mGluR2 Expression with Incorporated Unnatural Amino Acid, Fluorescent Labeling, and Extraction
5:13
Single-Molecule Flow Chamber Assembly and Functionalization
6:23
Microscope Setup and smFRET Data Acquisition
7:47
Data Analysis
8:39
Results: Analyzing Conformational Dynamics of Membrane Receptors Proteins
10:11
Conclusion
Transcript
هنا ، استخدمنا FRET أحادي الجزيء ، ووضع علامات البروتين الخاصة بالموقع عبر دمج الأحماض الأمينية الطبيعية لدراسة الديناميكيات التوافقية ل mGluR2. هذا يسمح بدراسة ديناميكيات البروتين دون إزعاج بنية البروتين. يوفر الهيكل الذري صورة ثابتة للبروتين.
Sign in or start your free trial to access this content
تقدم هذه الدراسة إجراء مفصلا لإجراء تجارب نقل طاقة الرنين الفلوري أحادي الجزيء (smFRET) على مستقبلات G المقترنة بالبروتين (GPCRs) باستخدام وضع العلامات الخاصة بالموقع عن طريق دمج الأحماض الأمينية غير الطبيعية (UAA). يوفر البروتوكول دليلا خطوة بخطوة لإعداد عينة smFRET والتجارب وتحليل البيانات.