mGluR2 Expression with Incorporated Unnatural Amino Acid, Fluorescent Labeling, and Extraction
5:13
Single-Molecule Flow Chamber Assembly and Functionalization
6:23
Microscope Setup and smFRET Data Acquisition
7:47
Data Analysis
8:39
Results: Analyzing Conformational Dynamics of Membrane Receptors Proteins
10:11
Conclusion
Transcript
Her brukte vi enkeltmolekyl FRET og stedsspesifikk proteinmerking via en naturlig aminosyreinkorporering for å studere konformasjonsdynamikken til mGluR2. Dette gjør det mulig å studere proteindynamikken uten forstyrrende proteinstruktur. Atomstru
Sign in or start your free trial to access this content
Denne studien presenterer en detaljert prosedyre for å utføre enkeltmolekylfluorescensresonansenergioverføringseksperimenter (smFRET) på G-proteinkoblede reseptorer (GPCR) ved bruk av stedsspesifikk merking via unaturlig aminosyre (UAA) inkorporering. Protokollen gir en trinnvis veiledning for smFRET-prøvepreparering, eksperimenter og dataanalyse.