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1.7K Views
•
10:26 min
October 21st, 2022
DOI :
10.3791/64315-v
Chapters
0:04
Introduction
1:13
Preparation of Cell Suspension
3:24
Live-Dead Analysis of Tumor Spheroids
4:05
Disintegration and Cell Suspension of Tumor Spheroids
5:02
Cancer-Associated Fibroblast (CAF) Isolation Through Microbeads
6:19
Flow Cytometry-Based Analysis of ACTA2 Expression in Isolated CAFs
7:28
Results: Assessment of Mitochondrial Health in Cancer-Associated Fibroblasts
9:30
Conclusion
Transcript
このプロトコルは、癌関連線維芽細胞またはCAFの活性化における腫瘍微小環境の重要性を強調しています。表現型の特徴を研究するための優れたin vitroモデルである可能性があります。CAF生物学における主な制約は、原発腫瘍生検サンプルからのCAFの入手可能性が限られていることにあります。
したがって、この手法は、CAF生物学のさまざまな側面を研究するために使用できます。この研究は、腫瘍予後不良につながるCAF活性化に関連する異常な交差産生とミトコンドリア機能障害を示しています。こ
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Summary
多細胞3D腫瘍スフェロイドを肺腺癌細胞、線維芽細胞、および単球を用いて調製し、続いてこれらのスフェロイドから癌関連線維芽細胞(CAF)を単離した。単離されたCAFを正常な線維芽細胞と比較し、ミトコンドリアの膜貫通電位、活性酸素種、および酵素活性を研究することにより、ミトコンドリアの健康状態を評価しました。
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