mGluR2 Expression with Incorporated Unnatural Amino Acid, Fluorescent Labeling, and Extraction
5:13
Single-Molecule Flow Chamber Assembly and Functionalization
6:23
Microscope Setup and smFRET Data Acquisition
7:47
Data Analysis
8:39
Results: Analyzing Conformational Dynamics of Membrane Receptors Proteins
10:11
Conclusion
Transcript
Här använde vi enmolekylär FRET och platsspecifik proteinmärkning via en naturlig aminosyrainkorporering för att studera konformationsdynamiken hos mGluR2. Detta gör det möjligt att studera proteindynamiken utan störande proteinstruktur. Atomstruk
Sign in or start your free trial to access this content
Denna studie presenterar en detaljerad procedur för att utföra enmolekylära fluorescensresonansenergiöverföringsexperiment (smFRET) på G-proteinkopplade receptorer (GPCR) med hjälp av platsspecifik märkning via onaturlig aminosyra (UAA) införlivande. Protokollet innehåller en steg-för-steg-guide för smFRET-provberedning, experiment och dataanalys.