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•
07:02 min
July 1st, 2022
DOI :
10.3791/64269-v
Chapters
0:05
Introduction
0:36
Preparation of Cytosolic Extracts and Sucrose Cushions
2:09
Polysome Purification
3:05
RNA Extraction, Quality Control, and Precipitation
5:24
Results: Quality Assessment of the TOTAL and PAR Fractions
6:24
Conclusion
Transcript
このプロトコルは、私たちの知る限り、ダイズ共生団塊からのキネティックポリソーム精製のための新しい遠心分離機ベースの金属を記載した最初のプロトコルであるため、重要です。この技術の大きな利点は、RNA-Seqと組み合わせて、共生結節などの複雑な組織に組織化された関係の研究を可能にすることです。はじめに、計量皿に約0.2グラムの無傷の結節を秤量し、それらを予冷した2ミリリットルのチューブに移します。
次に、1.2ミリリットルのポリソーム抽出バッファーを加え、サンプルを2分間解凍し、結
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Summary
このプロトコルは、無傷のダイズ結節からの真核生物ポリソーム精製のための方法を記載する。シーケンシング後、遺伝子発現解析の標準パイプラインを使用して、トランスクリプトームおよびトランスラトームレベルで発現差のある遺伝子を同定できます。
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