Name: in vitro digestion of emulsions in a single droplet via multi subphase exchange of simulated gastrointestinal fluids
Uploaded: 2022-11-18T13:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vitro Digestion of Emulsions in a Single Droplet via Multi Subphase Exchange of Simulated Gastrointestinal Fluids at JoVE.com

Bu araştırma, MCIN/AEI/10.13039/501100011033 tarafından finanse edilen RTI2018-101309-B-C21 ve PID2020-631-116615RAI00 projeleri ve "ERDF Avrupa'yı Yapmanın Bir Yolu" tarafından finanse edilmiştir. Bu çalışma (kısmen) Granada Üniversitesi (İspanya) Biyokolloid ve Akışkanlar Fiziği Grubu (ref. PAI-FQM115) tarafından desteklenmiştir.

1. Yüzey bilimi deneylerinde kullanılan tüm cam eşyalar için temizleme sırası
<ol><li>Cam eşyaları suda seyreltilmiş konsantre bir temizleme çözeltisiyle (bakınız Malzeme Tablosu) (%10) fırçalayın.</li>
	<li>Bir dizi musluk suyu, propanol, damıtılmış su ve ultra saf su ile iyice durulayın. Bir kabinde kurutun ve kullanana kadar kapalı bir dolapta saklayın.</li>
</ol>2. Numune hazırlama
<ol><li>INFOGEST standartlaştır...

<ol>
	<li>McClements, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biophysics+of+digestion:+Lipids.">The biophysics of digestion: Lipids.</a> Current Opinion in Food Science. 21, 1-6 (2018).</li><li>McClements, D. J., Li, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structured+emulsion-based+delivery+systems:+Controlling+the+digestion+and+release+of+lipophilic+food+components.">Structured emulsion-based delivery systems: Controlling the digestion and release of lipophilic food components.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 159 (2), 213-228 (2010).</li><li>Corstens, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food-grade+micro-encapsulation+systems+that+may+induce+satiety+via+delayed+lipolysis:+A+review.">Food-grade micro-encapsulation systems that may induce satiety via delayed lipolysis: A review.</a> Critical Reviews in Food Science and Nutrition. 57 (10), 2218-2244 (2017).</li><li>Aguilera-Garrido, A., del Castillo-Santaella, T., Galisteo-Gonz&#225;lez, F., G&#225;lvez-Ruiz, M. J., Maldonado-Valderrama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigating+the+role+of+hyaluronic+acid+in+improving+curcumin+bioaccessibility+from+nanoemulsions.">Investigating the role of hyaluronic acid in improving curcumin bioaccessibility from nanoemulsions.</a> Food Chemistry. 351, 129301 (2021).</li><li>Rodr&#237;guez Patino, J. M., Carrera S&#225;nchez, C., Rodr&#237;guez Ni&#241;o, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implications+of+interfacial+characteristics+of+food+foaming+agents+in+foam+formulations.">Implications of interfacial characteristics of food foaming agents in foam formulations.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 140 (2), 95-113 (2008).</li><li>Wilde, P. J., Chu, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interfacial+&amp;+colloidal+aspects+of+lipid+digestion.">Interfacial &amp; colloidal aspects of lipid digestion.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 165 (1), 14-22 (2011).</li><li>Cabrerizo-V&#237;lchez, M. A., Wege, H. A., Holgado-Terriza, J. A., Neumann, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axisymmetric+drop+shape+analysis+as+penetration+Langmuir+balance.">Axisymmetric drop shape analysis as penetration Langmuir balance.</a> Review of Scientific Instruments. 70 (5), 2438-2444 (1999).</li><li>Maldonado-Valderrama, J., Muros-Cobos, J. L., Holgado-Terriza, J. A., Cabrerizo-V&#237;lchez, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bile+salts+at+the+air-water+interface:+Adsorption+and+desorption.">Bile salts at the air-water interface: Adsorption and desorption.</a> Colloids and surfaces B: Biointerfaces. 120, 176-183 (2014).</li><li>Maldonado-Valderrama, J., Terriza, J. A. H., Torcello-G&#243;mez, A., Cabrerizo-V&#237;lchez, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+digestion+of+interfacial+protein+structures.">In vitro digestion of interfacial protein structures.</a> Soft Matter. 9, 1043-1053 (2013).</li><li>Maldonado-Valderrama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Probing+in+vitro+digestion+at+oil-water+interfaces.">Probing in vitro digestion at oil-water interfaces.</a> Current Opinion in Colloid and Interface Science. 39, 51-60 (2019).</li><li>Brodkorb, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=INFOGEST+static+in+vitro+simulation+of+gastrointestinal+food+digestion.">INFOGEST static in vitro simulation of gastrointestinal food digestion.</a> Nature Protocols. 14 (4), 991-1014 (2019).</li><li>del Castillo-Santaella, T., Maldonado-Valderrama, J., Molina-Bolivar, J. A., Galisteo-Gonzalez, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+cross-linker+glutaraldehyde+on+gastric+digestion+of+emulsified+albumin.">Effect of cross-linker glutaraldehyde on gastric digestion of emulsified albumin.</a> Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 145, 899-905 (2016).</li><li>Macierzanka, A., Torcello-G&#243;mez, A., Jungnickel, C., Maldonado-Valderrama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bile+salts+in+digestion+and+transport+of+lipids.">Bile salts in digestion and transport of lipids.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 274, 102045 (2019).</li><li>Maldonado-Valderrama, J., Torcello-G&#243;mez, A., del Castillo-Santaella, T., Holgado-Terriza, J. A., Cabrerizo-V&#237;lchez, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subphase+exchange+experiments+with+the+pendant+drop+technique.">Subphase exchange experiments with the pendant drop technique.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 222, 488-501 (2015).</li><li>Bellesi, F. A., Ruiz-Henestrosa, V. M. P., Maldonado-Valderrama, J., Del Castillo Santaella, T., Pilosof, A. M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+interfacial+in+vitro+digestion+of+protein+and+polysaccharide+oil/water+films.">Comparative interfacial in vitro digestion of protein and polysaccharide oil/water films.</a> Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 161, 547-554 (2018).</li><li>Del Castillo-Santaella, T., Sanmart&#237;n, E., Cabrerizo-V&#237;lchez, M. A., Arboleya, J. C., Maldonado-Valderrama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+digestibility+of+&#946;-lactoglobulin+by+pulsed+light+processing:+A+dilatational+and+shear+study.">Improved digestibility of &#946;-lactoglobulin by pulsed light processing: A dilatational and shear study.</a> Soft Matter. 10 (48), 9702-9714 (2014).</li><li>Infantes-Garcia, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+gastric+lipid+digestion+of+emulsions+with+mixed+emulsifiers:+Correlation+between+lipolysis+kinetics+and+interfacial+characteristics.">In vitro gastric lipid digestion of emulsions with mixed emulsifiers: Correlation between lipolysis kinetics and interfacial characteristics.</a> Food Hydrocolloids. 128, 107576 (2022).</li><li>del Castillo-Santaella, T., Cebri&#225;n, R., Maqueda, M., G&#225;lvez-Ruiz, M. J., Maldonado-Valderrama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+in+vitro+digestibility+of+food+biopreservative+AS-48.">Assessing in vitro digestibility of food biopreservative AS-48.</a> Food Chemistry. 246, 249-257 (2018).</li><li>Torcello-G&#243;mez, A., Maldonado-Valderrama, J., J&#243;dar-Reyes, A. B., Cabrerizo-V&#237;lchez, M. A., Mart&#237;n-Rodr&#237;guez, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pluronic-covered+oil-water+interfaces+under+simulated+duodenal+conditions.">Pluronic-covered oil-water interfaces under simulated duodenal conditions.</a> Food Hydrocolloids. 34, 54-61 (2014).</li><li>Minekus, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standardised+static+in+vitro+digestion+method+suitable+for+food+-+an+international+consensus.">A standardised static in vitro digestion method suitable for food - an international consensus.</a> Food &amp; Function. 5 (6), 1113-1124 (2014).</li><li>Wege, H. A., Holgado-Terriza, J. A., Cabrerizo-V&#237;lchez, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+constant+surface+pressure+penetration+langmuir+balance+based+on+axisymmetric+drop+shape+analysis.">Development of a constant surface pressure penetration langmuir balance based on axisymmetric drop shape analysis.</a> Journal of Colloid and Interface Science. 249 (2), 263-273 (2002).</li><li>del Castillo-Santaella, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyaluronic+acid+and+human/bovine+serum+albumin+shelled+nanocapsules:+Interaction+with+mucins+and+in+vitro+digestibility+of+interfacial+films.">Hyaluronic acid and human/bovine serum albumin shelled nanocapsules: Interaction with mucins and in vitro digestibility of interfacial films.</a> Food Chemistry. 383, 132330 (2022).</li><li>Aguilera-Garrido, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+serum+albumins+in+delivery+systems:+Differences+in+interfacial+behaviour+and+interacting+abilities+with+polysaccharides.">Applications of serum albumins in delivery systems: Differences in interfacial behaviour and interacting abilities with polysaccharides.</a> Advances in Colloid and Interface Science. 290 (5), 102365 (2021).</li></ol>

Bu makalede, kolye damlası ekipmanı kullanarak ara yüz katmanlarının in vitro sindirimini ölçmek için genelleştirilmiş bir protokol açıklanmaktadır. Protokol, literatürle karşılaştırmayı kolaylaştırmak için INFOGEST11,20 uyumlaştırılmış protokolüne dayanan sindirim tamponlarının bileşimini ayarlayarak deneyin özel gereksinimlerine göre ayarlanabilir. Sindirim enzimleri ve biyosürfaktan maddeler ayrı ayrı, sırayla veya...

Emülsiyon sindirimini içeren yağın nasıl sindirildiğini anlamak, özelleştirilmiş işlevselliğe sahip ürünleri rasyonel olarak tasarlamak için önemlidir1. Yağ sindirimi için substrat bir emülsiyondur, çünkü yağ mekanik etki ile tüketim üzerine emülsifiye edilir ve ağız ve midede biyosürfaktanlarla karıştırılır. Ayrıca, insanlar tarafından tüketilen yağın çoğu zaten emülsifiye edilmiştir (süt ürünleri gibi) ve bebekler veya bazı yaşlı insanlar söz konusu olduğunda, bu tek tüketim şeklidir. Bu nedenle, spesifik sindirim profillerine sahip emülsiyon bazlı ürünlerin tasarımı beslenmede çok önemlidir1. Ayrıca, emülsiyonlar, obezite3, besin takviyesi, gıda alerjileri ve sindirim hastalıkları gibi farklı gastrointestinal durumlarla başa çıkmak için besinleri, ilaçları veya lipofilik biyoaktifleri2'yi kapsülleyebilir ve verebilir. Sudaki yağ emülsiyonlarında, lipit damlacıkları proteinler, yüzey aktif maddeler, polimerler, parçacıklar ve karışımlar gibi emülgatörlerin ara yüzey katmanları ile çevrilidir4. Emülgatörlerin rolü iki yönlüdür: emülsiyon5'i stabilize edin ve kapsüllenmiş bileşiği belirli bir bölgeye koruyun / taşıyın. Emülsiyonların özel bir sindirilebilirliğinin elde edilmesi, başlangıçtaki bileşimlerine bağlıdır, ancak aynı zamanda gastrointestinal sistemden geçiş sırasında bu arayüzün sürekli evriminin izlenmesini gerektirir (Şekil 1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64158/64158fig01.jpg"> Şekil 1: Bazı ana gastrointestinal durumlarla başa çıkmak için emülsiyonların ara yüzey mühendisliğinin uygulanması. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64158/64158fig01large.jpg" target="_blank">Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Lipid sindirimi nihayetinde bir ara yüz işlemidir, çünkü lipazların (gastrik veya pankreas) emülsifiye lipit damlacıklarının yağ-su arayüzüne ara yüzey tabakasından adsorpsiyonunu gerektirir, böylece yağda bulunan trigliseritlere serbest yağ asitleri ve monoasilgüritler halinde hidrolize edilir6. Bu, Şekil 2'de şematize edilmiştir. Gastrik lipaz, yağ-su arayüzü için midedeki pepsin ve fosfolipitlerle rekabet eder (Şekil 2, gastrik sindirim). Daha sonra, pankreas lipaz / kolipaz, ince bağırsakta tripsin / kimotripsin, fosfolipitler, safra tuzları ve sindirim ürünleri ile rekabet eder. Proteases, lipaz adsorpsiyonunu önleyerek veya destekleyen ara yüz kaplamasını değiştirebilirken, safra tuzları oldukça yüzey aktiftir ve lipaz adsorpsiyonunu teşvik etmek için kalan emülgatörün çoğunun yerini alır (Şekil 2, bağırsak sindirimi). Sonunda, lipolizin hızı ve derecesi, kalınlık, moleküller arası / intramoleküler bağlantılar ve elektrostatik ve sterik etkileşimler gibi ilk / gastrik sindirilmiş emülsiyonun ara yüz özelliklerine bağlıdır. Buna göre, ara yüz tabakasının sindirilirken evrimini izlemek, lipaz adsorpsiyonunu ve dolayısıyla lipit sindirimini etkileyen ara yüz mekanizmalarını ve olaylarını tanımlamak için deneysel bir platform sunar.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64158/64158fig02.jpg"> Şekil 2: Gastrointestinal lipid sindiriminde arayüzlerin rolünü gösteren şematik diyagram. Pepsin hidrolizi, gastrik fazda ara yüz kompozisyonunu değiştirirken, gastrik lipaz trigliseritleri hidrolize eder. İnce bağırsakta, tripsin / kimotripsin ara yüz filmini daha da hidrolize ederken, lipoliz BS / lipazların adsorpsiyonu, trigliseritlerin hidrolizi ve lipolitik ürünlerin BS miseller / kompleksinde çözünürizasyon yoluyla desorpsiyonu ile ilerler. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64158/64158fig02large.jpg" target="_blank">Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Granada Üniversitesi'ndeki (UGR) kolye düşürme ekipmanı, toplu çözelti7'nin alt faz değişimini sağlayan patentli bir teknoloji olan koaksiyel çift kılcal damar ile uygulanmaktadır. Kolye damlasını tutan kılcal damar, bir çift mikroenjektörün her bir kanalına bağımsız olarak bağlanan iki koaksiyel kılcal damarın düzenlenmesinden oluşur. Her mikroenjektör bağımsız olarak çalışabilir ve düşürülen içeriğin akış yoluyla değiştirilmesine izin verir7. Buna göre, alt faz değişimi, yeni çözeltinin iç kılcal damar ile eşzamanlı enjeksiyonundan ve aynı akış hızını kullanarak dökme çözeltinin dış kılcal damarla ekstraksiyonundan oluşur. Bu işlem, ara yüzey alanını veya damlacığın hacmini bozmadan dökme çözeltinin değiştirilmesine izin verir. Bu prosedür daha sonra damlacık yığın çözeltisi8'in sekiz adede kadar sıralı alt faz değişimine izin veren çok alt fazlı bir değiş tokuşa yükseltildi. Bu, sindirim sürecinin, lipidik ortamda asılı kalan tek bir sulu damlacıkta, toplu çözeltiyi farklı bölmeleri (ağız, mide, ince bağırsak) taklit eden yapay ortamlarla sırayla değiştirerek simülasyonunu sağlar. Tüm kurulum, bileşenlerin ayrıntıları da dahil olmak üzere Şekil 3'te temsil edilmektedir. Mikroenjektördeki şırıngalar, her biri Şekil 2'de açıklanan bileşenlerle yapay sindirim sıvısını içeren bir mikrosantrifüj tüpüne bağlanan sekiz vias valfine bağlanır.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64158/64158fig03.jpg"> Şekil 3: OCTOPUS'un tüm bileşenlerle genel görünümü. CCD kamera, mikroskop, mikro konumlandırıcı, termostabilize hücre ve çift kılcal damar, sekiz vias valfine bağlı iki şırınga ile bir çift mikroenjektöre bağımsız olarak bağlanmıştır. Her şırınga kılcal damar, numune ve bir deşarj ile dört mikrosantrifüj tüpü ile bağlanır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64158/64158fig03large.jpg" target="_blank">Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Şekil 4A , yapay sindirim sıvılarının her birinin, çift kılcal damar yoluyla subfaz değişimi ile kolye damlasına nasıl enjekte edildiğini göstermektedir. Şekil 2'de detaylandırılan her sindirim bileşiği, gastrointestinal sistemden geçişi simüle ederek eşzamanlı / sıralı olarak uygulanabilir. Yapay sindirim sıvıları, Şekil 4B'de şematize edildiği gibi, ilk emülgatörün ara yüz gerginliğini değiştiren farklı enzimler ve biyosürfaktanlar içerir. Yine UGR'de geliştirilen DINATEN yazılımı (bakınız Malzeme Tablosu), ilk ara yüz tabakası in vitro olarak sindirilirken ara yüz geriliminin evrimini gerçek zamanlı olarak kaydeder. Ayrıca, her sindirim aşamasından sonra, ara yüz tabakasının dilatasyonel elastikiyeti, stabilize edilmiş ara yüz tabakasına hacim / ara yüzey alanının periyodik salınımları uygulanarak ve ara yüz gerginliğinin tepkisi kaydedilerek hesaplanır. Salınımın periyodu/frekansı ve genliği değişebilir ve CONTACTO yazılımı ile görüntü işleme dilatasyonel reolojik parametrelerisağlar 8.
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64158/64158fig04.jpg"> Şekil 4: Sindirim profillerine örnekler . (A) İlk emülgatör tabakası, farklı çözeltilerin kolye damlasına sıralı alt faz değişimi ile mikrosantrifüje yerleştirilen yapay sindirim ortamına maruz bırakılır. (B) İlk emülgatörün ara yüzey geriliminin (y ekseni), yapay ortamdaki çeşitli enzimler / biyosürfaktanlar tarafından in vitro olarak sindirildiği için zamanın bir fonksiyonu (x ekseni) olarak genel evrimi. Düz bağırsak sıvısı ile son bir subfaz değişimi, karışık misellerde çözünür yoluyla sindirilmiş lipitin desorpsiyonunu ölçer. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64158/64158fig04large.jpg" target="_blank">Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Bu çalışma, kolye damlası ekipmanı9 ile ara yüz katmanlarının in vitro sindirimini ölçmek için tasarlanmış genel protokolü sunmaktadır. İlk ara yüz tabakası, Şekil 2'de gösterildiği gibi, gastrointestinal sistemden geçişi taklit eden koşullara sırayla maruz kalmaktadır. Bu farklı sindirim ortamları, mikrosantrifüj tüplerinde bulunan farklı çözeltilerin subfaz değişimi ile kolye damlasına enjekte edilir (Şekil 4A). Bu ortamların bileşimi, değerlendirilecek gastrointestinal koşullara, yani gastrik / intestinal proteoliz / lipolize bağlı olarak özelleştirilebilir ve kümülatif etkilerin ve sinerjilerin ölçülmesine izin verir10. Her bölmedeki sindirim sürecini taklit etmek için kullanılan deneysel koşullar, INFOGEST tarafından yayınlanan ve pH'ı ve elektrolit ve enzim miktarlarını detaylandıran uluslararası konsensüs protokolünü takip eder11. Kolye damlasına dayanan deneysel cihaz, simüle edilmiş sindirim süreci boyunca ara yüz gerginliğinin yerinde kaydedilmesini sağlar. Ara yüz tabakasının dilatasyonel reolojisi, her sindirim adımının sonunda hesaplanır. Bu şekilde, her emülgatör, Şekil 4B'de gösterildiği gibi, sindirilmiş arayüzlerin özelliklerini gösteren bir sindirim profili sunar. Bu, sindirim sürecinin farklı aşamalarına duyarlılığı veya direnci ile ilgili sonuçların çıkarılmasına izin verir. Genel olarak, yapay sindirim ortamı, kendi sindirim sıvılarında (mide veya bağırsak) çözünen asit / bazik pH, elektrolitler, proteazlar (mide ve bağırsak), lipazlar (mide ve bağırsak), safra tuzları ve fosfolipitler içerir. Şekil 4B, bir emülgatörün ara yüz gerginliğinin evriminin genel bir profilini gösterir, ilk önce proteaz etkisine maruz kalır, ardından lipazlar gelir. Genel olarak, ara yüz tabakasının proteolizi, hidrolize peptitlerin desorpsiyonu nedeniyle ara yüz gerginliğinde bir artışı teşvik eder9,12, lipoliz ise safra tuzlarının ve lipazların adsorpsiyonu nedeniyle ara yüz gerginliğinde çok dik bir azalmaya neden olur 13. Bağırsak sıvısı ile son bir subfaz değişimi, adsorbe edilmemiş / sindirilmiş materyalin toplu çözeltisini tüketir ve çözünür bileşiklerin desorpsiyonunu ve sindirilmiş lipitlerin karışık misellerde çözünmesini teşvik eder. Bu, kaydedilen artmış ara yüz gerilimi ile ölçülür (Şekil 4B).
Özetle, in vitro sindirimi tek bir damlacıkta simüle etmek için kolye damlasında uygulanan deneysel tasarım, sindirim işlemi ilk ara yüzey katmanı10'a sırayla uygulandığı için kümülatif etkilerin ve sinerjilerin ölçülmesine izin verir. Her sindirim ortamının bileşimi, gastrointestinal patolojiler veya bebek sindirim ortamı14 dahil olmak üzere sindirim koşullarının özelliklerini hesaba katmak için kolayca ayarlanabilir. Daha sonra, proteoliz ve lipolizi etkileyen ara yüz mekanizmalarının tanımlanması, emülsiyonların ara yüz mühendisliği ile sindirimi modüle etmek için kullanılabilir. Elde edilen sonuçlar, düşük alerjenite, kontrollü enerji alımı ve azalmış sindirilebilirlik15,16,17,18,19 gibi özel işlevlere sahip yeni gıda matrislerinin tasarımında uygulanabilir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Alpha-chymotrypsin from bovine pancreas</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C4129</td>
			<td>Enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beta-lactoglobulin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L0130</td>
			<td>Emulsfier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9048-46-8</td>
			<td>Emulsfier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>10043-52-4</td>
			<td>Electrolyte</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Kronton instruments</td>
			<td>Centrikon T-124</td>
			<td>For separating oil and resins</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citrus pectin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P9135</td>
			<td>Emulsfier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>co-lipase FROM PORCINE PANCREAS</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C3028</td>
			<td>Enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CONTACTO</td>
			<td>University of Granada (UGR)</td>
			<td></td>
			<td>https://core.ugr.es/dinaten/, last access: 07/18/2022</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DINATEN</td>
			<td>University of Granada (UGR)</td>
			<td></td>
			<td>https://core.ugr.es/dinaten/, last access: 07/18/2022</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gastric lipase</td>
			<td>Lipolytech</td>
			<td>RGE15-1G</td>
			<td>Enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Serum Albumin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>70024-90-7</td>
			<td>Emulsifier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>INFOGEST</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>http://www.proteomics.ch/IVD/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipase from porcine pancreas, type II</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L33126</td>
			<td>Enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium metasilicate resins</td>
			<td>Fluka</td>
			<td>1343-88-0</td>
			<td>Resins to purify oil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro 90</td>
			<td>International products</td>
			<td>M-9051-04</td>
			<td>Cleaner</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>7647-14-5</td>
			<td>Electrolyte</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaH2PO4</td>
			<td>Scharlau</td>
			<td>10049-21-5</td>
			<td>To prepare buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OCTOPUS</td>
			<td>Producciones Cient&#237;ficas y T&#233;cnicas S.L. (G&#243;jar, Spain)</td>
			<td></td>
			<td>Pendandt Drop Equipment implemented with multi subphase exchange</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olive oil</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>1514</td>
			<td>oil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pancreatic from porcine pancreas</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P7545-25 g</td>
			<td>Enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pepsin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P6887</td>
			<td>Enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pluronic F127</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P2443</td>
			<td>Emulsifier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pluronic F68</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P1300</td>
			<td>Emulsfier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium deoxycholate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td></td>
			<td>Bile salts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium glycodeoxycholate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C9910</td>
			<td>Bile salts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium taurocholate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>86339</td>
			<td>Bile salts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Filter</td>
			<td>Millex-DP</td>
			<td>SLGP033R</td>
			<td>&#160;Syringe Filter 0.22 &#181;m pore size polyethersulfone</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T1426</td>
			<td>Enzyme</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro digestion of emulsions in a single droplet via multi subphase exchange of simulated gastrointestinal fluids

Emülsiyonlar şu anda obezite, besin takviyesi, gıda alerjileri ve sindirim hastalıkları gibi farklı gastrointestinal durumlarla başa çıkmak için besinleri ve ilaçları kapsüllemek ve vermek için kullanılmaktadır. Bir emülsiyonun istenen işlevselliği sağlaması, yani gastrointestinal sistem içinde belirli bir bölgeye ulaşması, lipolizi inhibe etmesi / geciktirmesi veya sindirilebilirliği kolaylaştırması, sonuçta gastrointestinal sistemdeki enzimatik bozunmaya duyarlılığına bağlıdır. Sudaki yağ emülsiyonlarında, lipit damlacıkları, emülgatörlerin emülsiyonu stabilize ettiği ve kapsüllenmiş bileşiği koruduğu ara yüz katmanları ile çevrilidir. Emülsiyonların özel bir sindirilebilirliğinin elde edilmesi, başlangıçtaki bileşimlerine bağlıdır, ancak aynı zamanda gastrointestinal sindirimin farklı aşamalarına maruz kaldıklarından bu ara yüzey katmanlarının evriminin izlenmesini gerektirir. Çok alt fazlı bir değişim ile uygulanan bir kolye damlası yüzey film dengesi, özelleştirilmiş bir statik çürütme modeli uygulayarak emülsiyonların yağa batırılmış tek bir sulu damlacıkta in vitro sindiriminin simüle edilmesini sağlar. Gastrointestinal sistemden geçiş, orijinal damlacık yığın çözeltisinin yapay medya ile subfaz değişimi ile taklit edilir ve gastrointestinal sistemin her bölmesinin / adımının fizyolojik koşullarını taklit eder. Ara yüz gerginliğinin dinamik evrimi, tüm simüle edilmiş gastrointestinal sindirim boyunca in situ olarak kaydedilir. Sindirilmiş arayüzlerin interfasiyal dilatasyonel elastikiyet ve viskozite gibi mekanik özellikleri, her sindirim aşamasından sonra (oral, gastrik, ince bağırsak) ölçülür. Her sindirim ortamının bileşimi, gastrointestinal patolojiler ve bebek sindirim ortamı dahil olmak üzere sindirim koşullarının özelliklerini hesaba katacak şekilde ayarlanabilir. Proteoliz ve lipolizi etkileyen spesifik ara yüz mekanizmaları tanımlanır ve emülsiyonların ara yüz mühendisliği ile sindirimi modüle etmek için araçlar sağlar. Elde edilen sonuçlar, düşük alerjenite, kontrollü enerji alımı ve azaltılmış sindirilebilirlik gibi özel işlevlere sahip yeni gıda matrisleri tasarlamak için manipüle edilebilir.

Bu bölümde, AHTAPOT ile ölçülen sindirim profillerinin farklı örnekleri gösterilmektedir. Simüle edilmiş sindirim profili eşleşmelerinin genel görünümü Şekil 4B'de gösterilmiştir. Ara yüz gerginliği genellikle sindirim profilinde zamana karşı temsil edilir. Dikkate alınan farklı aşamalar / sindirim adımları farklı renklerle temsil edilir. İlk faz başlangıç tabakasını oluşturur ve her bir duruma bağlı olarak emülgatörün veya protein / yüzey aktif madd...

Watch this Scientific Journal Video about In vitro Digestion of Emulsions in a Single Droplet via Multi Subphase Exchange of Simulated Gastrointestinal Fluids at JoVE.com

In vitro Digestion of Emulsions in a Single Droplet via Multi Subphase Exchange of Simulated Gastrointestinal Fluids

OCTOPUS olarak adlandırılan çok fazlı bir değişim ile uygulanan bir kolye damlası yüzey film dengesi, orijinal toplu çözeltinin simüle edilmiş gastrointestinal sıvılarla sıralı alt faz değişimi ile sindirim koşullarının taklit edilmesine izin verir. Simüle edilen in vitro sindirim, sindirilen ara yüz tabakasının ara yüz gerginliği in situ olarak kaydedilerek izlenir.

İn vitro Simüle Edilmiş Gastrointestinal Sıvıların Çok Alt Fazlı Değişimi Yoluyla Emülsiyonların Tek Bir Damlacıkta Sindirimi

Emulsions are currently being used to encapsulate and deliver nutrients and drugs to tackle different gastrointestinal conditions such as obesity, ...

Yöntemimiz, emülgatör tarafından kaplanan ve yağ fazına batırılmış tek bir su damlacığında sindirim sürecini simüle ederek duyguların nasıl sindirildiğini araştırmak için model sağlar. Farklı emülgatörlerin etkisini ve farklı sindirim bileşenlerinin etkisini değerlendirebilir ve gastrointestinal sistem içindeki farklı yerlerde sindirime direnebilecek veya sindirimi geciktirebilecek arayüzler tasarlayabiliriz. Tüm simüle edilmiş sindirim süreci boyunca C2'deki ara yüz gerginliğini ve sindirim adımının sonunda ara yüz tabakasının elastikiyetini ve viskozitesini ölçebiliriz.Konsantrasyonlar ve sindirim koşulları, deneyin gereksinimlerine göre ayarlanabilir ve bu, sırayla uygulanabilir veya aynı anda sinerjizm ve kümülatif etkilerin değerlendirilmesine izin verilir. Ve tek bir damlacıkla çalışıyoruz, bu yüzden çok düşük miktarda numuneye ihtiyacımız var ve deneysel değişkenlerin yüksek hassasiyetli kontrolüne sahibiz. Bu tekniği, bunu devralacak bir strateji tasarlamak için uyguladık.Bu yaklaşımlardan biri, lipoliz işlemini emekliye ayıran veya alan fosil tabakasında tasarım yapmaktır. Diğer bir yaklaşım lipaz yenilikçilerinin kullanımıdır ve lipazın ara yüz etki mekanizmasını araştırdık. Bu cihaz başlangıçta in vitro sindirimi incelemek için geliştirilmiştir.Bununla birlikte, mono çalışma ve lipit ile etkileşim için kullanılabilir ve ayrıca kritik mikro konsantrasyonu otomatik olarak incelemek için uygulanabilir. Deneysel tekniğe erişilebilir. Bir el araştırmacısı bir hafta içinde kullanmak üzere eğitilmiştir.Ekipmanı iyice temizlemeniz ve yüzey aktif kirleticilerin varlığını önlemek için numuneleri ve yağı saflaştırmanız gerekir. Yazılım bilgisayarına aşina olmanız ve ışıkları ve yetenek konumunu kontrol etmeyi öğrenmeniz ve küçük kabarcıklardan kurtulmanız gerekir. Başlamak için, oda sıcaklığında suyun yüzey gerilimini kontrol etmek için resmi su damlacığı.Diferansiyel yoğunluğu sol diyalogda hava suyuna ayarlayın ve yüzey gerilimini gerçek zamanlı olarak ölçün. beş dakika boyunca. Temiz küvetini en az 0.002 litre temiz bitkisel yağ ile doldurun ve termostatik hücredeki küvet tutucuya yerleştirin.Diferansiyel yoğunluğu bitkisel yağ suyuna ayarlayın ve saniyede 0,5 mikrolitre hızında 40 mikrolitre enjekte edin. Enjeksiyonun sonuna kadar her saniye gerginliği gerçek zamanlı olarak ölçün. Bu basit bir dinamik işlemdir.Ardından, verileri kaydedin ve ara yüzey gerilimini damlacık hacminin ve bir veri sayfasının bir fonksiyonu olarak çizin. Damlacık hacmi aralığının, temiz su için damlacık hacminden bağımsız olarak ara yüzey gerilimi için bir değer sağladığından emin olun. Ara yüz alanını damlacık hacminin bir fonksiyonu olarak çizin.Bu eğri daha sonra ses seviyesini karşılık gelen ara yüz alanıyla eşleştirmek için kullanılacaktır. Sol şırınga ile, hacmi sabit ara yüz gerginliği aralığında enjekte edin ve ara yüz gerginliğini beş dakika boyunca kaydedin. Bu, sistemde yüzey aktif bileşenlerinin yokluğunu kontrol etmek içindir.İlk kontrolü gerçekleştirmek için, damla oluşumu için kılcal damara yaklaşık 10 mikrolitre emülgatör çözeltisi enjekte edin ve emilimi bir saat boyunca yaklaşık 20 milimetrekarelik sabit bir ara yüz alanına kaydedin. Hacim ve alanın tam değerleri, daha önce çizilen kalibrasyon eğrisinden elde edilebilir. Seyreltme reolojisini, salınım genliğini 10 saniyeye kadar olan periyotta 1.25 mikrolitreye ayarlayarak programlayın.Ardından, seçilen ara yüz bölgesindeki emilimi 10 saniye boyunca programlayın. Daha sonra, gastrik sindirim programını kaydetmek için, seçilen ara yüz bölgesindeki emilimi 10 saniye boyunca kaydedin. Sol şırıngayı ikinci valften sıvı ile doldurun.Sol şırınga ile saniyede beş mikrolitrede valften iki adet 125 mikrolitre enjekte edin ve aynı anda aynı hacmi sağ şırınga ile aynı oranda çıkarın. Bu, suyun metilen mavisi ile alt faz değişimi sürecinin bir görselleştirmesidir. Valf sekizden çıkmak için sağ şırıngayı boşaltın ve sol şırıngayı ikinci valften sıvı ile tekrar yükleyin.Sıvı ve valf iki ve gastrik enzimlerle tam alt faz değişimini sağlamak için bu iki adımı 10 kez tekrarlayın. Ardından, seçilen ara yüz alanındaki absorpsiyonu bir saat boyunca kaydedin ve daha önce gösterildiği gibi seyreltici reolojiyi kaydedin. Seçilen ara yüz bölgesinde emilimi kaydettikten sonra bağırsak sindirimini kaydetmek için, sol şırıngayı üçüncü kapaktan sıvı ile doldurun ve gastrik sindirimi kaydetmek için daha önce gösterilen adımları izleyin.Benzer şekilde, desorpsiyonu kaydetmek için, seçilen ara yüz bölgesinde emilimi kaydettikten sonra, sol şırıngayı beşinci kapaktan sıvı ile doldurun ve gastrik sindirimi kaydetmek için kullanılan adımların geri kalanını tekrarlayın. Mikro santrifüj tüplerini yapay sindirim ortamı ile doldurun ve her birini ilgili boru ile ilgili valfe bağlayın. Boruyu iki ila sekiz valf içinde doldurun ve valf iki, valf üç, valf dört ve valf beşten valf sekizinci olan dış çıkışa temizleyin.Valf birinden altı kılcal damara beş kez temizleyerek boruyu valf bir içine doldurun. Kılcal damarı yağ fazına yerleştirin ve sol şırıngayı valf ile yükleyin. İlk kontrol gastrik sindirimini, bağırsak sindirimini ve desorpsiyonunu sırayla işlemeye başlayın ve her işlemin sonunda verileri kaydedin.Emülgatörlerin gastrik sindirimi için elde edilen deneysel sonuçlar bu şekillerde gösterilmiştir. İnsan serum albümininin gastrik proteolizi burada sunulmuştur. Sindirim ortamı, 37 santigrat derecelik çözeltilerle alt faz değişimi ile uygulanır.Burada mavi, protein içeren ilk tamponu temsil eder ve kırmızı, pepsin ile basitleştirilmiş SGF'yi temsil eder. Basitleştirilmiş SGF ve pepsin ile alt faz değişimi sırasında, ilk protein tabakasını seyrelten proteinin hidrolizi nedeniyle ara yüz gerginliği artar. Grafik görüntü, narenciye pektininin gastrik lipolizini temsil eder.Burada, mavi narenciye pektin ile ilk tamponu, sarı gastrik lipaz ile basitleştirilmiş SGF'yi ve gri basitleştirilmiş SGF'yi temsil eder. Gastrik lipaz ile alt faz değişimi yüzey gerilimini azaltırken, basitleştirilmiş SGF ile alt faz değişimi, ara yüz gerginliğinin boş bir cevabını sağlar. Burada bağırsak sindirim profillerinin bir örneği gösterilmektedir.Absorpsiyon, desorpsiyon, biyo tuzların profilleri, lipaz ve lipaz artı safra tuzları basitleştirilmiş SIF'de 37 santigrat derecede sunulmaktadır. Grafik görüntü, iki plueronik F127 ve F68 varyantının lipolizi üzerine ara yüz gerginliğinin evrimini göstermektedir. Lipaz ve safra tuzlarının emilimi ve yağ suyu arayüzünde daha önce oluşturulmuş F68 ve F127 ara yüz filmlerine serbest yağ asitlerinin üretilmesi nedeniyle ara yüz gerginliğinde dik bir azalma görülebilir.Desorpsiyon adımı, safra tuzları, F68 ve F127'den basitleştirilmiş SIF ile alt faz değişimini gösterir. AS48 emilen filmin in vitro sindirim profili, insan su arayüzünde hava suyu arayüzünde emilen film ve sığır serum albümini zeytinyağı su arayüzünde emilir. Temsili görüntüler, zeytinyağı su arayüzünde beta laktoglobulin emilen filmin in vitro sindiriminin ara yüz gerginliğini, dilatasyon elastikiyetini ve dilatasyon viskozitesini göstermektedir.Dilatasyon parametreleri, sindirilen arayüz her adımda dengelendikten sonra 1 hertz, 0.1 hertz ve 0.01 hertz'de ölçüldü. İşlemi karşılık gelen santrifüj tüpleri, kılcal damar veya eksen ile programlarken topları eşleştirmek önemlidir, daha sonra düşme bölgesi dağılımının evrimi, daha sonra, elektroforetik hareketlilik damlacıkların potansiyelini belirler ve lipolizde üretilen amino serbest yağ asidi, ara yüz gerginliğinden elde edilen bulgularla karşılık gelen tamamlayıcı bilgiler sunar. Bu teknik, gastrointestinal sistem içinde farklı yerlerde besin ve ilaç vermek ve ayrıca yeni kapsülleme sistemleri geliştirmek için farklı sindirilebilirlik profillerine sahip ara yüz katmanları sağlar.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

In vitro Digestion of Emulsions in a Single Droplet via Multi Subphase Exchange of Simulated Gastrointestinal Fluids

Detection of the pH-dependent Activity of Escherichia coli Chaperone HdeB In Vitro and In Vivo

Detection of the pH-dependent Activity of Escherichia coli Chaperone HdeB In Vitro and In Vivo

pH bağımlı aktivitenin tespiti<em&gt; Escherichia coli</em&gt; Chaperone HdeB<em&gt; İn Vitro</em&gt; ve<em&gt; İn Vivo</em

Bacteria are frequently exposed to environmental changes, such as alterations in pH, temperature, redox status, light exposure or mechanical force. Many ...

Biyokimya

Thermostabilization, Expression, Purification, and Crystallization of the Human Serotonin Transporter Bound to S-citalopram

Thermostabilization, Expression, Purification, and Crystallization of the Human Serotonin Transporter Bound to S-citalopram

Termo, İfade, saflaştırılması, ve İnsan serotonin Transporter Kristalizasyon Bound<em&gt; S</em&gt; -citalopram

The serotonin transporter is a sodium and chloride-coupled transporter that &#34;pumps&#34; extracellular serotonin into cells. S-citalopram is a drug ...

Time-resolved ElectroSpray Ionization Hydrogen-deuterium Exchange Mass Spectrometry for Studying Protein Structure and Dynamics

Zaman çözülmesi elektro sprey iyonizasyon Hidrojen-döteryum Değişim Kütle Spektrometre Protein Yapısı ve Dinamikleri incelenmesi için

Intrinsically disordered proteins (IDPs) have long been a challenge to structural biologists due to their lack of stable secondary structure elements. ...

Preparation of Keratin Hydrolysate from Chicken Feathers and Its Application in Cosmetics

Keratin hidrolizat tavuk tüyleri ve kozmetik kendi uygulamasında hazırlanması

Keratin hydrolysates (KHs) are established standard components in hair cosmetics. Understanding the moisturizing effects of KH is advantageous for ...

Isolation and Respiratory Measurements of Mitochondria from Arabidopsis thaliana

Isolation and Respiratory Measurements of Mitochondria from Arabidopsis thaliana

Yalıtım ve solunum ölçümleri mitokondri Arabidopsis thaliana üzerinden

Mitochondria are essential organelles involved in numerous metabolic pathways in plants, most notably the production of adenosine triphosphate (ATP) from ...

A Colorimetric Method for Measuring Iron Content in Plants

Demir içeriği tesislerinde ölçme kolorimetrik yöntemi

Iron, one of the most important micronutrients in living organisms, is involved in basic processes, such as respiration and photosynthesis. Iron content ...

Quantification of Hypopigmentation Activity In Vitro

Miktar hipopigmentasyon aktivitesinin in Vitro

This study presents laboratory methods for the quantification of hypopigmentation activity in vitro. Melanin, the major pigment in melanocytes, is ...

Fluorescent Visualization of Mango-tagged RNA in Polyacrylamide Gels via a Poststaining Method

Polyacrylamide jeller içinde Mango-Tagged RNA floresan görselleştirme bir Poststaining yöntemi ile

Native and denaturing polyacrylamide gels are routinely used to characterize ribonucleoprotein (RNP) complex mobility and to measure RNA size, ...

Ion Exchange Chromatography (IEX) Coupled to Multi-angle Light Scattering (MALS) for Protein Separation and Characterization

Ion Exchange Chromatography IEX Coupled to Multi-angle Light Scattering MALS for Protein Separation and Characterization

Protein ayrımı ve karakterizasyonu için birden fazla açıyla ışık saçılma (MALS) birleştiğinde iyon Kromatografi (IEX)

Ion-exchange chromatography with multi-angle light scattering (IEX-MALS) is a powerful method for protein separation and characterization. The combination ...

An In Vitro Single-Molecule Imaging Assay for the Analysis of Cap-Dependent Translation Kinetics

An In Vitro Single-Molecule Imaging Assay for the Analysis of Cap-Dependent Translation Kinetics

Kapak Bağımlı Çeviri Kinetiğinin Analizi için Bir In Vitro Tek Moleküllü Görüntüleme Tahlili

Cap-dependent protein synthesis is the predominant translation pathway in eukaryotic cells. While various biochemical and genetic approaches have allowed ...