Name: preparation of a non-cardiomyocyte cell suspension for single-cell rna sequencing from a post-myocardial infarction adult mouse heart
Uploaded: 2023-02-03T12:40:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of a Non-Cardiomyocyte Cell Suspension for Single-Cell RNA Sequencing from a Post-Myocardial Infarction Adult Mouse Heart at JoVE.com

Эта работа была поддержана Фондами естественных наук провинции Чжэцзян (LQ22H020010).

Все эксперименты проводились в соответствии с руководящими принципами по уходу и использованию лабораторных животных в Чжэцзянском университете и были одобрены Консультативным комитетом по животным Чжэцзянского университета.
1. Операция по перевязке левой передне...

<ol>
	<li>Reed, G. W., Rossi, J. E., Cannon, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction.">Acute myocardial infarction.</a> Lancet. 389 (10065), 197-210 (2017).</li><li>Gu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incident+heart+failure+in+patients+with+coronary+artery+disease+undergoing+percutaneous+coronary+intervention.">Incident heart failure in patients with coronary artery disease undergoing percutaneous coronary intervention.</a> Frontiers in Cardiovascular Medicine. 8, 727727 (2021).</li><li>Frangogiannis, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+inflammatory+response+in+myocardial+injury,+repair,+and+remodelling.">The inflammatory response in myocardial injury, repair, and remodelling.</a> Nature Reviews. Cardiology. 11 (5), 255-265 (2014).</li><li>Kain, V., Prabhu, S. D., Halade, G. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+revisited:+Inflammation+versus+resolution+of+inflammation+following+myocardial+infarction.">Inflammation revisited: Inflammation versus resolution of inflammation following myocardial infarction.</a> Basic Research in Cardiology. 109 (6), 444 (2014).</li><li>Tzahor, E., Dimmeler, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+coalition+to+heal-the+impact+of+the+cardiac+microenvironment.">A coalition to heal-the impact of the cardiac microenvironment.</a> Science. 377 (6610), 4443 (2022).</li><li>Song, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+repair+by+reprogramming+non-myocytes+with+cardiac+transcription+factors.">Heart repair by reprogramming non-myocytes with cardiac transcription factors.</a> Nature. 485 (7400), 599-604 (2012).</li><li>Jaitin, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Massively+parallel+single-cell+RNA-seq+for+marker-free+decomposition+of+tissues+into+cell+types.">Massively parallel single-cell RNA-seq for marker-free decomposition of tissues into cell types.</a> Science. 343 (6172), 776-779 (2014).</li><li>Massaia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+cell+gene+expression+to+understand+the+dynamic+architecture+of+the+heart.">Single cell gene expression to understand the dynamic architecture of the heart.</a> Frontiers in Cardiovascular Medicine. 5, 167 (2018).</li><li>Papalexi, E., Satija, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+RNA+sequencing+to+explore+immune+cell+heterogeneity.">Single-cell RNA sequencing to explore immune cell heterogeneity.</a> Nature Reviews. Immunology. 18 (1), 35-45 (2018).</li><li>Jin, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+RNA+sequencing+reveals+the+temporal+diversity+and+dynamics+of+cardiac+immunity+after+myocardial+infarction.">Single-cell RNA sequencing reveals the temporal diversity and dynamics of cardiac immunity after myocardial infarction.</a> Small Methods. 6 (3), 2100752 (2022).</li><li>Tombor, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+cell+sequencing+reveals+endothelial+plasticity+with+transient+mesenchymal+activation+after+myocardial+infarction.">Single cell sequencing reveals endothelial plasticity with transient mesenchymal activation after myocardial infarction.</a> Nature Communications. 12 (1), 681 (2021).</li><li>Virag, J. A., Lust, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+artery+ligation+and+intramyocardial+injection+in+a+murine+model+of+infarction.">Coronary artery ligation and intramyocardial injection in a murine model of infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (52), e2581 (2011).</li><li>Reichard, A., Asosingh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Best+practices+for+preparing+a+single+cell+suspension+from+solid+tissues+for+flow+cytometry.">Best practices for preparing a single cell suspension from solid tissues for flow cytometry.</a> Cytometry Part A. 95 (2), 219-226 (2018).</li><li>Gladka, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+sequencing+of+the+healthy+and+diseased+heart+reveals+cytoskeleton-associated+protein+4+as+a+new+modulator+of+fibroblasts+activation.">Single-cell sequencing of the healthy and diseased heart reveals cytoskeleton-associated protein 4 as a new modulator of fibroblasts activation.</a> Circulation. 138 (2), 166-180 (2018).</li><li>Garcia-Flores, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+single-cell+suspensions+from+the+human+placenta.">Preparation of single-cell suspensions from the human placenta.</a> Nature Protocols. , (2022).</li><li>Guez-Barber, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FACS+purification+of+immunolabeled+cell+types+from+adult+rat+brain.">FACS purification of immunolabeled cell types from adult rat brain.</a> Journal of Neuroscience Methods. 203 (1), 10-18 (2012).</li><li>Rheinl&#228;ndera, A., Schravenab, B., Bommhardt, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD45+in+human+physiology+and+clinical+medicine.">CD45 in human physiology and clinical medicine.</a> Immunology Letters. 196, 22-32 (2018).</li><li>Hua, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+RNA+sequencing+to+dissect+the+immunological+network+of+autoimmune+myocarditis.">Single-cell RNA sequencing to dissect the immunological network of autoimmune myocarditis.</a> Circulation. 142 (4), 384-400 (2020).</li><li>Grindberg, R. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA-sequencing+from+single+nuclei.">RNA-sequencing from single nuclei.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (49), 19802-19807 (2013).</li><li>Vanden Brink, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+sequencing+reveals+dissociation-induced+gene+expression+in+tissue+subpopulations.">Single-cell sequencing reveals dissociation-induced gene expression in tissue subpopulations.</a> Nature Methods. 14, 935-936 (2017).</li></ol>

Эта статья была направлена на описание протокола выделения единичных некардиомиоцитов из сердца мыши после ИМ. Протокол может быть применен для выделения различных типов клеток в микроокружении после инфаркта миокарда с высоким качеством, включая иммунные клетки, эндотелиальные кле?...

Инфаркт миокарда (ИМ) является одним из наиболее распространенных сердечно-сосудистых заболеваний, и смертность от него растет во всеммире1. Инфаркт миокарда вызван недостаточным кровоснабжением окружающего миокарда, что может быть результатом закупорки коронарной артерии, возникающей при разрыве атеросклеротической бляшки. Хотя чрескожное коронарное вмешательство (ЧКВ) снизило показатели смертности пациентов с острым инфарктом миокарда, высокая распространенность сердечной недостаточности после инфаркта миокарда остается проблемой2. Ключевой патофизиологией, лежащей в основе сердечной недостаточности после инфаркта миокарда, является компенсаторная реакция организма на сердечные повреждения, которая включает замену мертвой сердечной мышцы несократительными фиброзными рубцами. Эти адаптивные реакции в значительной степени зависят от местного воспаления, опосредованного взаимодействиями между несколькими типами клеток и клетками сердечной ткани, и это воспаление в настоящее время рассматривается как потенциальная терапевтическая мишень для уменьшения образования фиброзных рубцов и, таким образом, защиты от сердечной недостаточности после инфарктамиокарда 3,4. Интересно, что микроокружение в месте инфаркта испытывает зависящий от времени переход в инфильтрационных типах клеток и функционирует на разных стадиях ИМ 1,5. Многие исследования показали, что некардиомиоциты (например, иммунные клетки, фибробласты и эндотелиальные клетки) играют центральную роль в воспалении после инфаркта миокарда и восстановлении тканей 5,6. В последние годы секвенирование отдельных клеток широко используется в качестве мощного инструмента для выяснения вовлеченности и функций некардиомиоцитов в микросреде после инфарктамиокарда 7,8. Это дает представление о патофизиологии травмы и восстановления после инфаркта миокарда, а также о разработке потенциальных методов лечения сердечной недостаточности после инфаркта миокарда.
Высокопроизводительное секвенирование РНК (RNA-Seq) — это метод, используемый для подробного изучения целых транскриптомов с использованием секвенирования следующего поколения (NGS)7,8,9. В последнее время разработка scRNA-Seq произвела революцию в области биомедицинских исследований. По сравнению с обычным массовым секвенированием, scRNA-Seq анализирует профили экспрессии генов и гетерогенность транскрипции на уровне отдельных клеток 7,8. Этот метод значительно способствует исследованию клеточной патофизиологии ИМ 9,10 путем идентификации различных типов циркулирующих клеток в микроокружении после ИМ и выявления взаимодействия между кардиомиоцитами и некардиомиоцитами. Эти результаты также способствуют выявлению новых терапевтических целей для сердечной недостаточности после инфаркта миокарда. В целом, эксперимент после инфаркта миокарда на основе scRNA-seq включает три основных раздела: (1) создание модели животных после инфаркта миокарда; (2) приготовление клеточной суспензии; и (3) секвенирование образцов и анализ данных. Примечательно, что приготовление клеточной суспензии является наиболее важным этапом подготовки эксперимента scRNA-Seq, поскольку качество клеточной суспензии определяет точность результатов.
Этот протокол предназначен для извлечения суспензии некардиомиоцитарных клеток из сердечной ткани после инфаркта миокарда; Важно отметить, что включены конкретные детали для поддержания жизнеспособности и разрешения клеток. Между тем, оборудование, используемое в этом протоколе, такое как хирургические наборы для мышей, аппараты искусственной вентиляции легких грызунов и центрифуги, можно найти в большинстве экспериментальных центров на животных и биомедицинских лабораторий, и, таким образом, стоимость эксперимента по этому протоколу относительно низкая. Кроме того, если рассматривать временные моменты и места инфаркта в качестве переменных, этот протокол может быть применен для моделирования широкого спектра клинических сценариев, особенно для осложнений после ИМ.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acridine Orange / Propidium Iodide Stain</td>
			<td>Logos biosystems</td>
			<td>F23001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated&#160;Cell&#160;Counter</td>
			<td>Logos biosystems</td>
			<td>L20001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Servicebio</td>
			<td>G5001</td>
			<td>Cytoprotective effect</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Counting Slides</td>
			<td>Logos biosystems</td>
			<td>L12001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase Type IV</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17104019</td>
			<td>Digestive enzymes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispase II</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D4693</td>
			<td>Digestive enzymes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dnase I</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11284932001</td>
			<td>Prevent cell clumping</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon&#160;40&#956;m Cell Strainer</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352340</td>
			<td>Remove cell clumps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon&#160;70&#956;m Cell Strainer</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352350</td>
			<td>Remove undigested tissue and clumps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow Cell Sorter</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>B25982</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodophor</td>
			<td>OU QING SI</td>
			<td>10054963976859</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holder</td>
			<td>FST</td>
			<td>12061-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic Forceps</td>
			<td>RWD</td>
			<td>F14012-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic Scissors</td>
			<td>RWD</td>
			<td>S11036-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline&#160;</td>
			<td>Servicebio</td>
			<td>G4202-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RBC Lysis Buffer</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>C3702-120ml</td>
			<td>Remove red blood cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rib Retractor</td>
			<td>FST</td>
			<td>17005-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Ventilator</td>
			<td>Harvard</td>
			<td>730043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 Medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11875093</td>
			<td>Solvent&#160;solution of enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Scissor</td>
			<td>RWD</td>
			<td>S14014-10</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of a non-cardiomyocyte cell suspension for single-cell rna sequencing from a post-myocardial infarction adult mouse heart

Инфаркт миокарда (ИМ) является одним из наиболее распространенных сердечно-сосудистых заболеваний с ростом смертности во всем мире. Некардиомиоциты составляют более половины всей популяции сердечных клеток, и они способствуют адаптивной компенсации при повреждении миокарда, включая воспалительные реакции, восстановление тканей и образование рубцов. Для изучения микроокружения сердца после инфаркта миокарда широко используется секвенирование одноклеточной РНК (scRNA-seq) для идентификации различных типов сердечных клеток и межклеточных коммуникаций. Среди процедур подготовки образца scRNA-seq приготовление клеточной суспензии является одним из наиболее важных этапов, поскольку жизнеспособность клеток может повлиять на качество результатов scRNA-seq. Поэтому мы разработали экспериментальный протокол для получения суспензии некардиомиоцитарных клеток из сердец мышей после инфаркта миокарда с дополнительным акцентом на улучшение жизнеспособности клеток путем выбора мягких пищеварительных ферментов, контроля времени пищеварения и применения флуоресцентно-активированной сортировки клеток (FACS). Наконец, мы выделили CD45+ клетки из суспензии некардиомиоцитарных клеток, полученной по этому протоколу, а затем провели секвенирование скРНК.

Одноклеточная суспензия с высокой жизнеспособностью была получена путем реализации раздела 2 этого протокола. Тем не менее, фрагменты клеток все еще можно наблюдать (рис. 1А); следовательно, для дальнейшего улучшения качества была выполнена сортировка клеток, активиров?...

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of a Non-Cardiomyocyte Cell Suspension for Single-Cell RNA Sequencing from a Post-Myocardial Infarction Adult Mouse Heart at JoVE.com

Preparation of a Non-Cardiomyocyte Cell Suspension for Single-Cell RNA Sequencing from a Post-Myocardial Infarction Adult Mouse Heart

Здесь мы описываем протокол для выделения достаточного количества единичных некардиомиоцитов с высокой жизнеспособностью из сердца мыши после инфаркта миокарда (ИМ). Это может быть использовано для последующего секвенирования отдельных клеток, анализа проточной цитометрии и первичной клеточной культуры.

Получение некардиомиоцитарной клеточной суспензии для секвенирования одноклеточной РНК из сердца взрослой мыши после инфаркта миокарда

Myocardial infarction (MI) is one of the most common cardiovascular diseases, with increasing mortality worldwide. Non-cardiomyocytes account for more ...

Наш протокол обеспечивает как жизнеспособность клеток, так и эффективность изоляции одноклеточной суспензии при относительно низких затратах. Относительно низкие затраты и требования к лабораторному оборудованию являются основными преимуществами этой методики. Секвенирование отдельных клеток выявляет гетерогенность некардиомиоцитов в патофизиологии сердца, а также дает идеи для фундаментальных и клинических исследований сердечных заболеваний.Этот протокол может быть использован в исследованиях сердечно-сосудистой среды после инфаркта миокарда, такой как участие иммунных клеток. При первом приготовлении я предлагаю обратить особое внимание на образец пепсина и время переваривания. После того, как буферы и растворы будут приготовлены, как описано в рукописи, поместите на хирургический стол усыпленную мышь, перенесшую инфаркт миокарда двумя неделями ранее, в лежачем положении.Зафиксируйте его задние конечности с помощью скотча. Чтобы иссечь сердце, опрыскайте тело 70% этанолом. Сделайте вертикальный разрез через кожу живота и мышцы, избегая печени.Не прокалывая сердце, осторожно вскройте грудную клетку и протрите левый желудочек предварительно охлажденным раствором PBS до тех пор, пока перфузионная жидкость не станет бесцветной. С помощью щипцов аккуратно приподнимите сердце и офтальмологическими ножницами срежьте лишние ткани, прикрепленные к его внешней стороне. Поместите сердце в один миллилитр предварительно охлажденного PBS в микроцентрифужную пробирку объемом 1,5 миллилитра.Перенесите сердце в колодец из 24-луночной пластины, помещенной на лед. Запипейте 150 микролитров сердечного диссоциативного буфера в лунку и разрежьте сердце на кусочки размером в один миллиметр с помощью ножниц. Переведите измельченную сердечную ткань в центрифужную пробирку объемом 15 миллилитров, содержащую пять миллилитров буфера диссоциации тканей.Поместите трубку в термостатический возвратно-поступательный шейкер. Пипетите суспензию вверх и вниз 10 раз каждые 20 минут. Чтобы удалить комки и непереваренную ткань, отфильтруйте клеточную суспензию через 70-микрометровый клеточный фильтр, используя 25 миллилитров буфера для промывки клеток.Промойте центрифужную пробирку и сетчатый фильтр. Затем отфильтруйте клеточную суспензию через 40-микрометровый клеточный фильтр, чтобы удалить дополнительные клеточные скопления. Центрифугируйте отфильтрованную клеточную суспензию при 300 х г в течение пяти минут при четырех градусах Цельсия.Ресуспендировать образец клетки в пяти объемах буфера для лизиса эритроцитов и инкубировать в течение пяти минут при комнатной температуре. Теперь добавьте четыре объема буфера для промывки клеток в клеточную суспензию и центрифугу, как показано ранее. После удаления надосадочной жидкости ресуспендируйте клетки в 10 миллилитрах буфера для промывки клеток и снова центрифуги.В конце центрифугирования выбросьте надосадочную жидкость и ресуспендируйте гранулу в одном миллилитре буфера для промывки клеток. Возьмите 18 микролитров суспензии в другую центрифужную пробирку и добавьте два микролитра раствора для окрашивания йодида пропидиума акридина оранжевого. Добавьте 10 микролитров этого окрашенного раствора в предметное стекло счетной камеры.Оцените количество клеток и жизнеспособность с помощью автоматического счетчика ячеек. Фрагменты клеток наблюдались в одноклеточной сердечной подвеске. Сортировка клеток, активированная флуоресценцией, эффективно уменьшала долю клеточных фрагментов и слипания клеток, что приводило к уменьшению среднего размера клеток.Секвенирование РНК доказало очевидное разделение семи типов иммунных клеток, о чем свидетельствует неконтролируемая кластеризация и уменьшенное Т-распределенное стохастическое встраивание соседей. Каждая иммунная клетка показала высокую экспрессию классических маркеров. Сердечная ткань должна быть разрезана достаточно мелко, чтобы избежать неполного пищеварения, что приводит к большому количеству клеточных комков в клеточной суспензии.Одноклеточная суспензия, полученная по этому протоколу, может быть дополнительно применена в проточном анализе первичной клеточной культуры. Этот протокол полезен для исследований микроокружения инфекции миокарда, что может помочь исследователям выйти за рамки сердечных тканей и рассматривать инфекцию миокарда как систематическую проблему.

Research

JoVE Journal

Medicine

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Инфаркт миокарда и функциональная оценка результат в Свиней

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

A Modified Method for Heterotopic Mouse Heart Transplantion

Модифицированный метод для гетеротопической Mouse сердца Transplantion

Mice are often used as heart transplant donors and recipients in studies of transplant immunology due to the wide range of transgenic mice and reagents ...

An Isolated Working Heart System for Large Animal Models

Изолированная система работы сердца для крупных животных моделях

Since its introduction in the late 19th century, the Langendorff isolated heart perfusion apparatus, and the subsequent development of the working heart ...

Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure

Постоянный Лигирование артерии передней нисходящей коронарной у мышей: Модель, перенесших инфаркт миокарда ремоделирования и сердечной недостаточности

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It ...

Unbiased Deep Sequencing of RNA Viruses from Clinical Samples

Объективное Deep секвенирование РНК вирусов из клинических образцов

Here we outline a next-generation RNA sequencing protocol that enables de novo assemblies and intra-host variant calls of viral genomes collected from ...

An Efficient Sieving Method to Isolate Intact Glomeruli from Adult Rat Kidney

Эффективный метод просеивания изолировать нетронутыми клубочков из почек взрослых крыс

Preservation of glomerular structure and function is pivotal in the prevention of glomerulonephritis, a category of kidney disease characterized by ...

Isolation of Atrial Myocytes from Adult Mice

Изоляция предсердий миоцитов от взрослых мышей

The electrophysiological properties of atrial myocytes importantly affect overall cardiac function. Alterations in the underlying ionic currents ...

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

Криотравма модель для изучения инфаркта миокарда в мыши

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

Establishing a Swine Model of Post-myocardial Infarction Heart Failure for Stem Cell Treatment

Создание свиной модели пост-миокарда инфаркт сердечной недостаточности для лечения стволовых клеток

Although advances have been achieved in the treatment of heart failure (HF) following myocardial infarction (MI), HF following MI remains one of the major ...

Post-Myocardial Infarction Heart Failure in Closed-chest Coronary Occlusion/Reperfusion Model in G&#246;ttingen Minipigs and Landrace Pigs

Пост-миокарда инфаркт сердечной недостаточности в закрытой груди коронарной окклюзии / reperfusion Модель в Гёттинген Minipigs и Landrace свиней

The development of heart failure is the most powerful predictor of long-term mortality in patients surviving acute myocardial infarction (MI). There is an ...