Name: surgical technique for superior cervical ganglionectomy in a murine model
Uploaded: 2022-12-02T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Surgical Technique for Superior Cervical Ganglionectomy in a Murine Model at JoVE.com

Q. W. wurde von NIH T32CA009685 unterstützt. R. J. W. wurde von NIH R01CA219534 unterstützt. Die Core Facilities des Memorial Sloan Kettering Cancer Center wurden von NIH P30CA008748 unterstützt.

Die hier beschriebenen Tierbehandlungen wurden vom Institutional Animal Care and Use Committee am Memorial Sloan Kettering Cancer Center genehmigt. Hier wurden acht Wochen alte männliche und weibliche NSG-Mäuse verwendet. Die Tiere stammten aus einer kommerziellen Quelle (siehe Materialtabelle). Die Instrumente werden sterilisiert, die chirurgische Arbeitsfläche wird desinfiziert, die Hautoberfläche des Tieres wird desinfiziert und der Chirurg trägt während des gesamten Eingriffs sterile Handschuhe...

<ol>
	<li>Magnon, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomic+nerve+development+contributes+to+prostate+cancer+progression.">Autonomic nerve development contributes to prostate cancer progression.</a> Science. 341 (6142), 1236361 (2013).</li><li>Zhao, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Denervation+suppresses+gastric+tumorigenesis.">Denervation suppresses gastric tumorigenesis.</a> Science Translational Medicine. 6 (250), 115 (2014).</li><li>Zahalka, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenergic+nerves+activate+an+angio-metabolic+switch+in+prostate+cancer.">Adrenergic nerves activate an angio-metabolic switch in prostate cancer.</a> Science. 358 (6361), 321-326 (2017).</li><li>Amit, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+p53+drives+neuron+reprogramming+in+head+and+neck+cancer.">Loss of p53 drives neuron reprogramming in head and neck cancer.</a> Nature. 578 (7795), 449-454 (2020).</li><li>Renz, B. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholinergic+signaling+via+muscarinic+receptors+directly+and+indirectly+suppresses+pancreatic+tumorigenesis+and+cancer+stemness.">Cholinergic signaling via muscarinic receptors directly and indirectly suppresses pancreatic tumorigenesis and cancer stemness.</a> Cancer Discovery. 8 (11), 1458-1473 (2018).</li><li>Lucido, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innervation+of+cervical+carcinoma+is+mediated+by+cancer-derived+exosomes.">Innervation of cervical carcinoma is mediated by cancer-derived exosomes.</a> Gynecologic Oncology. 154 (1), 228-235 (2019).</li><li>Peterson, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basal+cell+carcinoma+preferentially+arises+from+stem+cells+within+hair+follicle+and+mechanosensory+niches.">Basal cell carcinoma preferentially arises from stem cells within hair follicle and mechanosensory niches.</a> Cell Stem Cell. 16 (4), 400-412 (2015).</li><li>Maronde, E., Stehle, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mammalian+pineal+gland:+Known+facts,+unknown+facets.">The mammalian pineal gland: Known facts, unknown facets.</a> Trends in Endocrinology &amp; Metabolism. 18 (4), 142-149 (2007).</li><li>Yamazaki, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ontogeny+of+circadian+organization+in+the+rat.">Ontogeny of circadian organization in the rat.</a> Journal of Biological Rhythms. 24 (1), 55-63 (2009).</li><li>Huang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=S100++cells:+A+new+neuro-immune+cross-talkers+in+lymph+organs.">S100+ cells: A new neuro-immune cross-talkers in lymph organs.</a> Scientific Reports. 3 (1), 1114 (2013).</li><li>Dieguez, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melatonin+protects+the+retina+from+experimental+nonexudative+age-related+macular+degeneration+in+mice.">Melatonin protects the retina from experimental nonexudative age-related macular degeneration in mice.</a> Journal of Pineal Research. 68 (4), 12643 (2020).</li><li>Liu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilateral+superior+cervical+ganglionectomy+attenuates+the+progression+of+&#946;-aminopropionitrile-induced+aortic+dissection+in+rats.">Bilateral superior cervical ganglionectomy attenuates the progression of &#946;-aminopropionitrile-induced aortic dissection in rats.</a> Life Sciences. 193, 200-206 (2018).</li><li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+superior+cervical+sympathetic+ganglion+in+ischemia+reperfusion-induced+acute+kidney+injury+in+rats.">The role of the superior cervical sympathetic ganglion in ischemia reperfusion-induced acute kidney injury in rats.</a> Frontiers in Medicine. 9, 792000 (2022).</li><li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superior+cervical+ganglionectomy+alters+gut+microbiota+in+rats.">Superior cervical ganglionectomy alters gut microbiota in rats.</a> American Journal of Translational Research. 14 (3), 2037-2050 (2022).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#946;-Adrenergic+signaling+induces+Notch-mediated+salivary+gland+progenitor+cell+control.">&#946;-Adrenergic signaling induces Notch-mediated salivary gland progenitor cell control.</a> Stem Cell Reports. 16 (11), 2813-2824 (2021).</li><li>Boyd, A., Aragon, I. V., Abou Saleh, L., Southers, D., Richter, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cAMP-phosphodiesterase+4+(PDE4)+controls+&#946;-adrenoceptor-+and+CFTR-dependent+saliva+secretion+in+mice.">The cAMP-phosphodiesterase 4 (PDE4) controls &#946;-adrenoceptor- and CFTR-dependent saliva secretion in mice.</a> Biochemical Journal. 478 (10), 1891-1906 (2021).</li><li>Smith, B., Butler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+long-term+propranolol+on+the+salivary+glands+and+intestinal+serosa+of+the+mouse.">The effects of long-term propranolol on the salivary glands and intestinal serosa of the mouse.</a> The Journal of Pathology. 124 (4), 185-187 (1978).</li><li>Sucharov, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#946;-Adrenergic+receptor+antagonism+in+mice:+A+model+for+pediatric+heart+disease.">&#946;-Adrenergic receptor antagonism in mice: A model for pediatric heart disease.</a> Journal of Applied Physiology. 115 (7), 979-987 (2013).</li><li>Ding, C., Walcott, B., Keyser, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+alpha1-+and+beta1-adrenergic+modulation+of+lacrimal+gland+function+in+the+mouse.">The alpha1- and beta1-adrenergic modulation of lacrimal gland function in the mouse.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 48 (4), 1504-1510 (2007).</li><li>Grisanti, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prior+&#946;-blocker+treatment+decreases+leukocyte+responsiveness+to+injury.">Prior &#946;-blocker treatment decreases leukocyte responsiveness to injury.</a> JCI Insight. 5 (9), 99485 (2019).</li><li>Alito, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomic+nervous+system+regulation+of+murine+immune+responses+as+assessed+by+local+surgical+sympathetic+and+parasympathetic+denervation.">Autonomic nervous system regulation of murine immune responses as assessed by local surgical sympathetic and parasympathetic denervation.</a> Acta Physiologica, Pharmacologica et Therapeutica Latinoamericana. 37 (3), 305-319 (1987).</li><li>Yun, H., Lathrop, K. L., Hendricks, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+central+role+for+sympathetic+nerves+in+herpes+stromal+keratitis+in+mice.">A central role for sympathetic nerves in herpes stromal keratitis in mice.</a> Ophthalmology &amp; Visual Science. 57 (4), 1749-1756 (2016).</li><li>Haug, S. R., Heyeraas, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+sympathectomy+on+experimentally+induced+pulpal+inflammation+and+periapical+lesions+in+rats.">Effects of sympathectomy on experimentally induced pulpal inflammation and periapical lesions in rats.</a> Neuroscience. 120 (3), 827-836 (2003).</li><li>Savastano, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standardized+surgical+technique+for+rat+superior+cervical+ganglionectomy.">A standardized surgical technique for rat superior cervical ganglionectomy.</a> Journal of Neuroscience Methods. 192 (1), 22-33 (2010).</li><li>Garcia, J. B., Romeo, H. E., Basabe, J. C., Cardinali, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+superior+cervical+ganglionectomy+on+insulin+release+by+murine+pancreas+slices.">Effect of superior cervical ganglionectomy on insulin release by murine pancreas slices.</a> Journal of the Autonomic Nervous System. 22 (2), 159-165 (1988).</li><li>Ziegler, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+sympathetic+denervation+attenuates+myocardial+inflammation+and+improves+cardiac+function+after+myocardial+infarction+in+mice.">Local sympathetic denervation attenuates myocardial inflammation and improves cardiac function after myocardial infarction in mice.</a> Cardiovascular Research. 114 (2), 291-299 (2017).</li><li>Getsy, P. M., Coffee, G. A., Hsieh, Y. H., Lewis, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+superior+cervical+ganglia+modulate+ventilatory+responses+to+hypoxia+independently+of+preganglionic+drive+from+the+cervical+sympathetic+chain.">The superior cervical ganglia modulate ventilatory responses to hypoxia independently of preganglionic drive from the cervical sympathetic chain.</a> Journal of Applied Physiology. 131 (2), 836-857 (2021).</li><li>Dieguez, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superior+cervical+gangliectomy+induces+non-exudative+age-related+macular+degeneration+in+mice.">Superior cervical gangliectomy induces non-exudative age-related macular degeneration in mice.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 11 (2), 031641 (2018).</li><li>Zhang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperactivation+of+sympathetic+nerves+drives+depletion+of+melanocyte+stem+cells.">Hyperactivation of sympathetic nerves drives depletion of melanocyte stem cells.</a> Nature. 577 (7792), 676-681 (2020).</li><li>Pirzgalska, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sympathetic+neuron-associated+macrophages+contribute+to+obesity+by+importing+and+metabolizing+norepinephrine.">Sympathetic neuron-associated macrophages contribute to obesity by importing and metabolizing norepinephrine.</a> Nature Medicine. 23 (11), 1309-1318 (2017).</li><li>Kajimura, D., Paone, R., Mann, J. J., Karsenty, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Foxo1+regulates+Dbh+expression+and+the+activity+of+the+sympathetic+nervous+system+in+vivo.">Foxo1 regulates Dbh expression and the activity of the sympathetic nervous system in vivo.</a> Molecular Metabolism. 3 (7), 770-777 (2014).</li></ol>

Dieses Protokoll beschreibt ein Mausmodell für die chirurgische einseitige Ablation des SCG-Inputs. Diese Technik ermöglicht es, die Auswirkungen der adrenergen Innervation in verschiedenen Situationen zu untersuchen. Darüber hinaus kann das resezierte sympathische Ganglion auch in 3D-Matrigelkultur für In-vitro-Experimente gezüchtet werden30.
Studien mit SCGx wurden hauptsächlich an Ratten durchgeführt, da ihre größere Anatomie eine einfachere anatomi...

Mehrere Studien haben berichtet, dass die Nerven in der Tumormikroumgebung eine aktive Rolle bei der Unterstützung der Tumorprogression spielen. Es wurde gezeigt, dass die Ablation adrenerger sympathischer Nerven die Tumorentwicklung und -ausbreitung bei Prostata- und Magenkrebs in vivo beeinträchtigt 1,2,3, während die pharmakologische Blockade adrenerger Rezeptoren das Tumorwachstum bei Kopf-Hals-Tumoren hemmt 4. Eine sympathische neuronale Beteiligung wurde auch bei der Progression von Pankreas-, Zervikla- und Basalzellkarzinomen beschrieben 5,6,7.
Innerhalb des sympathischen Nervensystems ist das Ganglion cervicalis superior (SCG) das einzige Ganglion des Sympathikus, das den Kopf innerviert. Das SCG reguliert verschiedene physiologische Funktionen, wie z.B. die Speichelsekretion und den zirkadianen Rhythmus, und innerviert direkt die zervikalen Lymphknoten 8,9,10. Das SCG wurde auch mit pathologischen Prozessen wie der Makuladegeneration11 und dem Fortschreiten der Aortendissektion12 in Verbindung gebracht. Darüber hinaus wurde berichtet, dass die Resektion des SCG die Ischämie-Reperfusions-induzierte akute Nierenschädigung verschlimmert13 und auch die Darmmikrobiota bei Rattenverändert 14.
Die vollständige Ablation des SCG in einem Mausmodell würde eine wertvolle experimentelle Technik darstellen, um die Krebsforschung und das autonome Nervensystem zu ermöglichen. Während in vielen Studien die pharmakologische adrenerge Rezeptorblockade als adrenerge Ablation eingesetzt wurde 15,16,17,18,19,20, ermöglicht die chirurgische Resektion eine vollständige, einseitige adrenerge Ablation unter Vermeidung wiederholter pharmakologischer Eingriffe und der damit verbundenen Nebenwirkungen 21,22,23.
Die chirurgische Resektion des SCG wurde bei Rattenbeschrieben 24, und die meisten Berichte, die die Wirkung der überlegenen zervikalen Ganglionektomie (SCGx) untersuchten, verwendeten das Rattenmodell. Im Vergleich zum Rattenmodell ist SCGx bei Mäusen aufgrund der geringen Größe des SCG technisch anspruchsvoller. Mäuse sind jedoch vergleichsweise einfacher zu handhaben, kostengünstiger und anfälliger für genetische Manipulationen. Garcia et al. gehörten zu den ersten, die über SCGx bei Mäusen berichteten, und es wurde festgestellt, dass es die Insulinfreisetzung beeinflusst25. In jüngerer Zeit beschrieben Ziegler et al. SCGx in Mäusen auf der Grundlage der veröffentlichten Technik, die für Ratten beschrieben wurde24,26. Dieser und andere Artikel beschreiben eine Methode, bei der zunächst die Arteria carotis communis (CCA) identifiziert und präpariert wird und anschließend das SCG aus der Bifurkation der CCA entfernt wird21,22,27,28. In diesem Artikel wird eine weniger invasive und sicherere Technik an Mäusen beschrieben, die die Dissektion des CCA vermeidet und dadurch die schwerwiegendste Komplikation dieses Verfahrens minimiert – Blutungen aus einer Verletzung des CCA.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-Tyrosine Hydroxylase Antibody</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>AB152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artificial Tears Lubricant Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>59399-162-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curity 2 x 2 Inch Gauze Sponge 8 Ply, Sterile</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>1806</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Derf Needle Holder</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>1177K00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting Microscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5/45 Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #7b Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11270-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ETHILON Nylon Suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>698H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Scissors - ToughCut</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14058-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypoallergenic Surgical Tape</td>
			<td>3M Blenderm</td>
			<td>70200419342</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Induction Chamber, 2 Liter</td>
			<td>VetEquip</td>
			<td>941444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>1001936060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nair</td>
			<td>Church &#38; Dwight Co., Inc</td>
			<td>40002957</td>
			<td>chemical hair removing agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NORADRENALINE RESEARCH ELISA</td>
			<td>Labor Diagnostika Nord (Rocky Mountain Diagnostics)</td>
			<td>BA E-5200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NSG Mouse</td>
			<td>Jackson Laboratory</td>
			<td>JAX:005557</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone-Iodine Swabstick</td>
			<td>PDI</td>
			<td>S41350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Webcol Alcohol Preps</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>5110</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

surgical technique for superior cervical ganglionectomy in a murine model

Immer mehr Hinweise deuten darauf hin, dass das sympathische Nervensystem eine wichtige Rolle beim Fortschreiten von Krebs spielt. Die adrenerge Innervation reguliert die Speicheldrüsensekretion, den zirkadianen Rhythmus, die Makuladegeneration, die Immunfunktion und die Herzphysiologie. Die chirurgische Sympathektomie der Maus ist eine Methode zur Untersuchung der Auswirkungen der adrenergen Innervation, indem sie eine vollständige, einseitige adrenerge Ablation ermöglicht und gleichzeitig die Notwendigkeit wiederholter pharmakologischer Eingriffe und der damit verbundenen Nebenwirkungen vermeidet. Die chirurgische Sympathektomie bei Mäusen ist jedoch aufgrund der geringen Größe des oberen zervikalen Ganglions technisch anspruchsvoll. In dieser Studie wird eine Operationstechnik beschrieben, mit der das Ganglion cervicalis superior zur Ablation des sympathischen Nervensystems zuverlässig identifiziert und reseziert werden kann. Die erfolgreiche Identifizierung und Entfernung des Ganglions wird durch die Bildgebung der fluoreszierenden sympathischen Ganglien mit einer transgenen Maus, die Identifizierung des Horner-Syndroms nach der Resektion, die Färbung auf adrenerge Marker in den resezierten Ganglien und die Beobachtung einer verminderten adrenergen Immunfluoreszenz in den Zielorganen nach Sympathektomie validiert. Dieses Modell ermöglicht zukünftige Studien zum Fortschreiten von Krebs sowie zu anderen physiologischen Prozessen, die durch das sympathische Nervensystem reguliert werden.

Dieses Protokoll beschreibt die chirurgische Entfernung des SCG in einem Mausmodell. Abbildung 2 zeigt die anatomischen Orientierungspunkte, einschließlich der CCA, der Vena jugularis anterior und des SCG. Bei der Dissektion (Abbildung 2A) verläuft die rechte Vena jugularis anterior entlang des lateralen Randes der Luftröhre. Da sie tiefer als die Vena jugularis anterior liegt, sind die linke CCA und ihre Verzweigung in die Arteria carotis interna (ICA) und d...

Watch this Scientific Journal Video about Surgical Technique for Superior Cervical Ganglionectomy in a Murine Model at JoVE.com

Surgical Technique for Superior Cervical Ganglionectomy in a Murine Model

Das vorliegende Protokoll beschreibt ein Mausmodell der Ablation der adrenergen Innervation durch Identifizierung und Resektion des Ganglion cervicalis superior.

Operationstechnik für die überlegene zervikale Ganglionektomie im Mausmodell

Growing evidence suggests that the sympathetic nervous system plays an important role in cancer progression. Adrenergic innervation regulates salivary ...

Der Sympathikus spielt eine wichtige Rolle beim Fortschreiten von Krebs und anderen Krankheiten. Die chirurgische Sympathektomie ist eine wertvolle Methode, um diese Prozesse zu untersuchen, indem sie eine vollständige einseitige adrenerge Ablation induziert. Diese Technik vermeidet die Nebenwirkungen, die mit einer pharmakologischen Hemmung des sympathischen Nervensystems verbunden sind.Darüber hinaus ist es weniger invasiv als zuvor beschriebene Methoden, da es eine Dissektion der Halsschlagader vermeidet. Bei der Durchführung dieser Technik kann es schwierig sein, in den richtigen Raum einzudringen, in dem sich das Ganglion befindet, und es vom Fett zu unterscheiden. Die Identifizierung des Wahrzeichens und der Praxis ist daher unerlässlich.Die Anatomie sieht etwas anders aus, wenn sie in Bewegung ist und nicht präpariert wird, so dass die visuelle Demonstration eine bessere Anleitung zur Identifizierung des anatomischen Orientierungspunkts bietet, der für diese Technik von entscheidender Bedeutung ist. Beginnen Sie mit dem Auftragen einer topischen Augensalbe auf die anästhesierte Maus, um Augenverletzungen und Trockenheit zu vermeiden. Legen Sie die Maus auf der dorsalen Seite unter ein Präpariermikroskop und halten Sie die Inhalationsanästhesie mit einem Präzisionsverdampfer und einem Nasenkonus aufrecht.Sichern Sie beide Vordergliedmaßen mit hypoallergenem Klebeband. Reinigen Sie den rasierten ventralen Aspekt des Halses mit Povidon-Jod und wischen Sie ihn dann mit 70%igem Alkohol ab. Nachdem Sie den Reinigungsvorgang zwei weitere Male wiederholt haben, legen Sie ein steriles Tuch über die Operationsstelle.Verwenden Sie dann eine kleine Schere und machen Sie einen 1,5 Zentimeter langen Hautschnitt in der Bauchlinie des Halses von etwa zwei Millimetern unterhalb des Kinns bis zwei Millimeter oberhalb der Brustbeinkerbe. Trennen Sie die Haut von der darunterliegenden Faszie, indem Sie auf jeder Seite eine spitze Schere unter die Haut einführen und spreizen. Ziehen Sie dann die Hautränder seitlich mit einer Pinzette zurück, um die darunter liegenden Faszien und die submandibulären Speicheldrüsen freizulegen.Ziehen Sie die Unterkieferdrüsen mit einer Pinzette kaudal, um die darunter liegenden Muskeln freizulegen. Als nächstes lokalisieren Sie die Verbindung zwischen dem hinteren Bauch des Digastricus-Muskels und des Omohyoid-Muskels. Führen Sie die Spitze einer um 45 Grad abgewinkelten Pinzette an diesem Übergang seitlich der vorderen Halsvene ein, um eine Öffnung in der darüber liegenden tiefen Halsfaszie zu durchstechen und zu spreizen.Halten Sie dieses Fenster mit der um 45 Grad abgewinkelten Pinzette offen und erweitern Sie diese Öffnung weiter, indem Sie Spreizmanöver mit einer gebogenen Pinzette in der anderen Hand ausführen. Lokalisieren Sie das obere zervikale Ganglion oder SCG an der Seitenwand des freigelegten Raums. Während du mit der anderen Hand die Öffnung mit einer Pinzette hältst, greifst du das SCG vorsichtig mit einer Pinzette und ziehst es aus der Öffnung heraus, um es besser sichtbar zu machen.Sobald das SCG sichtbar ist, fassen Sie die seitliche Basis des SCGs, wo es noch mit dem umgebenden Gewebe verbunden ist. Mit der anderen Hand ziehen Sie das SCG mehrmals langsam und vorsichtig in ventraler und kaudaler Richtung zurück, um das Ganglion allmählich nach und nach zu avulzieren. Halten Sie das Ganglion während dieses Manövers intakt, um sicherzustellen, dass keine Reste von Ganglien zurückbleiben.Löse langsam die Basis des Ganglions und überprüfe auf Blutungen, indem du nach Blutansammlungen suchst. Wenn Sie fertig sind, bringen Sie die Speicheldrüsen wieder in ihre normale anatomische Position. Approximieren und schließen Sie die Haut mit einfachen, unterbrochenen 5-0-Nylonnähten.Während der Dissektion verlief die rechte vordere Halsvene entlang des lateralen Randes der Luftröhre. Bei der Untersuchung der transgenen P0 tdTomato-Maus mit rot fluoreszierenden Neuronen unter dem Fluoreszenzmikroskop wurde beobachtet, dass der fluoreszierende Vagusnerv lateral zur Arteria carotis communis verläuft und der fluoreszierende SCG an der Bifurkation der Arteria carotis communis lateral der Vena jugularis anterior beobachtet wurde. Das resezierte SCG in einer transgenen Maus wurde durch seine rote Fluoreszenz im Vergleich zur nicht-fluoreszierenden SCG-Kontrolle bestätigt.Die Immunfluoreszenzfärbung bestätigte eine Tyrosinhydroxylase, einen Marker für adrenerge Nerven. Nach einer überlegenen zervikalen Ganglionektomie wurde eine Ptosis, also das Herabhängen des Augenlids, beobachtet, was ein Zeichen für das Horner-Syndrom ist. Die Immunfluoreszenzfärbung für eine Tyrosinhydroxylase an der rechten submandibulären Speicheldrüse nach rechter oberer zervikaler Ganglionektomie bestätigte die erfolgreiche Ablation des adrenergen Signalwegs mit fehlender Tyrosinhydroxylase-Nervenfärbung.Im Gegensatz dazu behielt die linke submandibuläre Unterkieferdrüse ihren adrenergen Input bei und intakte eine Tyrosinhydroxylase-Nervenfärbung, die ebenfalls durch Quantifizierung bestätigt wurde. Die ELISA-Quantifizierung von Noradrenalin in der Speicheldrüse bestätigte eine signifikante Reduktion der Noradrenalinexpression in der Unterkieferdrüse auf der Seite der oberen zervikalen Ganglionektomie im Gegensatz zur Kontrollseite der Scheinoperation. Seien Sie geduldig und vorsichtig, wenn Sie den SCG entfernen.Löse es langsam und stückweise. Andernfalls kann die mit dem SCG verbundene Halsschlagader leicht verletzt werden, was zu Blutungen führen kann.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

A Detailed Protocol for Characterizing the Murine C1498 Cell Line and its Associated Leukemia Mouse Model

Ein detailliertes Protokoll der murinen C1498-Zelllinie und der damit verbundenen Leukämie Maus-Modell für Charakterisieren

The intravenous injection of C1498 cells into syngeneic or congenic mice has been performed since 1941. These injections result in the development of ...

Forschung

Krebsforschung

Surgical Procedures and Methodology for a Preclinical Murine Model of De Novo Mammary Cancer Metastasis

Surgical Procedures and Methodology for a Preclinical Murine Model of De Novo Mammary Cancer Metastasis

Chirurgische Verfahren und Methodik für ein präklinisches Murine - Modell von<em&gt; De Novo</em&gt; Mamma Krebs Metastase

A rate-limiting aspect of transgenic mouse models of mammary adenocarcinoma is that primary tumor burden in mammary tissue typically defines study ...

A Murine Orthotopic Bladder Tumor Model and Tumor Detection System

Ein Murine Orthotopische Blasentumormodell und Tumor Detection System

This protocol describes the generation of bladder tumors in female C57BL/6J mice using the murine bladder cancer cell line MB49, which has been modified ...

A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation

Ein Maus-Modell der Fatigue, induziert durch Peripheral Bestrahlung

Cancer-related fatigue (CRF) is a distressing and costly condition that often affects patients receiving cancer treatments, including radiation therapy. ...

An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion

An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion

Eine In Vivo murinen Ischiasnerv Modell Perineural Invasion

Cancer cells invade nerves through a process termed perineural invasion (PNI), in which cancer cells proliferate and migrate in the nerve ...

The Application of 1% Methylene Blue Dye As a Single Technique in Breast Cancer Sentinel Node Biopsy

Die Anwendung von 1% Methylen blauer Farbstoff als eine einzige Technik in Brustkrebs Sentinel Node Biopsie

In this study, we injected 1% methylene blue dye (MBD) into the subareolar or peritumoral space of the breast. In the case of breast conserving surgery ...

An Orthotopic Resectional Mouse Model of Pancreatic Cancer

Ein orthotopisches Resektions-Mausmodell für Bauchspeicheldrüsenkrebs

There is a lack of satisfactory animal models to study adjuvant and/or neoadjuvant therapy in patients being considered for surgery of pancreatic cancer ...

A Murine Ommaya Xenograft Model to Study Direct-Targeted Therapy of Leptomeningeal Disease

Ein murines Ommaya Xenograft-Modell zur Untersuchung der direkten zielgerichteten Therapie von Leptomeningealerkrankungen

Leptomeningeal disease (LMD) is an uncommon type of central nervous system (CNS) metastasis to the cerebral spinal fluid (CSF). The most common cancers ...

Robot Assisted Distal Pancreatectomy with Celiac Axis Resection (DP-CAR) for Pancreatic Cancer: Surgical Planning and Technique

Robot Assisted Distal Pancreatectomy with Celiac Axis Resection DP-CAR for Pancreatic Cancer: Surgical Planning and Technique

Robotergestützte distale Pankreatektomie mit Zöliakie-Achsenresektion (DP-CAR) bei Bauchspeicheldrüsenkrebs: Operationsplanung und -technik

Malignant pancreatic tumors involving the celiac artery can be resected with a distal pancreatectomy, splenectomy and celiac axis resection (DP-CAR), ...

Magnetic Resonance-Guided High Intensity Focused Ultrasound Generated Hyperthermia: A Feasible Treatment Method in a Murine Rhabdomyosarcoma Model

Magnetresonanzgesteuerte, hochintensive, fokussierte, ultraschallerzeugte Hyperthermie: eine praktikable Behandlungsmethode in einem murinen Rhabdomyosarkommodell

Magnetic resonance-guided high intensity focused ultrasound (MRgHIFU) is an established method for producing localized hyperthermia. Given the real-time ...