mGluR2 Expression with Incorporated Unnatural Amino Acid, Fluorescent Labeling, and Extraction
5:13
Single-Molecule Flow Chamber Assembly and Functionalization
6:23
Microscope Setup and smFRET Data Acquisition
7:47
Data Analysis
8:39
Results: Analyzing Conformational Dynamics of Membrane Receptors Proteins
10:11
Conclusion
Transcript
Здесь мы использовали одномолекулярный FRET и маркировку белка, специфичного для сайта, с помощью естественного включения аминокислот для изучения конформационной динамики mGluR2. Это позволяет изучать динамику белка, не нарушая структуру белка. А
Sign in or start your free trial to access this content
В этом исследовании представлена подробная процедура проведения экспериментов по переносу энергии одномолекулярного флуоресцентного резонанса (smFRET) на рецепторах, связанных с G-белком (GPCR), с использованием сайт-специфической маркировки через включение неестественных аминокислот (UAA). Протокол содержит пошаговое руководство по подготовке образцов smFRET, экспериментам и анализу данных.