Name: microfluidics-assisted selective depolarization of axonal mitochondria
Uploaded: 2022-08-04T14:15:00
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इस अध्ययन को जर्मन रिसर्च फाउंडेशन (एचए 7728/2-1 और एक्ससी 2145 प्रोजेक्ट आईडी 390857198) और मैक्स प्लैंक सोसाइटी द्वारा समर्थित किया गया था।

सभी पशु प्रयोग ऊपरी बवेरिया सरकार के प्रासंगिक दिशानिर्देशों और नियमों का पालन करते हुए किए गए थे। प्राथमिक न्यूरॉन्स को दोनों लिंगों के E16.5 C57BL/6 जंगली प्रकार के माउस भ्रूण से मानक विधियों का पालन करते ह...

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	<li>Murali Mahadevan, H., Hashemiaghdam, A., Ashrafi, G., Harbauer, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondria+in+neuronal+health:+from+energy+metabolism+to+Parkinson's+disease.">Mitochondria in neuronal health: from energy metabolism to Parkinson's disease.</a> Advanced Biology. 5 (9), 2100663 (2021).</li><li>Dauer, W., Przedborski, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parkinson's+disease:+mechanisms+and+models.">Parkinson's disease: mechanisms and models.</a> Neuron. 39 (6), 889-909 (2003).</li><li>Moratalla, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+vulnerability+of+primate+caudate-putamen+and+striosome-matrix+dopamine+systems+to+the+neurotoxic+effects+of+1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-+tetrahydropyridine.">Differential vulnerability of primate caudate-putamen and striosome-matrix dopamine systems to the neurotoxic effects of 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6- tetrahydropyridine.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 89 (9), 3859-3863 (1992).</li><li>Cheng, H. -. C., Ulane, C. M., Burke, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+progression+in+Parkinson+disease+and+the+neurobiology+of+axons.">Clinical progression in Parkinson disease and the neurobiology of axons.</a> Annals of Neurology. 67 (6), 715-725 (2010).</li><li>Taylor, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+microfluidic+culture+platform+for+CNS+axonal+injury,+regeneration+and+transport.">A microfluidic culture platform for CNS axonal injury, regeneration and transport.</a> Nature Methods. 2 (8), 599-605 (2005).</li><li>Harbauer, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+mitochondria+transport+Pink1+mRNA+via+synaptojanin+2+to+support+local+mitophagy.">Neuronal mitochondria transport Pink1 mRNA via synaptojanin 2 to support local mitophagy.</a> Neuron. 110 (9), 1516-1531 (2022).</li><li>Ashrafi, G., Schlehe, J. S., LaVoie, M. J., Schwarz, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitophagy+of+damaged+mitochondria+occurs+locally+in+distal+neuronal+axons+and+requires+PINK1+and+Parkin.">Mitophagy of damaged mitochondria occurs locally in distal neuronal axons and requires PINK1 and Parkin.</a> Journal of Cell Biology. 206 (5), 655-670 (2014).</li><li>Shipman, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazine&#235;thanesulfonic+acid+(HEPES)+as+a+tissue+culture+buffer.">Evaluation of 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazine&#235;thanesulfonic acid (HEPES) as a tissue culture buffer.</a> Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine. 130 (1), 305-310 (1969).</li><li>Harbauer, A. B., Schneider, A., Wohlleber, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+mitochondria+by+single-organelle+resolution.">Analysis of mitochondria by single-organelle resolution.</a> Annual Review of Analytical Chemistry. 15, 1-16 (2022).</li><li>Taylor, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axonal+mRNA+in+uninjured+and+regenerating+cortical+mammalian+axons.">Axonal mRNA in uninjured and regenerating cortical mammalian axons.</a> The Journal of Neuroscience. 29 (15), 4697-4707 (2009).</li><li>Altman, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axonal+TDP-43+condensates+drive+neuromuscular+junction+disruption+through+inhibition+of+local+synthesis+of+nuclear+encoded+mitochondrial+proteins.">Axonal TDP-43 condensates drive neuromuscular junction disruption through inhibition of local synthesis of nuclear encoded mitochondrial proteins.</a> Nature Communications. 12 (1), 1-17 (2021).</li></ol>

वर्तमान प्रोटोकॉल एक माइक्रोफ्लुइडिक डिवाइस में अलग-अलग हिप्पोकैम्पल न्यूरॉन्स को बीज और संस्कृति करने के लिए एक विधि का वर्णन करता है ताकि अक्षीय माइटोकॉन्ड्रिया का अलग से इलाज किया जा सके। झिल्ली-...

माइटोकॉन्ड्रिया न्यूरॉन्स में एटीपी (एडेनोसिन ट्राइफॉस्फेट) के मुख्य आपूर्तिकर्ता हैं। चूंकि न्यूरोनल स्वास्थ्य माइटोकॉन्ड्रियल फ़ंक्शन से घनिष्ठ रूप से जुड़ा हुआ है, यह आश्चर्य की बात नहीं है कि इन ऑर्गेनेल के बेकार विनियमन को पार्किंसंस रोग1 सहित विभिन्न न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों की शुरुआत से जोड़ा गया है। इसके अलावा, माइटोकॉन्ड्रियल नशा जानवरों में पार्किंसनियन लक्षणों को मॉडल करने के लिए सफलतापूर्वक उपयोग किया गयाहै। पशु मॉडल और मानव रोग दोनों में, न्यूरॉन्स का निधन डिस्टल भागों 3,4 से शुरू होता है, यह संकेत देते हुए कि अक्षीय माइटोकॉन्ड्रिया अपमान के लिए अधिक संवेदनशील हो सकते हैं। हालांकि, कोशिका शरीर प्रक्रियाओं की एक साथ गड़बड़ी के बिना अक्षीय माइटोकॉन्ड्रिया के लक्षित उपचार और विश्लेषण से जुड़ी कठिनाइयों के कारण अक्षतंतु में माइटोकॉन्ड्रिया के जीव विज्ञान को अच्छी तरह से समझा नहीं गया है।
विट्रो में अलग-थलग न्यूरॉन्स की खेती तकनीकों में हालिया प्रगति अब माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणों के माध्यम से अक्षतंतु और कोशिका निकायों के द्रव पृथक्करण की अनुमति देतीहै। जैसा कि चित्र 1 ए में दर्शाया गया है, इन उपकरणों में चार एक्सेस कुएं (ए / एच और सी / आई) हैं, जिसमें प्रत्येक जोड़ी (डी और एफ) को जोड़ने वाले दो चैनल हैं। बड़े चैनल 450 μm लंबे माइक्रोचैनलों (e) की एक श्रृंखला द्वारा एक दूसरे के साथ जुड़े हुए हैं। दो कक्षों के बीच भरण स्तरों में जानबूझकर अंतर एक द्रव दबाव ढाल (चित्रा 1 बी) बनाता है जो चैनल से छोटे अणुओं के प्रसार को कम द्रव स्तर के साथ दूसरी तरफ रोकता है (चित्रा 1 सी, ट्रिपैन ब्लू डाई के साथ चित्रित)।
हमने हाल ही में एक्सोनल माइटोफैगी में स्थानीय अनुवाद आवश्यकताओं का अध्ययन करने के लिए माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणों का उपयोग किया, क्षतिग्रस्त माइटोकॉन्ड्रिया6 का चयनात्मक निष्कासन। वर्तमान प्रोटोकॉल में, माइटोकॉन्ड्रियल कॉम्प्लेक्स III अवरोधक एंटीमाइसिन ए 6,7 का उपयोग करके अक्षतंतु के चयनात्मक उपचार के माध्यम से स्थानीय माइटोकॉन्ड्रियल क्षति को प्रेरित करने के लिए विभिन्न चरण प्रस्तुत किए जाते हैं।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>6-well Glass bottom plate</td>
			<td>Cellvis</td>
			<td>P06.1.5H-N</td>
			<td>Silicone device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antimycin A</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A8674</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17504044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EVOS M5000 widefield microscope</td>
			<td>Thermofischer Scientific</td>
			<td>EVOS M5000</td>
			<td>fully integrated digital widefield microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hibernate E</td>
			<td>BrainBits</td>
			<td>HE500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inverted spinning disk confocal</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>TI2-E + CSU-W1</td>
			<td>With incubator chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>L2020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microfluidic devices</td>
			<td>XONA microfluidics</td>
			<td>RD450</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21103049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-D-Lysine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P2636</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TMRE</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>87917</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

microfluidics-assisted selective depolarization of axonal mitochondria

माइटोकॉन्ड्रिया न्यूरॉन्स में एटीपी (एडेनोसिन ट्राइफॉस्फेट) के प्राथमिक आपूर्तिकर्ता हैं। माइटोकॉन्ड्रियल डिसफंक्शन कई न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों में एक सामान्य फेनोटाइप है। कुछ अक्षतंतु की विस्तृत वास्तुकला और अत्यधिक लंबाई को देखते हुए, यह आश्चर्य की बात नहीं है कि अक्षतंतु में माइटोकॉन्ड्रिया अपने सेल शरीर समकक्षों की तुलना में अलग-अलग वातावरण का अनुभव कर सकते हैं। दिलचस्प बात यह है कि अक्षीय माइटोकॉन्ड्रिया की शिथिलता अक्सर कोशिका शरीर पर प्रभाव से पहले होती है। विट्रो में अक्षीय माइटोकॉन्ड्रियल डिसफंक्शन को मॉडल करने के लिए, माइक्रोफ्लुइडिक डिवाइस सोमल माइटोकॉन्ड्रिया को प्रभावित किए बिना अक्षीय माइटोकॉन्ड्रिया के उपचार की अनुमति देते हैं। इन कक्षों में द्रवीय दबाव ढाल ढाल के खिलाफ अणुओं के प्रसार को रोकता है, इस प्रकार अक्षतंतु के भीतर स्थानीय औषधीय चुनौतियों के जवाब में माइटोकॉन्ड्रियल गुणों के विश्लेषण की अनुमति देता है। वर्तमान प्रोटोकॉल माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणों में अलग-थलग हिप्पोकैम्पल न्यूरॉन्स के सीडिंग, झिल्ली-संभावित संवेदनशील डाई के साथ धुंधला, माइटोकॉन्ड्रियल विष के साथ उपचार और बाद के सूक्ष्म विश्लेषण का वर्णन करता है। अक्षीय जीव विज्ञान का अध्ययन करने के लिए यह बहुमुखी विधि कई औषधीय गड़बड़ी और इमेजिंग रीडआउट पर लागू की जा सकती है, और कई न्यूरोनल उपप्रकारों के लिए उपयुक्त है।

प्राथमिक हिप्पोकैम्पल न्यूरॉन्स को माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणों में 7-8 दिनों के लिए उगाया गया था, इससे पहले कि माइटोकॉन्ड्रिया को दोनों चैनलों में 25 मिनट के लिए झिल्ली-संवेदनशील डाई (टीएमआरई) से दाग दिया ग?...

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Microfluidics-Assisted Selective Depolarization of Axonal Mitochondria

वर्तमान प्रोटोकॉल माइक्रोफ्लुइडिक कक्षों में न्यूरोनल माइटोकॉन्ड्रिया के सीडिंग और धुंधला होने का वर्णन करता है। इन कक्षों में द्रव दबाव ढाल कोशिका शरीर के डिब्बे को प्रभावित किए बिना औषधीय चुनौतियों के जवाब में उनके गुणों का विश्लेषण करने के लिए अक्षतंतु में माइटोकॉन्ड्रिया के चयनात्मक उपचार की अनुमति देता है।

माइक्रोफ्लुइडिक्स-अक्षीय माइटोकॉन्ड्रिया का सहायक चयनात्मक विध्रुवण

Mitochondria are the primary suppliers of ATP (adenosine triphosphate) in neurons. Mitochondrial dysfunction is a common phenotype in many ...

माइटोकॉन्ड्रिया न्यूरोनल स्वास्थ्य के लिए आवश्यक हैं। कई न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों में, अक्षीय माइटोकॉन्ड्रिया पीड़ित होने वाले पहले लोग हैं, लेकिन यह स्पष्ट नहीं है कि अक्षीय माइटोकॉन्ड्रिया को इतना खास क्या बनाता है। इस प्रोटोकॉल में उपयोग किए जाने वाले कक्षों में द्रव दबाव ढाल माइटोकॉन्ड्रियन अक्षतंतु के चयनात्मक उपचार की अनुमति देता है।यह कोशिका शरीर की प्रक्रियाओं को अबाधित छोड़ देता है, और हमें अक्षीय जीव विज्ञान पर ध्यान केंद्रित करने की अनुमति देता है। हम यहां एक झिल्ली संभावित संवेदनशील डाई के साथ माइटोकॉन्ड्रिया के विध्रुवण को दिखाते हैं, लेकिन इस विधि को कई अलग-अलग न्यूरोनल सेल प्रकारों और फ्लोरोसेंट रीडआउट पर लागू किया जा सकता है। शुरू करने के लिए, कोडित छह अच्छी प्लेटों को बाँझ हुड में रखें, और उन्हें बाँझ डबल आसुत पानी से दो बार धोएं।प्लेटों को तीन से पांच मिनट के लिए झुकी हुई स्थिति में सूखने दें। वैक्यूम सक्शन या पिपेटिंग द्वारा अतिरिक्त पानी निकालें। फिर माइक्रोफ्लुइडिक कक्ष को 80% इथेनॉल में भिगोदें।फिर, माइक्रोफ्लुइडिक कक्ष को झुकी हुई स्थिति में तीन से पांच मिनट के लिए सुखाएं, और पिपेट टिप के साथ अतिरिक्त इथेनॉल को हटा दें। पूरी तरह से सूख जाने पर, माइक्रोफ्लुइडिक कक्ष को कुएं और प्लेट के केंद्र में रखें। ग्लास प्लेट से उचित लगाव के लिए धीरे से अपनी सीमाओं पर माइक्रोफ्लुइडिक कक्ष और बीच में माइक्रोग्रूव सेक्शन टैप करें।सबसे पहले, 1.5 मिलीलीटर प्रतिक्रिया ट्यूब में अलग-थलग हिप्पोकैम्पल न्यूरॉन्स की वांछित संख्या एकत्र करें। कमरे के तापमान पर चार मिनट के लिए ट्यूब को 1000 गुना जी पर सेंट्रीफ्यूज करें। सुपरनैटेंट को छोड़ दें, और बी -27 न्यूरो बेसल मीडिया के आठ माइक्रोलीटर में गोली को फिर से निलंबित करें।फिर सेल समाधान को माइक्रोफ्लुइडिक कक्ष के चैनल प्रवेश द्वार में वितरित करें। चैनल के माध्यम से प्रवाह की सहायता के लिए प्लेट के पीछे टैप करें। पिपेट का उपयोग करके, चैनल के निकास पर किसी भी शेष सेल निलंबन को एस्पिरेट करें।माइक्रोफ्लुइडिक कक्ष को 37 डिग्री सेल्सियस और 5% कार्बन डाइऑक्साइड पर 15 से 20 मिनट के लिए कोशिकाओं के साथ इनक्यूबेट करें। इसके बाद, बी -27 न्यूरोबेसल मीडिया के 50 माइक्रोलीटर के साथ शीर्ष अक्षीय अच्छी तरह से भरें, और प्रवाह की सहायता के लिए प्लेट के पीछे टैप करें। सोमा साइड पर प्रत्येक अच्छी तरह से बी -27 न्यूरोबेसल मीडिया के 150 माइक्रोलीटर के साथ भरें, जिससे शीर्ष पर तनाव बुलबुला बन जाए।इसके अलावा बी -27 न्यूरोबेसल मीडिया के 100 माइक्रोलीटर के साथ अक्षीय पक्ष के दोनों कुओं को भरें। इन-विट्रो संस्कृति के सात से आठ दिनों के बाद, सुनिश्चित करें कि अक्षतंतु माइक्रोग्रूव के माध्यम से बढ़े हैं, और अक्षीय डिब्बे में विस्तारित हुए हैं। बी -27 न्यूरोबेसल माध्यम को हटाकर डिवाइस को धोएं, और एक्सोनल और सोमा चैनलों दोनों के शीर्ष कुओं में पूर्व-गर्म इमेजिंग माध्यम के 100 माइक्रोलीटर जोड़ें।माध्यम को निचले कुओं में बहने दें। निचले कुओं से माध्यम को हटा दें, और शीर्ष कुओं से किसी भी बचे हुए माध्यम को हटा दें, और ताजा माध्यम के साथ दोहराएं, जिससे धोने के अंत में कुओं को खाली छोड़ दिया जाए। फिर दैहिक और अक्षीय शीर्ष कुओं दोनों में पांच नैनोमोलर टीएमआरई तनुकरण के 100 माइक्रोलीटर जोड़ें।माध्यम को दोनों डिब्बों के माध्यम से बहने दें, जब तक कि सभी कुओं में समान मात्रा न हो। टीएमआरई युक्त माध्यम से भरें। दैहिक डिब्बे में रुचि के क्षेत्र का चयन करें, और इसे माइक्रोग्रूव के माध्यम से अक्षीय डिब्बे में पालन करें।सुनिश्चित करें कि दैहिक और अक्षीय डिब्बों में चित्रित सूक्ष्म खांचे एक दूसरे से मेल खाते हैं। फ़ाइल नाम बदलने के बाद, 561 नैनोमीटर उत्तेजना और 625 नैनोमीटर उत्सर्जन तरंग दैर्ध्य का उपयोग करके लाल प्रतिदीप्ति छवियां प्राप्त करें। दैहिक पक्ष पर तनाव बुलबुले की उपस्थिति की जांच करके सोमा और अक्षीय कक्षों के बीच मात्रा अंतर सुनिश्चित करें।फिर चैनल के अंदर माध्यम को छोड़कर, अक्षीय पक्ष के दोनों कुओं से इमेजिंग माध्यम को हटा दें। माइटोकॉन्ड्रियल विध्रुवण को प्रेरित करने के लिए, 20 माइक्रोमोलर एंटीमाइसिन ए के 160 माइक्रोलीटर जोड़ें जो इमेजिंग माध्यम में शीर्ष अक्षीय कुएं में पतला है। इसे चैनल के माध्यम से बहने दें जब तक कि दोनों अक्षीय कुओं में समान मात्रा न हो।इमेजिंग को दोहराएं, यह सुनिश्चित करते हुए कि माइक्रोग्रूव्स की पहचान करके बेसलाइन अधिग्रहण के दौरान समान स्थितियों को चित्रित किया गया है। इस प्रोटोकॉल का उपयोग करते हुए, प्राथमिक हिप्पोकैम्पल न्यूरॉन्स को माइक्रोफ्लुइडिक उपकरणों में उगाया गया था, इसके बाद एक झिल्ली संवेदनशील डाई, टीएमआरई के साथ माइटोकॉन्ड्रियल धुंधला हो गया था। माइटोकॉन्ड्रिया का समरूप धुंधलापन माइक्रोग्रूव के दोनों किनारों पर देखा गया था, लेकिन बीच में नहीं।अक्षीय पक्ष में एंटीमाइसिन ए को जोड़ने पर, सोमल माइटोकॉन्ड्रिया ने टीएमआरई सिग्नल को बनाए रखा, जबकि अक्षीय माइटोकॉन्ड्रिया से प्रतिदीप्ति खो गई थी यह सुनिश्चित करें कि डिवाइस को इकट्ठा करने से पहले कुएं में या डिवाइस पर कोई नमी नहीं बची है। अन्यथा, कक्षों को सील नहीं किया जाएगा। इस पद्धति का उपयोग करके, हम अक्षतंतु और स्थानीय कार्यों में माइटोकॉन्ड्रियल फ़ंक्शन के नुकसान के प्रभावों के साथ-साथ प्रतिगामी सिग्नलिंग और वैश्विक सेल अस्तित्व पर इसके प्रभाव का अध्ययन कर सकते हैं।माइटोकॉन्ड्रियल बायोजेनेसिस को लंबे समय से सेल शरीर में विशेष रूप से माना जाता था। इस विधि ने हमें यह प्रकट करने की अनुमति दी कि अक्षीय माइटोकॉन्ड्रिया क्षति को प्रोटीन पिंक 1 की कमी के स्थानीय अनुवाद की आवश्यकता थी।

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Mechanical Manipulation of Neurons to Control Axonal Development

न्यूरॉन्स के यांत्रिक हेरफेर axonal विकास नियंत्रण

Cell manipulations and extension of neuronal axons can be accomplished with calibrated glass micro-fibers capable of measuring and applying forces in the ...

Chromatin Immunoprecipitation from Dorsal Root Ganglia Tissue following Axonal Injury

Chromatin पृष्ठीय रूट ganglia ऊतक से axonal चोट के बाद immunoprecipitation

Axons in the central nervous system (CNS) do not regenerate while those in the peripheral nervous system (PNS) do regenerate 
to a limited extent after ...

Electroporation of the Hindbrain to Trace Axonal Trajectories and Synaptic Targets in the Chick Embryo

चिकी भ्रूण में axonal trajectories और Synaptic के लक्ष्य का पता लगाने के लिए hindbrain के electroporation

Electroporation of  the chick embryonic neural tube has many advantages such as being quick and efficient  for the expression of foreign genes into ...

Selective Tracing of Auditory Fibers in the Avian Embryonic Vestibulocochlear Nerve

एवियन भ्रूण Vestibulocochlear तंत्रिका में श्रवण फाइबर के चुनिंदा अनुरेखण

The embryonic chick is a widely used model for the study of peripheral and central ganglion cell projections. In the auditory system, selective labeling ...

Subtype-selective Electroporation of Cortical Interneurons

Cortical interneurons के उपप्रकार चयनात्मक Electroporation

The study of central nervous system (CNS) maturation relies on genetic targeting of neuronal populations. However, the task of restricting the expression ...

Real-time Imaging of Axonal Transport of Quantum Dot-labeled BDNF in Primary Neurons

क्वांटम के Axonal परिवहन की वास्तविक समय इमेजिंग प्राथमिक न्यूरॉन्स में BDNF डॉट लेबल

BDNF plays an important role in several facets of neuronal survival, differentiation, and function. Structural and functional deficits in axons are ...

Characterizing the Composition of Molecular Motors on Moving Axonal Cargo Using "Cargo Mapping" Analysis

का प्रयोग Axonal कार्गो स्थानांतरण पर आण्विक मोटर्स की संरचना निस्र्पक &quot;कार्गो मानचित्रण&quot; विश्लेषण

Understanding the mechanisms by which molecular motors coordinate their activities to transport vesicular cargoes within neurons requires the quantitative ...

Three-dimensional Imaging and Analysis of Mitochondria within Human Intraepidermal Nerve Fibers

तीन आयामी इमेजिंग और मानव Intraepidermal तंत्रिका तंतुओं के भीतर Mitochondria का विश्लेषण

The goal of this protocol is to study mitochondria within intraepidermal nerve fibers. Therefore, 3D imaging and analysis techniques were developed to ...

Analysis of Brain Mitochondria Using Serial Block-Face Scanning Electron Microscopy

ब्रेन माइटोकॉन्ड्रिया के विश्लेषण सीरियल ब्लॉक-फेस स्कैनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी का उपयोग

Human brain is a high energy consuming organ that mainly relies on glucose as a fuel source. Glucose is catabolized by brain mitochondria via glycolysis, ...

Visualization of the Axonal Projection Pattern of Embryonic Motor Neurons in Drosophila

Visualization of the Axonal Projection Pattern of Embryonic Motor Neurons in Drosophila

भ्रूण मोटर न्यूरॉन्स के एक्सोनल प्रोजेक्शन पैटर्न का विज़ुअलाइज़ेशन<em&gt; ड्रोसोफिला</em

The establishment of functional neuromuscular circuits relies on precise connections between developing motor axons and target muscles. Motor neurons ...