama, J., Molina-Bolivar, J. A., Galisteo-Gonzalez, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+cross-linker+glutaraldehyde+on+gastric+digestion+of+emulsified+albumin.">Effect of cross-linker glutaraldehyde on gastric digestion of emulsified albumin.</a> Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 145, 899-905 (2016).</li><li>Macierzanka, A., Torcello-G&#243;mez, A., Jungnickel, C., Maldonado-Valderrama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bile+salts+in+digestion+and+transport+of+lipids.">Bile salts in digestion and transport of lipids.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 274, 102045 (2019).</li><li>Maldonado-Valderrama, J., Torcello-G&#243;mez, A., del Castillo-Santaella, T., Holgado-Terriza, J. A., Cabrerizo-V&#237;lchez, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subphase+exchange+experiments+with+the+pendant+drop+technique.">Subphase exchange experiments with the pendant drop technique.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 222, 488-501 (2015).</li><li>Bellesi, F. A., Ruiz-Henestrosa, V. M. P., Maldonado-Valderrama, J., Del Castillo Santaella, T., Pilosof, A. M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+interfacial+in+vitro+digestion+of+protein+and+polysaccharide+oil/water+films.">Comparative interfacial in vitro digestion of protein and polysaccharide oil/water films.</a> Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 161, 547-554 (2018).</li><li>Del Castillo-Santaella, T., Sanmart&#237;n, E., Cabrerizo-V&#237;lchez, M. A., Arboleya, J. C., Maldonado-Valderrama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+digestibility+of+&#946;-lactoglobulin+by+pulsed+light+processing:+A+dilatational+and+shear+study.">Improved digestibility of &#946;-lactoglobulin by pulsed light processing: A dilatational and shear study.</a> Soft Matter. 10 (48), 9702-9714 (2014).</li><li>Infantes-Garcia, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+gastric+lipid+digestion+of+emulsions+with+mixed+emulsifiers:+Correlation+between+lipolysis+kinetics+and+interfacial+characteristics.">In vitro gastric lipid digestion of emulsions with mixed emulsifiers: Correlation between lipolysis kinetics and interfacial characteristics.</a> Food Hydrocolloids. 128, 107576 (2022).</li><li>del Castillo-Santaella, T., Cebri&#225;n, R., Maqueda, M., G&#225;lvez-Ruiz, M. J., Maldonado-Valderrama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+in+vitro+digestibility+of+food+biopreservative+AS-48.">Assessing in vitro digestibility of food biopreservative AS-48.</a> Food Chemistry. 246, 249-257 (2018).</li><li>Torcello-G&#243;mez, A., Maldonado-Valderrama, J., J&#243;dar-Reyes, A. B., Cabrerizo-V&#237;lchez, M. A., Mart&#237;n-Rodr&#237;guez, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pluronic-covered+oil-water+interfaces+under+simulated+duodenal+conditions.">Pluronic-covered oil-water interfaces under simulated duodenal conditions.</a> Food Hydrocolloids. 34, 54-61 (2014).</li><li>Minekus, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standardised+static+in+vitro+digestion+method+suitable+for+food+-+an+international+consensus.">A standardised static in vitro digestion method suitable for food - an international consensus.</a> Food &amp; Function. 5 (6), 1113-1124 (2014).</li><li>Wege, H. A., Holgado-Terriza, J. A., Cabrerizo-V&#237;lchez, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+constant+surface+pressure+penetration+langmuir+balance+based+on+axisymmetric+drop+shape+analysis.">Development of a constant surface pressure penetration langmuir balance based on axisymmetric drop shape analysis.</a> Journal of Colloid and Interface Science. 249 (2), 263-273 (2002).</li><li>del Castillo-Santaella, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyaluronic+acid+and+human/bovine+serum+albumin+shelled+nanocapsules:+Interaction+with+mucins+and+in+vitro+digestibility+of+interfacial+films.">Hyaluronic acid and human/bovine serum albumin shelled nanocapsules: Interaction with mucins and in vitro digestibility of interfacial films.</a> Food Chemistry. 383, 132330 (2022).</li><li>Aguilera-Garrido, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+serum+albumins+in+delivery+systems:+Differences+in+interfacial+behaviour+and+interacting+abilities+with+polysaccharides.">Applications of serum albumins in delivery systems: Differences in interfacial behaviour and interacting abilities with polysaccharides.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 290 (5), 102365 (2021).</li></ol>

توضح هذه المقالة بروتوكولا معمما لقياس الهضم في المختبر للطبقات البينية باستخدام معدات إسقاط قلادة. يمكن تعديل البروتوكول وفقا للمتطلبات المحددة للتجربة عن طريق ضبط تكوين المخازن الهضمية ، والتي تستند إلى بروتوكول INFOGEST11,20 المنسق لتسهيل المقارنة مع ا...

يعد فهم كيفية هضم الدهون ، والتي تتضمن هضم المستحلب ، أمرا مهما لتصميم المنتجات بعقلانية بوظائف مخصصة1. الركيزة لهضم الدهون هي مستحلب حيث يتم استحلاب الدهون عند الاستهلاك عن طريق العمل الميكانيكي والاختلاط مع المواد الخافضة للتوتر السطحي في الفم والمعدة. أيضا ، فإن معظم الدهون التي يستهلكها البشر مستحلبة بالفعل (مثل منتجات الألبان) ، وفي حالة الرضع أو بعض كبار السن ، هذا هو الشكل الوحيد للاستهلاك. وبالتالي ، فإن تصميم المنتجات القائمة على المستحلب مع ملامح هضم محددة مهم جدا في التغذية1. علاوة على ذلك ، يمكن للمستحلبات تغليف وتقديم العناصر الغذائية أو الأدوية أو المواد الحيوية المحبة للدهون2 لمعالجة حالات الجهاز الهضمي المختلفة مثل السمنة3 ، وإغناء المغذيات ، والحساسية الغذائية ، وأمراض الجهاز الهضمي. في مستحلبات الزيت في الماء ، تحاط قطرات الدهون بطبقات بينية من المستحلبات مثل البروتينات والمواد الخافضة للتوتر السطحي والبوليمرات والجسيمات والمخاليط4. دور المستحلبات ذو شقين: تثبيت المستحلب5 وحماية / نقل المركب المغلف إلى موقع معين. يعتمد تحقيق هضم مخصص للمستحلبات على تكوينها الأولي ولكنه يتطلب أيضا مراقبة التطور المستمر لهذه الواجهة أثناء العبور عبر الجهاز الهضمي (الشكل 1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64158/64158fig01.jpg"> الشكل 1: تطبيق الهندسة البينية للمستحلبات لمعالجة بعض حالات الجهاز الهضمي الرئيسية. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64158/64158fig01large.jpg" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.</a>
هضم الدهون هو في النهاية عملية بينية لأنه يتطلب امتزاز الليباز (المعدة أو البنكرياس) على واجهة الزيت والماء لقطرات الدهون المستحلبة عبر الطبقة البينية للوصول إلى الدهون الثلاثية الموجودة في الزيت وتحللها إلى أحماض دهنية حرة وأحادي الجلسريد6. هذا مخطط في الشكل 2. يتنافس إنزيم الليباز المعدي مع البيبسين والفوسفوليبيدات في المعدة على واجهة الزيت والماء (الشكل 2، الهضم في المعدة). بعد ذلك ، يتنافس الليباز / الكوليباز البنكرياسي مع التربسين / الكيموتريبسين ، والدهون الفوسفاتية ، والأملاح الصفراوية ، والمنتجات الهضمية في الأمعاء الدقيقة. يمكن أن يغير البروتياز التغطية البينية ، ويمنع أو يفضل امتزاز الليباز ، في حين أن الأملاح الصفراوية نشطة للغاية على السطح وتحل محل معظم المستحلب المتبقي لتعزيز امتزاز الليباز (الشكل 2 ، الهضم المعوي). في النهاية ، يعتمد معدل ومدى تحلل الدهون على الخصائص البينية للمستحلب الأولي / المهضوم في المعدة ، مثل السماكة ، والوصلات بين الجزيئات / داخل الجزيئات ، والتفاعلات الكهروستاتيكية والمعقمة. وبناء على ذلك ، فإن مراقبة تطور الطبقة البينية أثناء هضمها توفر منصة تجريبية لتحديد الآليات والأحداث البينية التي تؤثر على امتزاز الليباز ، وبالتالي هضم الدهون.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64158/64158fig02.jpg"> الشكل 2: شكل تخطيطي يوضح دور السطوح البينية في هضم الليبيدات المعدية المعوية. يغير التحلل المائي للببسين التركيب السطحي في مرحلة المعدة ، بينما يتحلل الليباز المعدي الدهون الثلاثية. في الأمعاء الدقيقة ، يقوم التربسين / الكيموتريبسين بتحلل الفيلم البيني ، بينما يستمر تحلل الدهون عن طريق امتزاز BS / lipases ، والتحلل المائي للدهون الثلاثية ، وامتصاص المنتجات المحللة للدهون عن طريق الذوبان في مذيلات BS / المجمع. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64158/64158fig02large.jpg" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.</a>
يتم تنفيذ معدات إسقاط القلادة في جامعة غرناطة (UGR) بتقنية حاصلة على براءة اختراع ، وهي الشعيرات الدموية المزدوجة المحورية ، والتي تتيح تبادل الطور الفرعي للحل السائب7. تتكون الشعيرات الدموية ، التي تحمل قطرة القلادة ، من ترتيب من شعريتين متحدتي المحور متصلتين بشكل مستقل بكل قناة من حاقن دقيق مزدوج. يمكن لكل حاقن دقيق أن يعمل بشكل مستقل ، مما يسمح بتبادل المحتوى المتساقط عن طريق التدفق7. وفقا لذلك ، يتكون تبادل الطور الفرعي من الحقن المتزامن للمحلول الجديد مع الشعيرات الدموية الداخلية واستخراج المحلول السائب مع الشعيرات الدموية الخارجية باستخدام نفس معدل التدفق. تسمح هذه العملية باستبدال المحلول السائب دون أي اضطراب في المنطقة البينية أو حجم القطرة. تمت ترقية هذا الإجراء لاحقا إلى تبادل متعدد الأطوار الفرعية ، والذي يسمح بما يصل إلى ثمانية تبادلات متسلسلة للمرحلة الفرعية للمحلول السائبللقطرات 8. يتيح ذلك محاكاة عملية الهضم في قطرة مائية واحدة معلقة في وسط دهني عن طريق تبادل المحلول السائب بالتتابع مع وسائط اصطناعية تحاكي المقصورات المختلفة (الفم والمعدة والأمعاء الدقيقة). يتم تمثيل الإعداد بأكمله في الشكل 3 ، بما في ذلك تفاصيل المكونات. يتم توصيل المحاقن الموجودة في الحاقن الدقيق بالصمامات الثمانية ، كل منها متصل بأنبوب طرد مركزي دقيق يحتوي على السائل الهضمي الاصطناعي مع المكونات الموضحة في الشكل 2.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64158/64158fig03.jpg"> الشكل 3: منظر عام للأخطبوط مع جميع المكونات. كاميرا CCD ، المجهر ، محدد الموضع الدقيق ، الخلية المستقرة بالحرارة ، والشعيرات الدموية المزدوجة متصلة بشكل مستقل بحاقن دقيق مزدوج مع حقنتين متصلتين بثمانية صمامات vias. تتصل كل حقنة بأنابيب شعرية وأربعة أنابيب طرد مركزي دقيقة مع عينة وتفريغ واحد. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64158/64158fig03large.jpg" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.</a>
يوضح الشكل 4 أ كيف يتم حقن كل من موائل الهضم الاصطناعي في قطرة القلادة عن طريق تبادل الطور الفرعي عبر الشعيرات الدموية المزدوجة. يمكن تطبيق كل مركب هضمي مفصل في الشكل 2 في وقت واحد / بالتتابع ، لمحاكاة المرور عبر الجهاز الهضمي. تحتوي السوائل الهضمية الاصطناعية على إنزيمات مختلفة ومواد خافضة للتوتر السطحي الحيوي ، والتي تغير التوتر البيني للمستحلب الأولي ، كما هو مخطط في الشكل 4 ب. يسجل برنامج DINATEN (انظر جدول المواد) ، الذي تم تطويره أيضا في UGR ، تطور التوتر البيني في الوقت الفعلي حيث يتم هضم الطبقة البينية الأولية في المختبر. أيضا ، بعد كل مرحلة هضمية ، يتم حساب المرونة التوسعية للطبقة البينية عن طريق فرض تذبذبات دورية للحجم / المنطقة البينية على الطبقة البينية المستقرة وتسجيل استجابة التوتر بين الأنف. يمكن أن تتنوع الفترة / التردد وسعة التذبذب ، وتوفر معالجة الصور باستخدام البرنامج CONTACTO المعلمات الريولوجية التوسعية8.
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64158/64158fig04.jpg"> الشكل 4: أمثلة على ملامح الهضم . (أ) تخضع طبقة المستحلب الأولية لوسائط هضمية اصطناعية موضوعة في جهاز الطرد المركزي الدقيق عن طريق تبادل الطور الفرعي المتسلسل للمحاليل المختلفة في قطرة القلادة. (ب) التطور العام للتوتر البيني (المحور ص) للمستحلب الأولي كدالة للوقت (المحور السيني) حيث يتم هضمه في المختبر بواسطة مختلف الإنزيمات / المواد الخافضة للتوتر السطحي الحيوي في الوسائط الاصطناعية. يقيس تبادل المرحلة الفرعية النهائية مع السائل المعوي العادي امتزاز الدهون المهضومة عن طريق الذوبان في المذيلات المختلطة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64158/64158fig04large.jpg" target="_blank">الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.</a>
تقدم هذه الدراسة البروتوكول العام المصمم لقياس الهضم في المختبر للطبقات البينية باستخدام معدات إسقاط القلادة9. تخضع الطبقة البينية الأولية بالتتابع لظروف تحاكي المرور عبر الجهاز الهضمي ، كما هو موضح في الشكل 2. يتم حقن هذه الوسائط الهضمية المختلفة في قطرة القلادة عن طريق تبادل الطور الفرعي للحلول المختلفة الموجودة في أنابيب الطرد المركزي الدقيقة (الشكل 4 أ). يمكن تخصيص تركيبة هذه الوسائط اعتمادا على ظروف الجهاز الهضمي التي سيتم تقييمها ، وهي تحلل البروتين المعدي / المعوي / تحلل الدهون ، مما يسمح بقياس الآثار التراكمية و sinergies10. تتبع الظروف التجريبية المستخدمة لمحاكاة عملية الهضم في كل حجرة بروتوكول الإجماع الدولي الذي نشرته INFOGEST الذي يوضح بالتفصيل درجة الحموضة وكميات الشوارد والإنزيمات11. يسمح الجهاز التجريبي القائم على قطرة القلادة بتسجيل التوتر البيني في الموقع طوال عملية الهضم المحاكاة. يتم حساب الريولوجيا التوسعية للطبقة البينية في نهاية كل خطوة هضمية. بهذه الطريقة ، يقدم كل مستحلب ملف تعريف هضم يوضح خصائص الواجهات المهضومة ، كما هو موضح في الشكل 4 ب. هذا يسمح باستخراج الاستنتاجات المتعلقة بقابليتها أو مقاومتها للمراحل المختلفة من عملية الهضم. بشكل عام ، تحتوي الوسائط الهضمية الاصطناعية على حمض / درجة الحموضة الأساسية ، والكهارل ، والبروتياز (المعدة والأمعاء) ، والليباز (المعدة والأمعاء) ، والأملاح الصفراوية ، والدهون الفوسفاتية ، والتي تذوب في سوائل الجهاز الهضمي الخاصة بها (المعدة أو الأمعاء). يوضح الشكل 4B صورة عامة لتطور التوتر البيني للمستحلب ، الذي تعرض أولا لعمل البروتياز ، يليه الليباز. بشكل عام ، يعزز التحلل البروتيني للطبقة البينية زيادة التوتر البيني بسبب امتزاز الببتيدات المتحللة 9,12 ، بينما يؤدي تحلل الدهون إلى انخفاض حاد جدا في التوتر البيني بسبب امتزاز الأملاح الصفراوية والليباز 13. يستنفد تبادل المرحلة الفرعية النهائي مع السائل المعوي المحلول الأكبر من المواد غير الممتصة / المهضومة ويعزز امتصاص المركبات القابلة للذوبان وإذابة الدهون المهضومة في المذيلات المختلطة. يتم قياس ذلك من خلال زيادة التوتر السطحي المسجل (الشكل 4 ب).
باختصار ، يسمح التصميم التجريبي الذي تم تنفيذه في قطرة القلادة لمحاكاة الهضم في المختبر في قطرة واحدة بقياس التأثيرات التراكمية والتآزر حيث يتم تطبيق عملية الهضم بالتتابع على الطبقة البينية الأولية10. يمكن ضبط تكوين كل وسائط هضمية بسهولة لمراعاة خصوصيات أمراض الجهاز الهضمي ، بما في ذلك أمراض الجهاز الهضمي أو وسائط الجهاز الهضمي للرضع14. بعد ذلك ، يمكن استخدام تحديد الآليات البينية التي تؤثر على التحلل البروتيني وتحلل الدهون لتعديل الهضم عن طريق الهندسة البينية للمستحلبات. يمكن تطبيق النتائج التي تم الحصول عليها في تصميم مصفوفات غذائية جديدة ذات وظائف مخصصة مثل انخفاض الحساسية ، واستهلاك الطاقة المتحكم فيه ، وانخفاض قابلية الهضم15،16،17،18،19.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Alpha-chymotrypsin from bovine pancreas</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C4129</td>
			<td>Enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beta-lactoglobulin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L0130</td>
			<td>Emulsfier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9048-46-8</td>
			<td>Emulsfier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>10043-52-4</td>
			<td>Electrolyte</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Kronton instruments</td>
			<td>Centrikon T-124</td>
			<td>For separating oil and resins</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citrus pectin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P9135</td>
			<td>Emulsfier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>co-lipase FROM PORCINE PANCREAS</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C3028</td>
			<td>Enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CONTACTO</td>
			<td>University of Granada (UGR)</td>
			<td></td>
			<td>https://core.ugr.es/dinaten/, last access: 07/18/2022</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DINATEN</td>
			<td>University of Granada (UGR)</td>
			<td></td>
			<td>https://core.ugr.es/dinaten/, last access: 07/18/2022</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gastric lipase</td>
			<td>Lipolytech</td>
			<td>RGE15-1G</td>
			<td>Enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Serum Albumin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>70024-90-7</td>
			<td>Emulsifier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>INFOGEST</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>http://www.proteomics.ch/IVD/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipase from porcine pancreas, type II</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L33126</td>
			<td>Enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium metasilicate resins</td>
			<td>Fluka</td>
			<td>1343-88-0</td>
			<td>Resins to purify oil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro 90</td>
			<td>International products</td>
			<td>M-9051-04</td>
			<td>Cleaner</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>7647-14-5</td>
			<td>Electrolyte</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaH2PO4</td>
			<td>Scharlau</td>
			<td>10049-21-5</td>
			<td>To prepare buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OCTOPUS</td>
			<td>Producciones Cient&#237;ficas y T&#233;cnicas S.L. (G&#243;jar, Spain)</td>
			<td></td>
			<td>Pendandt Drop Equipment implemented with multi subphase exchange</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olive oil</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>1514</td>
			<td>oil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pancreatic from porcine pancreas</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P7545-25 g</td>
			<td>Enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pepsin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P6887</td>
			<td>Enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pluronic F127</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P2443</td>
			<td>Emulsifier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pluronic F68</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P1300</td>
			<td>Emulsfier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium deoxycholate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td></td>
			<td>Bile salts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium glycodeoxycholate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C9910</td>
			<td>Bile salts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium taurocholate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>86339</td>
			<td>Bile salts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Filter</td>
			<td>Millex-DP</td>
			<td>SLGP033R</td>
			<td>&#160;Syringe Filter 0.22 &#181;m pore size polyethersulfone</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T1426</td>
			<td>Enzyme</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro digestion of emulsions in a single droplet via multi subphase exchange of simulated gastrointestinal fluids

يتم استخدام المستحلبات حاليا لتغليف وتوصيل العناصر الغذائية والأدوية لمعالجة أمراض الجهاز الهضمي المختلفة مثل السمنة وإغناء المغذيات والحساسية الغذائية وأمراض الجهاز الهضمي. تعتمد قدرة المستحلب على توفير الوظيفة المطلوبة ، أي الوصول إلى موقع معين داخل الجهاز الهضمي ، أو تثبيط / تأخير تحلل الدهون ، أو تسهيل الهضم ، في النهاية على قابليته للتدهور الأنزيمي في الجهاز الهضمي. في مستحلبات الزيت في الماء ، تكون قطرات الدهون محاطة بطبقات بينية ، حيث تعمل المستحلبات على تثبيت المستحلب وحماية المركب المغلف. يعتمد تحقيق هضم مخصص للمستحلبات على تركيبتها الأولية ولكنه يتطلب أيضا مراقبة تطور تلك الطبقات البينية لأنها تخضع لمراحل مختلفة من الهضم المعدي المعوي. يسمح توازن فيلم سطح الإسقاط المعلق الذي يتم تنفيذه بتبادل متعدد الأطوار الفرعية بمحاكاة الهضم في المختبر للمستحلبات في قطرة مائية واحدة مغمورة في الزيت من خلال تطبيق نموذج هضم ثابت مخصص. يتم محاكاة العبور عبر الجهاز الهضمي من خلال تبادل الطور الفرعي للمحلول السائب الأصلي للقطرات مع الوسائط الاصطناعية ، مما يحاكي الظروف الفسيولوجية لكل حجرة / خطوة من الجهاز الهضمي. يتم تسجيل التطور الديناميكي للتوتر البيني في الموقع في جميع أنحاء الهضم المعدي المعوي المحاكي بأكمله. يتم قياس الخواص الميكانيكية للواجهات المهضومة ، مثل المرونة التوسعية واللزوجة ، بعد كل مرحلة هضم (عن طريق الفم ، المعدة ، الأمعاء الدقيقة). يمكن ضبط تكوين كل وسائط هضمية لمراعاة خصوصيات أمراض الجهاز الهضمي ، بما في ذلك أمراض الجهاز الهضمي ووسائط الجهاز الهضمي للرضع. يتم تحديد الآليات البينية المحددة التي تؤثر على التحلل البروتيني وتحلل الدهون ، مما يوفر أدوات لتعديل الهضم عن طريق الهندسة البينية للمستحلبات. يمكن التلاعب بالنتائج التي تم الحصول عليها لتصميم مصفوفات طعام جديدة بوظائف مخصصة مثل انخفاض الحساسية ، واستهلاك الطاقة المتحكم فيه ، وانخفاض قابلية الهضم.

يعرض هذا القسم أمثلة مختلفة لملفات تعريف الهضم المقاسة باستخدام الأخطبوط. يظهر المظهر العام لمطابقات ملف الهضم المحاكي في الشكل 4 ب. عادة ما يتم تمثيل التوتر السطحي ضد الوقت في ملف الهضم. يتم تمثيل المراحل المختلفة / خطوات الهضم التي تم النظر فيها بألوان مختلفة. تشكل المرحل?...

Watch this Scientific Journal Video about In vitro Digestion of Emulsions in a Single Droplet via Multi Subphase Exchange of Simulated Gastrointestinal Fluids at JoVE.com

In vitro Digestion of Emulsions in a Single Droplet via Multi Subphase Exchange of Simulated Gastrointestinal Fluids

يسمح توازن فيلم سطح الإسقاط المعلق الذي يتم تنفيذه بتبادل متعدد الأطوار ، يطلق عليه اسم الأخطبوط ، بمحاكاة ظروف الجهاز الهضمي من خلال تبادل الطور الفرعي المتسلسل للمحلول السائب الأصلي مع سوائل الجهاز الهضمي المحاكاة. تتم مراقبة محاكاة الهضم في المختبر عن طريق تسجيل التوتر السطحي للطبقة البينية المهضومة في الموقع.

في المختبر هضم المستحلبات في قطرة واحدة عن طريق تبادل متعدد الأطوار الفرعية لسوائل الجهاز الهضمي المحاكاة

Emulsions are currently being used to encapsulate and deliver nutrients and drugs to tackle different gastrointestinal conditions such as obesity, ...

توفر طريقتنا نموذجا للتحقيق في كيفية هضم العواطف عن طريق محاكاة عملية الهضم في قطرة أكوا واحدة ، والتي يغطيها مستحلب ويتم غمرها في طور الزيت. يمكننا تقييم تأثير المستحلبات المختلفة ، وعمل المكونات الهضمية المختلفة ، وتصميم واجهات يمكنها مقاومة أو تأخير الهضم في مواقع مختلفة داخل الجهاز الهضمي. يمكننا قياس التوتر البيني في C2 طوال عملية الهضم المحاكاة بأكملها ، ومرونة ولزوجة الطبقة البينية في نهاية خطوة الهضم.يمكن تعديل تركيزات وظروف الهضم وفقا لمتطلبات التجربة ، ويمكن تطبيق ذلك بالتتابع ، أو في وقت واحد مما يسمح بتقييم التآزر والآثار التراكمية. ونحن نعمل بقطرة واحدة ، لذلك نحتاج إلى كمية منخفضة جدا من العينة ، ولدينا تحكم عالي الدقة في المتغيرات التجريبية. لقد طبقنا هذه التقنية لتصميم استراتيجية لتولي هذا.أحد هذه الأساليب هو التصميم في الطبقة الأحفورية التي تتقاعد أو تتلقى عملية تحلل الدهون. نهج آخر هو استخدام مبتكري الليباز ، وقد حققنا في الآلية البينية لعمل الليباز. تم تطوير هذا الجهاز في الأصل لدراسة الهضم في المختبر.ومع ذلك ، يمكن استخدامه للدراسة الأحادية والتفاعل مع الدهون ، ويمكن أيضا تطبيقه لدراسة التركيز الدقيق الحرج تلقائيا. التقنية التجريبية يمكن الوصول إليها. تم تدريب باحث يدوي على استخدامه في أسبوع واحد.تحتاج إلى تنظيف المعدات جيدا ، وتنقية العينات والزيت من أجل منع وجود الملوثات النشطة السطحية. تحتاج إلى التعرف على الكمبيوتر البرمجي ، وتعلم التحكم في الأضواء وموضع القدرة ، والتخلص من الفقاعات الصغيرة. للبدء ، قطرة ماء رسمية للتحقق من التوتر السطحي للماء في درجة حرارة الغرفة.اضبط الكثافة التفاضلية على ماء الهواء في الحوار الأيسر ، وقم بقياس التوتر السطحي في الوقت الفعلي. لمدة خمس دقائق. املأ الوعاء النظيف بما لا يقل عن 0.002 لتر من الزيت النباتي النظيف ، وضعه في حامل الطعم في الخلية الحرارية.اضبط الكثافة التفاضلية على ماء الزيت النباتي وحقن 40 ميكرولتر بمعدل 0.5 ميكرولتر في الثانية. قياس التوتر في الوقت الحقيقي كل ثانية حتى نهاية الحقن. هذه عملية ديناميكية بسيطة.بعد ذلك ، احفظ البيانات وارسم التوتر السطحي كدالة لحجم القطرة وورقة البيانات. تأكد من أن نطاق حجم القطرة يوفر قيمة للتوتر السطحي بشكل مستقل عن حجم القطرة للمياه النظيفة. ارسم المنطقة البينية كدالة لحجم القطرة.سيتم استخدام هذا المنحنى لاحقا لمطابقة الحجم مع المنطقة البينية المقابلة. باستخدام المحقنة اليسرى ، قم بحقن الحجم في نطاق التوتر السطحي المستمر وسجل التوتر السطحي لمدة خمس دقائق. هذا للتحقق من عدم وجود مكونات نشطة سطحية في النظام.لإجراء التحكم الأولي ، قم بحقن حوالي 10 ميكرولتر من محلول المستحلب في الشعيرات الدموية لتشكيل السقوط ، وسجل الامتصاص في منطقة بينية ثابتة تبلغ حوالي 20 ملليمتر مربع لمدة ساعة واحدة. يمكن الحصول على القيم الدقيقة للحجم والمساحة من منحنى المعايرة المرسوم مسبقا. برمجة reology المخففة عن طريق ضبط سعة التذبذب على 1.25 ميكرولتر في الفترة إلى 10 ثوان.ثم قم ببرمجة الامتصاص في المنطقة البينية المحددة لمدة 10 ثوان. بعد ذلك ، لتسجيل برنامج الهضم في المعدة الامتصاص في المنطقة البينية المحددة لمدة 10 ثوان. املأ المحقنة اليسرى بسائل من الصمام الثاني.حقن 125 ميكرولتر من الصمام الثاني في خمسة ميكرولتر في الثانية مع المحقنة اليسرى ، وفي وقت واحد استخراج نفس الحجم بنفس المعدل مع المحقنة اليمنى. هذا هو تصور لعملية تبادل المرحلة الفرعية للمياه مع الأزرق الميثيلين. قم بتفريغ المحقنة اليمنى للخروج من الصمام الثامن وقم بتحميل المحقنة اليسرى مرة أخرى بسائل من الصمام الثاني.كرر هاتين الخطوتين 10 مرات لضمان التبادل الكامل للمرحلة الفرعية مع السائل والصمام الثاني وإنزيمات المعدة. بعد ذلك ، سجل الامتصاص في المنطقة البينية المحددة لمدة ساعة واحدة وسجل إعادة الترطيب كما هو موضح سابقا. لتسجيل الهضم المعوي بعد تسجيل الامتصاص في المنطقة البينية المحددة ، املأ المحقنة اليسرى بسائل من الصمام الثالث واتبع نفس الخطوات الموضحة سابقا لتسجيل عملية الهضم في المعدة.وبالمثل ، لتسجيل الامتزاز ، بعد تسجيل الامتصاص في المنطقة البينية المحددة ، املأ المحقنة اليسرى بسائل من الصمام الخامس وكرر بقية الخطوات المستخدمة لتسجيل هضم المعدة. املأ أنابيب الطرد المركزي الدقيقة بوسائط الهضم الاصطناعية ، وقم بتوصيل كل منها بالصمام المعني بواسطة الأنبوب المقابل. املأ الأنبوب في الصمامات من اثنين إلى ثمانية عن طريق التنظيف من الصمام الثاني والصمام الثالث والصمام الرابع والصمام الخامس إلى المخرج الخارجي وهو الصمام الثامن.املأ الأنبوب في الصمام الأول عن طريق التنظيف من الصمام الأول إلى الصمام السادس الشعري خمس مرات. ضع الشعيرات الدموية في مرحلة الزيت ، وقم بتحميل المحقنة اليسرى بالصمام الأول. ابدأ في المعالجة المتسلسلة للتحكم الأولي في الهضم المعدي ، والهضم المعوي ، والامتزاز ، مع حفظ البيانات في نهاية كل عملية.تظهر النتائج التجريبية التي تم الحصول عليها لهضم المعدة من المستحلبات في هذه الأشكال. يتم تقديم تحلل البروتين في المعدة من ألبومين المصل البشري هنا. يتم تطبيق الوسائط الهضمية عن طريق تبادل المراحل الفرعية مع المحاليل عند 37 درجة مئوية.هنا يمثل اللون الأزرق المخزن المؤقت الأولي مع البروتين ويمثل اللون الأحمر SGF المبسط مع البيبسين. أثناء تبادل المرحلة الفرعية مع SGF المبسط والبيبسين ، يزداد التوتر السطحي بسبب التحلل المائي للبروتين ، مما يخفف طبقة البروتين الأولية. تمثل الصورة الرسومية تحلل الدهون في المعدة من البكتين الحمضيات.هنا ، يمثل اللون الأزرق المخزن المؤقت الأولي مع البكتين الحمضي ، والأصفر يمثل SGF المبسط مع الليباز المعدي ، والرمادي يمثل SGF المبسط. يقلل تبادل المراحل الفرعية مع ليباز المعدة من التوتر السطحي بينما يوفر تبادل المراحل الفرعية مع SGF المبسط استجابة فارغة للتوتر السطحي. يوضح هنا مثال على ملامح الهضم المعوي.يتم هنا عرض الامتصاص والامتزاز وملامح الأملاح الحيوية والليباز والليباز بالإضافة إلى الأملاح الصفراوية في SIF المبسط عند 37 درجة مئوية. تظهر الصورة الرسومية تطور التوتر السطحي عند تحلل الدهون لنوعين مختلفين من Plueronic F127 و F68. يمكن ملاحظة انخفاض حاد في التوتر البيني بسبب امتصاص الليباز والأملاح الصفراوية ، وإنتاج الأحماض الدهنية الحرة على الأفلام البينية المشكلة مسبقا من F68 و F127 في واجهة ماء الزيت.تظهر خطوة الامتزاز تبادل الطور الفرعي مع SIF المبسط من الأملاح الصفراوية ، F68 ، و F127. ملف الهضم في المختبر لفيلم AS48 الممتص في واجهة الماء الهوائية في أفلام الألبومين الممتصة في مصل الدم البشري والبقري في واجهة ماء زيت الزيتون. تظهر الصور التمثيلية التوتر البيني ، ومرونة التمدد ، ولزوجة التمدد للهضم في المختبر لفيلم بيتا لاكتوغلوبولين الممتص في واجهة ماء زيت الزيتون.تم قياس معلمات التمدد عند 1 هرتز و 0.1 هرتز و 0.01 هرتز بعد موازنة الواجهة المهضومة في كل خطوة. من المهم مطابقة الكرات عند برمجة العملية مع أنابيب الطرد المركزي المقابلة ، أو الشعيرات الدموية ، أو المحور ، وتطور توزيع موقع الإسقاط ، ثم ، تحدد الحركة الكهربية إمكانات القطرات ، والأحماض الدهنية الخالية من الأحماض الأمينية المنتجة في تحلل الدهون تقدم معلومات تكميلية تتوافق مع نتائج التوتر البيني. توفر هذه التقنية طبقات بينية ذات ملفات هضم مختلفة لتوصيل العناصر الغذائية والأدوية في مواقع مختلفة داخل الجهاز الهضمي ، وكذلك لتطوير أنظمة تغليف جديدة.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

In vitro Digestion of Emulsions in a Single Droplet via Multi Subphase Exchange of Simulated Gastrointestinal Fluids

Detection of the pH-dependent Activity of Escherichia coli Chaperone HdeB In Vitro and In Vivo

Detection of the pH-dependent Activity of Escherichia coli Chaperone HdeB In Vitro and In Vivo

الكشف عن تعتمد على درجة الحموضة آخر من<em&gt; كولاي</em&gt; الوصيفة HdeB<em&gt; في المختبر</em&gt; و<em&gt; في فيفو</em

Bacteria are frequently exposed to environmental changes, such as alterations in pH, temperature, redox status, light exposure or mechanical force. Many ...

Thermostabilization, Expression, Purification, and Crystallization of the Human Serotonin Transporter Bound to S-citalopram

Thermostabilization, Expression, Purification, and Crystallization of the Human Serotonin Transporter Bound to S-citalopram

Thermostabilization والتعبير وتنقية، وتبلور من السيروتونين الناقل الإنسان ملزمة ل<em&gt; S</em&gt; -citalopram

The serotonin transporter is a sodium and chloride-coupled transporter that &#34;pumps&#34; extracellular serotonin into cells. S-citalopram is a drug ...

Time-resolved ElectroSpray Ionization Hydrogen-deuterium Exchange Mass Spectrometry for Studying Protein Structure and Dynamics

وقت حل التأين electrospray الهيدروجين، الديوتيريوم تبادل الطيف الكتلي لدراسة بنية البروتين وديناميكية

Intrinsically disordered proteins (IDPs) have long been a challenge to structural biologists due to their lack of stable secondary structure elements. ...

Preparation of Keratin Hydrolysate from Chicken Feathers and Its Application in Cosmetics

إعداد هيدروليساتي الكيراتين من ريش الدجاج وتطبيقه في مستحضرات التجميل

Keratin hydrolysates (KHs) are established standard components in hair cosmetics. Understanding the moisturizing effects of KH is advantageous for ...

Isolation and Respiratory Measurements of Mitochondria from Arabidopsis thaliana

Isolation and Respiratory Measurements of Mitochondria from Arabidopsis thaliana

والعزلة وقياسات الجهاز التنفسي من الميتوكوندريا من التمويل نبات

Mitochondria are essential organelles involved in numerous metabolic pathways in plants, most notably the production of adenosine triphosphate (ATP) from ...

A Colorimetric Method for Measuring Iron Content in Plants

أسلوب قياس ألوان لقياس محتوى الحديد في النباتات

Iron, one of the most important micronutrients in living organisms, is involved in basic processes, such as respiration and photosynthesis. Iron content ...

Quantification of Hypopigmentation Activity In Vitro

التحديد الكمي لنشاط نقص التصبغ في المختبر

This study presents laboratory methods for the quantification of hypopigmentation activity in vitro. Melanin, the major pigment in melanocytes, is ...

Fluorescent Visualization of Mango-tagged RNA in Polyacrylamide Gels via a Poststaining Method

التصور الفلورسنت من الحمض النووي الريبي المانجو الموسومة في المواد الهلامية البولي أكريلاميد عن طريق طريقة بوستينينغ

Native and denaturing polyacrylamide gels are routinely used to characterize ribonucleoprotein (RNP) complex mobility and to measure RNA size, ...

Ion Exchange Chromatography (IEX) Coupled to Multi-angle Light Scattering (MALS) for Protein Separation and Characterization

Ion Exchange Chromatography IEX Coupled to Multi-angle Light Scattering MALS for Protein Separation and Characterization

التبادل الأيوني اللوني (المستوى) بالإضافة إلى تشتت الضوء زاوية المتعددة (مالس) لفصل البروتين وتوصيف

Ion-exchange chromatography with multi-angle light scattering (IEX-MALS) is a powerful method for protein separation and characterization. The combination ...

An In Vitro Single-Molecule Imaging Assay for the Analysis of Cap-Dependent Translation Kinetics

An In Vitro Single-Molecule Imaging Assay for the Analysis of Cap-Dependent Translation Kinetics

اختبار تصوير أحادي الجزيء في المختبر لتحليل حركية الترجمة المعتمدة على الغطاء

Cap-dependent protein synthesis is the predominant translation pathway in eukaryotic cells. While various biochemical and genetic approaches have allowed ...