mGluR2 Expression with Incorporated Unnatural Amino Acid, Fluorescent Labeling, and Extraction
5:13
Single-Molecule Flow Chamber Assembly and Functionalization
6:23
Microscope Setup and smFRET Data Acquisition
7:47
Data Analysis
8:39
Results: Analyzing Conformational Dynamics of Membrane Receptors Proteins
10:11
Conclusion
Transcript
여기에서는 단일 분자 FRET와 천연 아미노산 통합을 통한 부위 특이적 단백질 표지를 사용하여 mGluR2의 구조적 역학을 연구했습니다. 이를 통해 단백질 구조를 교란하지 않고 단백질 역학을 연구 할 수 있습니다. 원자 구조는 단백질의 정적 이미지를 제공합니다.
그러나 단일 분자 FRET를 사용하면 전체 범위의 단백질 움직임을 실시간으로 시각화할 수 있습니다. 이 방법은 모든 단백질의 역학을 연구하는 데 적용될 수 있습니다. 또
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이 연구는 비천연 아미노산(UAA) 통합을 통한 부위 특이적 표지를 사용하여 G 단백질 결합 수용체(GPCR)에 대한 단일 분자 형광 공명 에너지 전달(smFRET) 실험을 수행하는 자세한 절차를 제시합니다. 이 프로토콜은 smFRET 샘플 준비, 실험 및 데이터 분석을 위한 단계별 가이드를 제공합니다.