Name: measuring skeletal muscle thermogenesis in mice and rats
Uploaded: 2022-07-27T14:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Skeletal Muscle Thermogenesis in Mice and Rats at JoVE.com

עבודה זו נתמכת על ידי R15 DK097644 ו- R15 DK108668. אנו מודים לד"ר צ'ייטניה ק' גאביני ולד"ר מייגן ריץ' על תרומות קודמות ולד"ר סטנלי דנמילר על שהבטחנו את עמידתנו בהנחיות המוסדיות לשימוש בבעלי חיים. תודה מיוחדת לד"ר טים ברטנס על מתן המחקר הבסיסי הדרוש לבניית שיטה זו והמחקרים הקשורים אליה. איורים 1A, C, D ואיור 2A נוצרו באמצעות Biorender.com.

ניתן ליישם שיטות אלה הן על מודלים של חולדות והן על עכברים והן בוצעו באישור מוסדי (אוניברסיטת קנט סטייט, אישור IACUC #359 ו- #340 CN 12-04). לפני יישום הפרוטוקול, יש לשכן בעלי חיים בהתאם למדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה.
1. הכנת קורא המשדרים
הערה: לפני השימוש, י...

<ol>
	<li>Periasamy, M., Herrera, J. L., Reis, F. C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+muscle+thermogenesis+and+its+role+in+whole+body+energy+metabolism.">Skeletal muscle thermogenesis and its role in whole body energy metabolism.</a> Diabetes Metabolism Journal. 41 (5), 327-336 (2017).</li><li>Rowland, L. A., Bal, N. C., Periasamy, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+skeletal-muscle-based+thermogenic+mechanisms+in+vertebrate+endothermy.">The role of skeletal-muscle-based thermogenic mechanisms in vertebrate endothermy.</a> Biological Reviews of the Cambridge Philosophical Society. 90 (4), 1279-1297 (2015).</li><li>Maurya, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sarcolipin+is+a+key+determinant+of+the+basal+metabolic+rate,+and+its+overexpression+enhances+energy+expenditure+and+resistance+against+diet-induced+obesity.">Sarcolipin is a key determinant of the basal metabolic rate, and its overexpression enhances energy expenditure and resistance against diet-induced obesity.</a> Journal of Biological Chemistry. 290 (17), 10840-10849 (2015).</li><li>Grigg, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-body+endothermy:+Ancient,+homologous+and+widespread+among+the+ancestors+of+mammals,+birds+and+crocodylians.">Whole-body endothermy: Ancient, homologous and widespread among the ancestors of mammals, birds and crocodylians.</a> Biological Reviews of the Cambridge Philosophical Society. 97 (2), 766-801 (2022).</li><li>Franck, J. P. C., Slight-Simcoe, E., Wegner, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothermy+in+the+smalleye+opah+(Lampris+incognitus):+A+potential+role+for+the+uncoupling+protein+sarcolipin.">Endothermy in the smalleye opah (Lampris incognitus): A potential role for the uncoupling protein sarcolipin.</a> Comparative Biochemistry and Physiology - Part A: Molecular &amp; Integrative Physiology. 233, 48-52 (2019).</li><li>Nowack, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+nonshivering+thermogenesis+in+a+feral+mammal.">Muscle nonshivering thermogenesis in a feral mammal.</a> Scientific Reports. 9, 6378 (2019).</li><li>Oliver, S. R., Anderson, K. J., Hunstiger, M. M., Andrews, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Turning+down+the+heat:+Down-regulation+of+sarcolipin+in+a+hibernating+mammal.">Turning down the heat: Down-regulation of sarcolipin in a hibernating mammal.</a> Neuroscience Letters. 696, 13-19 (2019).</li><li>Gorrell, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+muscle+thermogenesis+induction+by+exposure+to+predator+odor.">Skeletal muscle thermogenesis induction by exposure to predator odor.</a> The Journal of Experimental Biology. 223, (2020).</li><li>Gavini, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leanness+and+heightened+nonresting+energy+expenditure:+Role+of+skeletal+muscle+activity+thermogenesis.">Leanness and heightened nonresting energy expenditure: Role of skeletal muscle activity thermogenesis.</a> The American Journal of Physiology - Endocrinology and Metabolism. 306 (6), 635-647 (2014).</li><li>Almundarij, T. I., Gavini, C. K., Novak, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppressed+sympathetic+outflow+to+skeletal+muscle,+muscle+thermogenesis,+and+activity+energy+expenditure+with+calorie+restriction.">Suppressed sympathetic outflow to skeletal muscle, muscle thermogenesis, and activity energy expenditure with calorie restriction.</a> Physiological Reports. 5 (4), 13171 (2017).</li><li>Harshaw, C., Lanzkowsky, J., Tran, A. D., Bradley, A. R., Jaime, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+and+'social+hyperthermia':+Interaction+with+beta3-adrenergic+receptor-mediated+thermogenesis+and+significance+for+the+expression+of+social+behavior+in+male+and+female+mice.">Oxytocin and 'social hyperthermia': Interaction with beta3-adrenergic receptor-mediated thermogenesis and significance for the expression of social behavior in male and female mice.</a> Hormones and Behavior. 131, 104981 (2021).</li><li>Caldwell, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+and+vasopressin:+Powerful+regulators+of+social+behavior.">Oxytocin and vasopressin: Powerful regulators of social behavior.</a> The Neuroscientist. 23 (5), 517-528 (2017).</li><li>Harshaw, C., Leffel, J. K., Alberts, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+and+the+warm+outer+glow:+Thermoregulatory+deficits+cause+huddling+abnormalities+in+oxytocin-deficient+mouse+pups.">Oxytocin and the warm outer glow: Thermoregulatory deficits cause huddling abnormalities in oxytocin-deficient mouse pups.</a> Hormones and Behavior. 98, 145-158 (2018).</li><li>Gavini, C. K., Britton, S. L., Koch, L. G., Novak, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inherently+lean+rats+have+enhanced+activity+and+skeletal+muscle+response+to+central+melanocortin+receptors.">Inherently lean rats have enhanced activity and skeletal muscle response to central melanocortin receptors.</a> Obesity. 26 (5), 885-894 (2018).</li><li>Gavini, C. K., Jones, W. C., Novak, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventromedial+hypothalamic+melanocortin+receptor+activation:+regulation+of+activity+energy+expenditure+and+skeletal+muscle+thermogenesis.">Ventromedial hypothalamic melanocortin receptor activation: regulation of activity energy expenditure and skeletal muscle thermogenesis.</a> The Journal of Physiology. 594 (18), 5285-5301 (2016).</li><li>Zaretsky, D. V., Romanovsky, A. A., Zaretskaia, M. V., Molkov, Y. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+oxidative+metabolism+can+increase+the+difference+between+local+temperature+and+arterial+blood+temperature+by+up+to+1.3(o)C:+Implications+for+brain,+brown+adipose+tissue,+and+muscle+physiology.">Tissue oxidative metabolism can increase the difference between local temperature and arterial blood temperature by up to 1.3(o)C: Implications for brain, brown adipose tissue, and muscle physiology.</a> Temperature. 5 (1), 22-35 (2018).</li><li>Yoo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exercise+activates+compensatory+thermoregulatory+reaction+in+rats:+A+modeling+study.">Exercise activates compensatory thermoregulatory reaction in rats: A modeling study.</a> Journal of Applied Physiology. 119 (12), 1400-1410 (2015).</li><li>Langer, F., Fietz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ways+to+measure+body+temperature+in+the+field.">Ways to measure body temperature in the field.</a> Journal of Thermal Biology. 42, 46-51 (2014).</li><li>Pence, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Central+apolipoprotein+A-IV+stimulates+thermogenesis+in+brown+adipose+tissue.">Central apolipoprotein A-IV stimulates thermogenesis in brown adipose tissue.</a> International Journal of Molecular Sciences. 22 (3), 1221 (2021).</li><li>Li, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homeostatic+disturbance+of+thermoregulatory+functions+in+rats+with+chronic+fatigue.">Homeostatic disturbance of thermoregulatory functions in rats with chronic fatigue.</a> Journal of Neuroscience Research. 165, 45-50 (2021).</li><li>Carlier, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacodynamic+effects,+pharmacokinetics,+and+metabolism+of+the+synthetic+cannabinoid+AM-2201+in+male+rats.">Pharmacodynamic effects, pharmacokinetics, and metabolism of the synthetic cannabinoid AM-2201 in male rats.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 367 (3), 543-550 (2018).</li><li>Pato, A. M., Romero, D. M., Sosa Holt, C. S., Nemirovsky, S. I., Wolansky, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+subcutaneous+transponders+to+monitor+body+temperature+in+laboratory+rats.">Use of subcutaneous transponders to monitor body temperature in laboratory rats.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 114, 107145 (2022).</li><li>Almeida, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lean+in+one+way,+in+obesity+another:+Effects+of+moderate+exercise+in+brown+adipose+tissue+of+early+overfed+male+Wistar+rats.">Lean in one way, in obesity another: Effects of moderate exercise in brown adipose tissue of early overfed male Wistar rats.</a> International Journal of Obesity. 46 (1), 137-143 (2022).</li><li>Brito, M. N., Brito, N. A., Baro, D. J., Song, C. K., Bartness, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+activation+of+the+sympathetic+innervation+of+adipose+tissues+by+melanocortin+receptor+stimulation.">Differential activation of the sympathetic innervation of adipose tissues by melanocortin receptor stimulation.</a> Endocrinology. 148 (11), 5339-5347 (2007).</li><li>Vaughan, C. H., Shrestha, Y. B., Bartness, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+novel+melanocortin+receptor-containing+node+in+the+SNS+outflow+circuitry+to+brown+adipose+tissue+involved+in+thermogenesis.">Characterization of a novel melanocortin receptor-containing node in the SNS outflow circuitry to brown adipose tissue involved in thermogenesis.</a> Brain Research. 1411, 17-27 (2011).</li><li>Kort, W. J., Hekking-Weijma, J. M., TenKate, M. T., Sorm, V., VanStrik, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+microchip+implant+system+as+a+method+to+determine+body+temperature+of+terminally+ill+rats+and+mice.">A microchip implant system as a method to determine body temperature of terminally ill rats and mice.</a> Laboratory Animals. 32 (3), 260-269 (1998).</li><li>Mei, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Body+temperature+measurement+in+mice+during+acute+illness:+Implantable+temperature+transponder+versus+surface+infrared+thermometry.">Body temperature measurement in mice during acute illness: Implantable temperature transponder versus surface infrared thermometry.</a> Scientific Reports. 8, 3526 (2018).</li><li>Warn, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infrared+body+temperature+measurement+of+mice+as+an+early+predictor+of+death+in+experimental+fungal+infections.">Infrared body temperature measurement of mice as an early predictor of death in experimental fungal infections.</a> Laboratory Animals. 37 (2), 126-131 (2003).</li><li>Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+and+sensitive+method+for+measuring+thermal+nociception+in+cutaneous+hyperalgesia.">A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia.</a> Pain. 32 (1), 77-88 (1988).</li><li>Fiebig, K., Jourdan, T., Kock, M. H., Merle, R., Thone-Reineke, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+infrared+thermography+for+temperature+measurement+in+adult+male+NMRI+nude+mice.">Evaluation of infrared thermography for temperature measurement in adult male NMRI nude mice.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 57 (6), 715-724 (2018).</li><li>Franco, N. H., Geros, A., Oliveira, L., Olsson, I. A. S., Aguiar, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ThermoLabAnimal+-+A+high-throughput+analysis+software+for+non-invasive+thermal+assessment+of+laboratory+mice.">ThermoLabAnimal - A high-throughput analysis software for non-invasive thermal assessment of laboratory mice.</a> Physiology &amp; Behavior. 207, 113-121 (2019).</li><li>Koganti, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+KATP+channel+expression+in+skeletal+muscle+by+targeted+oligonucleotide+delivery+promotes+activity-linked+thermogenesis.">Disruption of KATP channel expression in skeletal muscle by targeted oligonucleotide delivery promotes activity-linked thermogenesis.</a> Molecular Therapy. 23 (4), 707-716 (2015).</li><li>Bal, N. C., Periasamy, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uncoupling+of+sarcoendoplasmic+reticulum+calcium+ATPase+pump+activity+by+sarcolipin+as+the+basis+for+muscle+non-shivering+thermogenesis.">Uncoupling of sarcoendoplasmic reticulum calcium ATPase pump activity by sarcolipin as the basis for muscle non-shivering thermogenesis.</a> Philosophical Transactions of the Royal Society B. 375 (1793), 20190135 (2020).</li><li>Hicks, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Body+temperature+and+cardiac+changes+induced+by+peripherally+administered+oxytocin,+vasopressin+and+the+non-peptide+oxytocin+receptor+agonist+WAY+267,464:+a+biotelemetry+study+in+rats.">Body temperature and cardiac changes induced by peripherally administered oxytocin, vasopressin and the non-peptide oxytocin receptor agonist WAY 267,464: a biotelemetry study in rats.</a> British Journal of Pharmacology. 171 (11), 2868-2887 (2014).</li><li>Kasahara, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+receptor+in+the+hypothalamus+is+sufficient+to+rescue+normal+thermoregulatory+function+in+male+oxytocin+receptor+knockout+mice.">Oxytocin receptor in the hypothalamus is sufficient to rescue normal thermoregulatory function in male oxytocin receptor knockout mice.</a> Endocrinology. 154 (11), 4305-4315 (2013).</li><li>Kasahara, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+the+oxytocin+receptor+expressed+in+the+rostral+medullary+raphe+in+thermoregulation+during+cold+conditions.">Role of the oxytocin receptor expressed in the rostral medullary raphe in thermoregulation during cold conditions.</a> Frontiers in Endocrinology. 6, 180 (2015).</li><li>Yuan, J., Zhang, R., Wu, R., Gu, Y., Lu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+oxytocin+to+rectify+metabolic+dysfunction+in+obese+mice+are+associated+with+increased+thermogenesis.">The effects of oxytocin to rectify metabolic dysfunction in obese mice are associated with increased thermogenesis.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 514, 110903 (2020).</li><li>Scholl, J. L., Afzal, A., Fox, L. C., Watt, M. J., Forster, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+differences+in+anxiety-like+behaviors+in+rats.">Sex differences in anxiety-like behaviors in rats.</a> Physiology &amp; Behavior. 211, 112670 (2019).</li></ol>

פרוטוקול בדיקת טמפרטורה זה מספק לשדה דרך למדוד ישירות את התרמוגנזה של שרירי השלד. זה קריטי מכיוון שהמחקר מתעמק בזיהוי המנגנונים העומדים בבסיס תרמוגנזה של שרירים33. השיטה מספקת שני פרוטוקולים חסכוניים למדידת תרמוגנזה של שרירי השלד בתנאים הקשריים ופרמקולוגיים. פרוטוקול זה מדג...

במסגרת המחקר המטבולי, בחינת התרמוגנזה של שרירי השלד היא אפיק חדש ומבטיח לחקר הומאוסטזיס של משקל הגוף. הספרות שפורסמה תומכת ברעיון שהתגובות התרמוגניות של אחת ממערכות האיברים הגדולות בגוף – שרירי השלד – מספקות דרך להגדלת ההוצאה האנרגטית והשפעות מטבוליות אחרות, ובכך למעשה מאזנות מחדש מערכות בתוך מחלות כמו השמנת יתר 1,2,3. אם השריר יכול להיחשב איבר תרמוגני, המחקרים חייבים להשתמש במתודולוגיה מעשית כדי לחקור שינויים תרמוגניים בתוך איבר זה. הרצון להבין את ההשפעה האנדותרמית של שרירי השלד והתועלת של מתודולוגיה זו לחקר תרמוגנזה של שרירים שאינם רועדים אינם ספציפיים למחקרים מטבוליים. דיסציפלינות הכוללות אבולוציה4, פיזיולוגיה השוואתית5 ואקופיזיולוגיה 6,7 הראו עניין רב בהבנת הדרכים שבהן תרמוגנזה של שרירים עשויה לתרום לאנדותרמיה וכיצד מנגנון זה מסתגל לסביבה. הפרוטוקול המוצג מספק את השיטות הקריטיות הדרושות כדי להתמודד עם שאלות אלה.
השיטה המסופקת יכולה לשמש בהערכת אפנון גירויים הקשריים ופרמקולוגיים של טמפרטורת השרירים, כולל הטכניקה הייחודית של מתן ריח טורף (PO) כדי לשנות את ההקשר כדי לשכפל איום טורף. דיווחים קודמים הדגימו את היכולת של PO לגרום במהירות לעלייה ניכרת בתרמוגנזה של השרירים8. יתר על כן, גירויים פרמקולוגיים יכולים גם לשנות את טמפרטורת השרירים. זה הוכח בהקשר של תרמוגנזה שרירית המושרה על ידי PO, שבה חסימה פרמקולוגית של קולטני β-אדרנרגיים היקפיים, באמצעות nadolol, עיכבה את היכולת של PO לגרום לתרמוגנזה של שרירים מבלי להשפיע באופן משמעותי על תרמוגנזה מתכווצת במהלך הליכוןהליכה 8. מתן מרכזי של אגוניסטים לקולטני מלנוקורטין בחולדות שימש גם להבחנה במנגנונים מוחיים המשנים תרמוגנזה 9,10.
להלן חקירה ראשונית של יכולתו של הנוירוהורמון אוקסיטוצין (Oxt) לשנות את התרמוגנזה של השרירים בעכברים. בדומה לאיום על טורפים, מפגשים חברתיים עם אוכלוסייה חד-מינית מעלים את טמפרטורת הגוף, תופעה המכונה היפרתרמיה חברתית11. בהתחשב ברלוונטיות של Oxt להתנהגות חברתית12, הועלתה השערה כי Oxt הוא מתווך של היפרתרמיה חברתית בעכברים. ואכן, אנטגוניסט של קולטן אוקסיטוצין מפחית היפרתרמיה חברתית בעכברים11, וגורי עכברים ללא Oxt מראים ליקויים בהיבטים התנהגותיים ופיזיולוגיים של ויסות תרמי, כולל תרמוגנזה13. בהתחשב בכך ש- Harshaw et al. (2021) לא מצאו ראיות התומכות בתרמוגנזה של רקמת שומן חום תלוית קולטן אדרנרגי β3 (BAT) עם היפרתרמיה חברתית11, הועלתה ההנחה כי היפרתרמיה חברתית עשויה להיות מונעת על ידי אינדוקציה של Oxt של תרמוגנזה של שרירים.
כדי למדוד תרמוגנזה של שרירי השלד, הפרוטוקול הבא משתמש בהשתלת משדרי IPTT-300 מתוכנתים מראש הסמוכים לשריר העניין בתוך עכבר או חולדה 8,10,14,15. משדרים אלה הם שבבים עטופים בזכוכית הנקראים באמצעות קוראי משדרים מתאימים. מעט מאוד מחקרים השתמשו בטכנולוגיה זו בתפקיד זה, אם כי מחקרים הצביעו על צורך בספציפיות שמספקת שיטה זו16,17. מחקרים קודמים הראו את האמינות של שיטה זו ומגוון דרכים שבהן ניתן להשתמש במשדרי טמפרטורה בהשוואה לשיטות בדיקת טמפרטורהאחרות 18 או בשילוב עם שיטות כירורגיות (למשל, cannulation19). עם זאת, מחקרים מסוג זה מסתמכים על מיקומים אסטרטגיים שונים כדי למדוד את טמפרטורת הגוף הכוללת 20,21,22 או רקמות מוגדרות כגון BAT23,24,25.
במקום למדוד טמפרטורה ממקומות אלה או תוך שימוש במדחומים אוזניים או רקטליים26, השיטה המתוארת כאן מספקת ספציפיות לשריר העניין. היכולת למקד אתר על ידי השתלה ישירה של משדרים הסמוכים לשרירים המעניינים יעילה יותר לבדיקת תרמוגנזה של שרירים באופן ספציפי. הוא מספק שדרה חדשה בנוסף לאלה המסופקים על ידי תרמומטריה אינפרא אדום פני השטח 27,28 או מדידות טמפרטורה עורית באמצעות thermocouple 29. יתר על כן, הנתונים המסופקים בשיטה זו מציעים מגוון אפיקי מחקר, תוך הימנעות מהצורך בציוד ותוכנות היי-טק גדולות ויקרות כגון תרמוגרפיה אינפרא אדומה30,31,32.
שיטה זו שימשה בהצלחה למדידת הטמפרטורה בקוואדריפס ובגסטרוקנמיוס, באופן חד צדדי או דו-צדדי. שיטה זו הייתה יעילה גם בשילוב עם ניתוחים סטריאוטקסיים14,15. בטווח של ~7-10 ס"מ מאיבר המשדר, קוראי משדרים ניידים (DAS-8027/DAS-7007R) משמשים לסריקה, מדידה והצגה של הטמפרטורה. מרחק זה היה קריטי ובעל ערך למחקרים קודמים 8,9,10 מכיוון שהוא ממזער גורמי עקה פוטנציאליים ומשתנים משני טמפרטורה כגון טיפול בבעלי חיים במהלך הליכי הניסוי. באמצעות טיימרים, ניתן להקליט ולאסוף את המדידות לאורך פרק זמן ללא אינטראקציה ישירה עם בעלי החיים.
כדי למזער עוד יותר את ההפרעה של עכברים במהלך הבדיקה, שיטה זו מתארת את ההרכבה והשימוש של הגבהות העשויות מצנרת PVC כדי לתת לנסיין גישה לתחתית הכלובים הביתיים במהלך הבדיקה. באמצעות ההגבהות יחד עם הקורא הדיגיטלי, ניתן לבצע מדידות טמפרטורה של איבר המשדר ללא כל אינטראקציה עם בעלי חיים לאחר מיקום הגירוי. בעלות מינימלית, ניתן להשתמש בשיטה זו בשילוב עם גירויים פרמקולוגיים והקשריים, מה שהופך אותה לנגישה למדי לחוקרים. בנוסף, ניתן להשתמש בשיטה זו עם מספר ניכר של נבדקים (~ 16 עכברים או ~ 12 חולדות) בכל פעם, ולחסוך זמן בהגדלת התפוקה הכוללת עבור כל פרויקט מחקר.
בשיטה זו מוצג מנגנון מעוצב להצגת ריחות לעכברים באמצעות כדורי תה מפלדת אל-חלד, המכונים מעתה "כדורי תה". למרות שכדורי התה האלה אידיאליים להכלת כל חומר ריח, במחקרים אלה, מגבות ששימשו כמצעים בכלוב במשך 2-3 שבועות לחמוסים, טורף טבעי של עכברים וחולדות, ממוקמות בתוך כל כדור תה טיפולי. כל מגבת חתוכה לריבועים בגודל 5X5 ס"מ. ציטוט זה חוזר על עצמו גם עם מגבות בקרה זהות ללא ריח. הצגת ריחות אלה ללא מחסום (כלומר, כדור תה) הובילה לכך שעכברים גורסים את הסיבים בתוך הכלובים שלהם, מה שמגביר את הפעילות הגופנית. התנהגות זו לא הייתה בולטת כל כך בחולדות. כדורי תה מספקים מעטפת מאווררת למגבת, ומעניקים גישה מלאה לריח תוך שמירה על הגנה במשך כל הניסוי הניסיוני. כדורי תה אלה ניתנים לחיטוי בהתאם לפרוטוקולי השימוש בבעלי חיים, מוכנים ומוצגים ישירות לאחר הניתוח כדי להתחיל להרגיל את בעלי החיים למבנה יחד עם גירוי הבקרה. עכברים יכולים לחיות עם ההעשרה הנוספת, מה שמקטין את הבולטות של הצגת הגירוי החריף.
הרגלה לנוכחות כדור התה היא רק היבט אחד של הרגלה שהוא קריטי לשיטה זו. פרוטוקול ההרגלה המתואר מורכב גם מחשיפה חוזרת ונשנית להליך הבדיקה כדי לנרמל את סביבת הבדיקה (כלומר, כוח אדם, תחבורה ותנועה למקום הבדיקה, חשיפה לגירוי). הרגלה ממושכת זו ממזערת תגובות ניואנסיות של בעלי החיים וממקדת את המדידות במשתנים התלויים הרצויים (למשל, גירויים פרמקולוגיים או הקשריים). הערכה קודמת של פרוטוקול זה זיהתה ארבעה ניסויים כמספר ההרגלים המינימלי הדרוש לפני בדיקת טמפרטורה בכלובים ביתיים בחולדות8. אם הניסויים מופרדים על ידי תקופות ארוכות (יותר מ 2-3 שבועות), בעלי החיים חייבים להיות רגילים שוב. עבור הרגלים חוזרים ונשנים, מספיק מינימום של ניסוי אחד עד שניים. עם זאת, אם בדיקות הטמפרטורה מופרדות על ידי התקפי זמן ממושכים יותר, ייתכן שיהיה צורך לחזור על ניסויים נוספים.
במאמץ המתמשך להרגיל עכברים וחולדות להליך הבדיקה, יש לכלול תקופת התאקלמות לפני הצגת הגירוי בכל ניסוי ניסיוני. זמן התאקלמות זה הוא קריטי לאיזון מחדש של הטמפרטורה והפעילות לאחר המעבר למקום הבדיקה. מכרסמים נוטים להיות עליות טמפרטורה חדות עקב טרנסלוקציה. התאקלמות צריכה להיות מורכבת ממינימום של 1 שעות ללא אינטראקציה מהנסיין ביום הבדיקה לפני כל תוספת של סוכן פרמקולוגי או גירויים הקשריים. זה הכרחי בכל יום של בדיקה.
בבדיקות הטמפרטורה של הכלוב הביתי, לעכברים יש את הטווח החופשי של הכלוב הביתי שלהם לשוטט בתגובה לגירוי שנבדק. זה יכול לגרום לשינויים משתנים בפעילות, להשפיע על הדיוק של קריאות הטמפרטורה, ולכן, ניתוח ההשפעות התרמוגניות של המשתנה הבלתי תלוי (למשל, גירוי פרמקולוגי או הקשרי). מתוך הכרה בשינויים הפוטנציאליים בטמפרטורה עקב רמת הפעילות, נכלל להלן פרוטוקול המתאר את השימוש בטמפרטורה במהלך הליכה על הליכון. הספרות שפורסמה מתארת את השימוש המוצלח בהליך זה בחולדות, והוא משמש כיום עם עכברים 8,10,14,15. הליכה על הליכון שומרת על מהירות קבועה של פעילות עבור הנבדק. במחקר זה, הליכונים משמשים אך ורק לשליטה ברמת הפעילות, ולכן הם מוגדרים למהירות הנמוכה ביותר הזמינה על ההליכון כדי לקדם הליכה לעכברים והגדרה נמוכה דומה לחולדות.
ההליך הבא מתואר למדידת הטמפרטורה של גסטרוקנמיוס חד-צדדי בעכברים והצגת ריח טורף. העיצוב יכול לשמש בשילוב עם חומרים פרמקולוגיים והוא ניתן להעברה לחולדות ולקבוצות שרירי שלד אחרות (כלומר, quadriceps) בעכברים. עבור חולדות, משדרים יכולים להיות ממוקמים gastrocnemius דו צדדית ברקמת שומן חום. בשל מגבלות גודל ומרחק, ניתן להשתמש במשדר אחד בלבד לכל עכבר. ניתן לבצע שינויים קלים (למשל, הסרת גירויים הקשריים) כדי להעריך תגובות תרמוגניות לסוכנים פרמקולוגיים.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1012M-2 Modular Enclosed Metabolic Treadmill for Mice, 2 Lanes w/ Shock</td>
			<td>Columbus Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1012R-2 Modular Enclosed Metabolic Treadmill for Rats, 2 Lanes w/ Shock</td>
			<td>Columbus Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1-1/4 in. Ratcheting PVC Cutter</td>
			<td>BrassCraft</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BD 309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine Swabs</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>19-898-945</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Booster Coil</td>
			<td>BioMedic Data Systems</td>
			<td></td>
			<td>Transponder Accessory</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric Clippers</td>
			<td>Andis</td>
			<td></td>
			<td>40 Ultraedge Clipper Blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexible Mirror Sheets</td>
			<td>Amazon</td>
			<td></td>
			<td>Self Adhesive Non Glass Mirror Tiles</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>89259-940</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Pad</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Induction Chamber (isoflurane)</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>VetFlo-0730</td>
			<td>3.0 L Low Cost Chambers for Traditional Vaporizers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketoprophen</td>
			<td>Med-Vet Intl.</td>
			<td>RXKETO-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic Strips</td>
			<td>Amazon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnets</td>
			<td>Amazon</td>
			<td></td>
			<td>DIYMAG Magnetic Hooks 40lbs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needles</td>
			<td>Med-Vet Intl.</td>
			<td>26400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neomycin/Polymixin/Bacitracin with Hydrocortisone Ophthalmic Ointment, 3.5 g</td>
			<td>Med-Vet Intl.</td>
			<td>RXNPB-HC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oasis Absorbable Suture</td>
			<td>Med-Vet Intl.</td>
			<td>MV-H821-V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Predator (Ferret) Odor Towels</td>
			<td>Marshall BioResources</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVC pipe</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reflex Wound Clip Remover</td>
			<td>CellPoint Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reflex Wound Clip, 7 mm (mouse)</td>
			<td>CellPoint Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reflex Wound Clip, 9 mm (rat)</td>
			<td>CellPoint Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Srerile Autoclip, 7 mm (mouse)</td>
			<td>CellPoint Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Wound Clip Applier (mouse)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Strainers Interval Seasonings Tea Infuser</td>
			<td>Amazon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Autoclip, 9 mm (rat)</td>
			<td>CellPoint Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Wound Clip Applier (rat)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Saline</td>
			<td>Med-Vet Intl.</td>
			<td>RX0.9NACL-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>08-951-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Sheets</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Towels (Control/Habituation)</td>
			<td>Amazon</td>
			<td></td>
			<td>100% Cotton Towels, white</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transponders</td>
			<td>BioMedic Data Systems</td>
			<td></td>
			<td>Model: IPTT-300</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transponders Reader</td>
			<td>BioMedic Data Systems</td>
			<td></td>
			<td>Model: DAS-8027-IUS/ DAS-7007R</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Versaclean</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>18-200-700</td>
			<td>liquid detergent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Webcol Alcohol Preps</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>22-246-073&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wedge pieces for PVC pipe</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring skeletal muscle thermogenesis in mice and rats

תרמוגנזה של שרירי השלד מספקת אפיק פוטנציאלי להבנה טובה יותר של הומאוסטזיס מטבולי והמנגנונים העומדים בבסיס הוצאת האנרגיה. באופן מפתיע, מעטות הראיות הקיימות כדי לקשר את המנגנונים העצביים, המיוצלולריים והמולקולריים של תרמוגנזה ישירות לשינויים הניתנים למדידה בטמפרטורת השרירים. מאמר זה מתאר שיטה שבה משדרי טמפרטורה משמשים לאחזור מדידות ישירות של טמפרטורת שרירי השלד של עכברים וחולדות.
משדרים מרוחקים מושתלים בניתוח בתוך שריר של עכברים וחולדות, ולבעלי החיים ניתן זמן להתאושש. לאחר מכן יש להרגיל שוב ושוב עכברים וחולדות לסביבת הבדיקה ולנוהל. שינויים בטמפרטורת השרירים נמדדים בתגובה לגירויים פרמקולוגיים או קונטקסטואליים בכלוב הביתי. ניתן למדוד את טמפרטורת השרירים גם במהלך פעילות גופנית שנקבעה (כלומר, הליכה על הליכון במהירות קבועה) כדי לקחת בחשבון את השינויים בפעילות כתורמים לשינויים בטמפרטורת השרירים המושרים על ידי גירויים אלה.
שיטה זו שימשה בהצלחה להבהרת מנגנונים העומדים בבסיס השליטה התרמוגנית בשרירים ברמת המוח, מערכת העצבים הסימפתטית ושרירי השלד. מסופקות הדגמות של הצלחה זו באמצעות ריח טורף (PO; ריח חמוס) כגירוי הקשרי וזריקות של אוקסיטוצין (Oxt) כגירוי פרמקולוגי, שבו ריח טורף משרה תרמוגנזה של שרירים, ו- Oxt מדכא את טמפרטורת השריר. לפיכך, מערכי נתונים אלה מציגים את היעילות של שיטה זו באיתור שינויים מהירים בטמפרטורת השרירים.

משדרים הושתלו באופן חד-צדדי בגסטרוקנמיוס הימני של עשרה עכברים בני 4-6 חודשים, מסוג בר (WT) שגודלו מזן SF1-Cre (Tg(Nr5a1-cre)7Lowl/J, זן #012462, C57BL/6J ורקעי FVB; נקבה N = 5; זכר N = 5). לאחר ההתאוששות, העכברים הורגלו להליך בדיקת טמפרטורה בכלוב ביתי שלא כלל גירוי הקשרי (למשל, PO). מדידות טמפרטורה באמצעות שרביט משדר נרשמו ב?...

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Skeletal Muscle Thermogenesis in Mice and Rats at JoVE.com

Measuring Skeletal Muscle Thermogenesis in Mice and Rats

עכברים וחולדות מושתלים בניתוח במשדרי טמפרטורה מרוחקים ולאחר מכן מורגלים לסביבת הבדיקה ולהליך. שינויים בטמפרטורת השרירים נמדדים בתגובה לגירויים פרמקולוגיים או קונטקסטואליים בכלוב הביתי או במהלך פעילות גופנית שנקבעה (כלומר, הליכה על הליכון במהירות קבועה).

מדידת תרמוגנזה של שרירי השלד בעכברים ובחולדות

Skeletal muscle thermogenesis provides a potential avenue for better understanding metabolic homeostasis and the mechanisms underlying energy expenditure. ...

פרוטוקול זה הוא משמעותי, שכן הוא מספק שיטה ישירה וחסכונית למדידת טמפרטורת שרירי השלד. יתר על כן, ניתן להשתמש בו בהקשרים שונים ותחת גירוי של סוכנים פרמקולוגיים. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא מספר בעלי החיים שניתן לבדוק בו זמנית.ההפרעה המינימלית לבעלי חיים המתוארת כאן, מונעת את הצורך בשיטות היי-טק כמו תרמוגרפיה אינפרא אדומה. אנשים עשויים להתקשות למדוד את הטמפרטורה של בעלי החיים בתוך הכלוב הביתי או על הליכונים בזמן תנועה. ניתן למתן זאת על ידי תרגול טכניקות מדידה במהלך ניסויי ההרגלה.התחילו בחימום המשדרים הסגורים בין הידיים עם הכפפות והקפידו לשמור על סטריליות, תוך כדי עבודה עם משדרים. מדוד את הטמפרטורה באמצעות סורק טמפרטורה ובדוק אם המשדר קורא את שינויי הטמפרטורה. לאחר הרדמת העכבר כמתואר בכתב היד, השתמש במספריים כירורגיים כדי לבצע חתך רדוד דרך העור על הגפה האחורית הימנית.מניחים את הקצה החד של משדר סטרילי מתוכנת מראש ולא מתוכנת לתוך החתך, במקביל לגסטרוקנמיוס. ודא שהבוכנה הירוקה פונה כלפי מעלה ונראית לעין. המשיכו לדחוף את המוליך המשדר לתוך החתך עד שפתח המוליך המשדר לא נראה עוד.סובבו את המוליך ב-180 מעלות, כך שהבוכנה הירוקה פונה כלפי מטה לכיוון איבר העכבר ואינה נראית עוד לנסיין. לאחר שהמוליך המשדר ממוקם בצמוד לגסטרוקנמיוס או סגור חלקית בו, דחפו את הבוכנה הירוקה, כדי לאפשר ללחץ של המוליך להנחות את ידו של החוקר הרחק מהעכבר. בעזרת מלקחיים, החזיקו את העור הפתוח יחד.מניחים קליפס פצע עם אוטוקליפס סטרילי, מכופפים במידת הצורך. השתמשו בתפרים נספגים לפני האוטוקליפס הסטרילי כדי לסגור את שכבת החיתולית. באמצעות קורא המשדר, בדוק את הטמפרטורה של שריר העכבר.לאחר הסרת העכבר מההרדמה, הניחו אותו בכלוב ביתי נקי על גבי כרית חימום וודאו כי הכלוב הביתי כולל כדור תה עם מגבת חסרת ריח כדי להתחיל בהרגלה. הקצה מיקום להגבהה בחדר הבדיקה, וכדי להימנע ממשתנים מבלבלים, הפרד את ההגבהים שנקבעו לקבלת גירויים הקשריים שונים בשני מטרים לפחות. באמצעות פסים מגנטיים, חברו יריעות כירורגיות לרוחב ההגבהה וצרו מחסום חזותי כדי למזער את תנודות הטמפרטורה כתוצאה מפעילות העכבר, בתגובה לתנועת הנסיין.הכינו כדורי תה עם מגבות שליטה וריח טורף. העבירו את בעל החיים לחדר הניסויים המוכן. מקם את בעל החיים במיקום שהוקצה מראש על ההגבהה והימנע משינוי מיקום ההגבהה בין נהלי ההרגלה להליכי הבדיקה.הסר את כדור הכלוב הביתי מהכלוב הביתי של העכבר. לשחזר את הכלוב עם בד או גיליון כירורגי ולאפשר לעכבר להתאקלם לחלל הבדיקה במשך שעה עד שעתיים. לאחר השלמת ההתאקלמות, השתמש בסורק כדי למדוד ולתעד את טמפרטורת הבסיס של הנושא.חשפו את הכלוב והניחו את כדור התה על רצפת הכלוב הביתי. החלף את מכסה הכלוב ואת כיסוי הבד. הפעל את שעון העצר ומדוד את הטמפרטורות של הנבדקים באותו סדר של מיקום כדורי תה.רשום את הטמפרטורות ואת זמן השעון של המדידות, בהתאם לנקודות הזמן הרצויות. הכינו את ההליכונים לבדיקה, וודאו שהזעזועים מתפקדים. ודאו שבעלי החיים משתמשים באותו הליכון להליכי הרגלה ובדיקה.הזיזו את העכבר לחדר הבדיקות, ואפשרו לו להתאקלם במשך שעה עד שעתיים בכלוב הביתי שלו. לפני הזזת העכבר להליכון, מדוד ורשום את טמפרטורת הבסיס שלו. למיקום והסרה קלים, הדביקו את מגבות הבקרה או ריח הטורף לתקרה או מתחת לקדמת ההליכון.הדרך את העכבר אל ההליכון שהוקצה. הפעילו את חגורת ההליכון ואת השוק, הפעילו את שעון העצר ובצעו מדידות של הנבדקים באותו סדר שבו הם הוצבו בהליכונים. רשום את הטמפרטורות ואת זמן השעון של המדידות, בהתאם לנקודות הזמן הרצויות.לאחר השלמת הבדיקה, כבו את הזעזוע וההליכון והחזירו את העכבר לכלוב הביתי שלו. נקו את ההליכון באמצעות חומר ניקוי נוזלי ומים והסירו כל שאריות ריח של טורף. ניסויי הרגלה חוזרים ונשנים הפחיתו באופן משמעותי את טמפרטורת השרירים של עכברים, והראו שהעכברים התרגלו לסביבת הבדיקה ולפרוטוקול.ניתוח המין המשולב של ניסוי 4 לא הראה הבדל משמעותי בין מדידות הטמפרטורה לפני המעבר לבין מדידות הטמפרטורה הבסיסיות, והדגים את היעילות של התאקלמות של שעה אחת להקשר הבדיקה. גירוי פרמקולוגי באמצעות אוקסיטוצין בעכברים הראה ירידה בטמפרטורת השרירים ביחס לנקודת ההתחלה עם ירידה מקסימלית לאחר 30 דקות. טמפרטורות השרירים נורמלו 60 דקות לאחר הזרקת האוקסיטוצין.עלייה מתמשכת בטמפרטורת השרירים נצפתה בחולדות ספראג דאולי, לאחר הסרת ריח טורף כגירויים הקשריים. חולדות ספראג דאולי הציגו עלייה חזקה בטמפרטורה בתגובה לריח חמוס, בהשוואה לריח בקרה. בנוכחות ריחות מרתיעים אחרים, ריח החמוס מייצר ושומר על שינוי תרמוגני חזק בהשוואה לכל התנאים האחרים.בעת ניסיון הליך זה, חשוב מאוד להרגיל את בעלי החיים לפרוטוקול הבדיקה ולקבוע שעה עד שעתיים של התאקלמות בכל יום של הניסוי.

Research

JoVE Journal

Behavior

The Successive Alleys Test of Anxiety in Mice and Rats

מבחן הסמטאות הרצוף של חרדה בעכברים וחולדות

The plus-maze was derived from the early work of Montgomery. He observed that rats tended to avoid the open arms of a maze, preferring the enclosed ones.  ...

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

פרוצדורה כדי לחקור את ההשפעה של הגבלת מזון ממושכת בהרואין מחפש אצל חולדות מתנזרות

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

Behavioral and Locomotor Measurements Using an Open Field Activity Monitoring System for Skeletal Muscle Diseases

מדידות התנהגות ושל תנועה באמצעות מערכת ניטור פעילות שדה פתוחה למחלות שריר שלד

The open field activity monitoring system comprehensively assesses locomotor and behavioral activity levels of mice. It is a useful tool for assessing ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

נוהל ללב התחדשות מושרה הקשר של התנהגות אלכוהול מחפשי מיזוג הפבלובית בחולדות

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

Measuring Attentional Biases for Threat in Children and Adults

מדידת הטיות קשב לאיום אצל ילדים ומבוגרים

Investigators have long been interested in the human propensity for the rapid detection of threatening stimuli. However, until recently, research in this ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

מועצת החור השתנה - מדידת התנהגות, קוגניציה ואינטראקציה חברתית בעכברים וחולדות

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Electrophysiological Motor Unit Number Estimation (MUNE) Measuring Compound Muscle Action Potential (CMAP) in Mouse Hindlimb Muscles

Electrophysiological Motor Unit Number Estimation MUNE Measuring Compound Muscle Action Potential CMAP in Mouse Hindlimb Muscles

אלקטרו מנוע יחידת מספר הערכה (mune) מדידת פוטנציאל פעולה שרירים מתחם (מבנה מפת צבעים) בשרירי העכבר Hindlimb

Compound muscle action potential (CMAP) and motor unit number estimation (MUNE) are electrophysiological techniques that can be used to monitor the ...

Pavlovian Conditioned Approach Training in Rats

הדרכת גישה אלפה הפבלובית בחולדות

Cues that are contingently paired with unconditioned, rewarding stimuli can acquire rewarding properties themselves through a process known as the ...

The Rodent Psychomotor Vigilance Test (rPVT): A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

The Rodent Psychomotor Vigilance Test rPVT: A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

מבחן הערנות Psychomotor המכרסם (rPVT): שיטה להערכת ביצועי נוירו-התנהגותיות אצל חולדות ועכברים

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article ...

Manipulation of Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) and Sleep in Rats and Mice by Acupuncture

Manipulation of Epileptiform Electrocorticograms ECoGs and Sleep in Rats and Mice by Acupuncture

מניפולציה של Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) ולישון חולדות ועכברים ידי דיקור

Ancient Chinese literature has documented that acupuncture possesses efficient therapeutic effects on epilepsy and insomnia. There is, however, little ...