mGluR2 Expression with Incorporated Unnatural Amino Acid, Fluorescent Labeling, and Extraction
5:13
Single-Molecule Flow Chamber Assembly and Functionalization
6:23
Microscope Setup and smFRET Data Acquisition
7:47
Data Analysis
8:39
Results: Analyzing Conformational Dynamics of Membrane Receptors Proteins
10:11
Conclusion
Transcript
यहां, हमने mGluR2 की संवहन गतिशीलता का अध्ययन करने के लिए एक प्राकृतिक अमीनो एसिड निगमन के माध्यम से एकल-अणु फ्रेट, और साइट-विशिष्ट प्रोटीन लेबलिंग का उपयोग किया। यह प्रोटीन संरचना को परेशान किए बिना प्रोटीन गतिशीलता का अध्ययन करने की अनुमति देता
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यह अध्ययन अप्राकृतिक अमीनो एसिड (यूएए) निगमन के माध्यम से साइट-विशिष्ट लेबलिंग का उपयोग करके जी प्रोटीन-युग्मित रिसेप्टर्स (जीपीसीआर) पर एकल-अणु प्रतिदीप्ति अनुनाद ऊर्जा हस्तांतरण (एसएमफ्रेट) प्रयोगों को करने के लिए एक विस्तृत प्रक्रिया प्रस्तुत करता है। प्रोटोकॉल एसएमफ्रेट नमूना तैयारी, प्रयोगों और डेटा विश्लेषण के लिए एक चरण-दर-चरण मार्गदर्शिका प्रदान करता है।