Name: partial sciatic nerve ligation: a mouse model of chronic neuropathic pain to study the antinociceptive effect of novel therapies
Uploaded: 2022-10-06T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Partial Sciatic Nerve Ligation: A Mouse Model of Chronic Neuropathic Pain to Study the Antinociceptive Effect of Novel Therapies at JoVE.com

Esta pesquisa foi apoiada pelo Centro Nacional de Saúde Complementar e Integrativa [R01AT009716, 2017] (M.M.I.), pelo Centro Abrangente de Dor Crônica e Dependência-Universidade do Arizona (M.M.I.) e pelo Programa de Treinamento de Cientistas Médicos (MSTP) da Universidade do Arizona, Faculdade de Medicina, Tucson.

Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade do Arizona e estão em conformidade com as diretrizes para o uso de animais de laboratório do National Institutes of Health (publicação do NIH nº 80-23, 1966). Camundongos C57Bl6/J adultos livres de patógenos (peso no teste: 22-28 g) foram alojados em gaiolas de camundongos do biotério padrão (cinco camundongos por gaiola) em salas climatizadas em um ciclo claro/escuro de 12 h e tiveram acesso a comida e ...

<ol>
	<li>Hassett, A. L., Gevirtz, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonpharmacologic+treatment+for+fibromyalgia:+patient+education,+cognitive-behavioral+therapy,+relaxation+techniques,+and+complementary+and+alternative+medicine.">Nonpharmacologic treatment for fibromyalgia: patient education, cognitive-behavioral therapy, relaxation techniques, and complementary and alternative medicine.</a> Rheumatic Disease Clinics of North America. 35 (2), 393-407 (2009).</li><li>Hylands-White, N., Duarte, R. V., Raphael, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+overview+of+treatment+approaches+for+chronic+pain+management.">An overview of treatment approaches for chronic pain management.</a> Rheumatology International. 37 (1), 29-42 (2017).</li><li>Campbell, J. N., Meyer, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+neuropathic+pain.">Mechanisms of neuropathic pain.</a> Neuron. 52 (1), 77-92 (2006).</li><li>Colloca, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropathic+pain.">Neuropathic pain.</a> Nature Review Disease Primers. 3, 17002 (2017).</li><li>Colleoni, M., Sacerdote, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+models+of+human+neuropathic+pain.">Murine models of human neuropathic pain.</a> Biochimica et Biophysica Acta. 1802 (10), 924-933 (2010).</li><li>Challa, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+animal+models+of+neuropathic+pain:+Pros+and+cons.">Surgical animal models of neuropathic pain: Pros and cons.</a> International Journal of Neuroscience. 125 (3), 170-174 (2015).</li><li>Bennett, G. J., Xie, Y. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+peripheral+mononeuropathy+in+rat+that+produces+disorders+of+pain+sensation+like+those+seen+in+man.">A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man.</a> Pain. 33 (1), 87-107 (1988).</li><li>Seltzer, Z., Dubner, R., Shir, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+behavioral+model+of+neuropathic+pain+disorders+produced+in+rats+by+partial+sciatic+nerve+injury.">A novel behavioral model of neuropathic pain disorders produced in rats by partial sciatic nerve injury.</a> Pain. 43 (2), 205-218 (1990).</li><li>Hasnie, F. S., Wallace, V. C., Hefner, K., Holmes, A., Rice, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+and+cold+hypersensitivity+in+nerve-injured+C57BL/6J+mice+is+not+associated+with+fear-avoidance-and+depression-related+behaviour.">Mechanical and cold hypersensitivity in nerve-injured C57BL/6J mice is not associated with fear-avoidance-and depression-related behaviour.</a> British Journal of Anaesthia. 98 (6), 816-822 (2007).</li><li>Ito, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suvorexant+and+mirtazapine+improve+chronic+pain-related+changes+in+parameters+of+sleep+and+voluntary+physical+performance+in+mice+with+sciatic+nerve+ligation.">Suvorexant and mirtazapine improve chronic pain-related changes in parameters of sleep and voluntary physical performance in mice with sciatic nerve ligation.</a> PLoS One. 17 (2), 0264386 (2022).</li><li>Martin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conotoxin+contulakin-G+engages+a+neurotensin+receptor+2/R-type+calcium+channel+(Cav2.3)+pathway+to+mediate+spinal+antinociception.">Conotoxin contulakin-G engages a neurotensin receptor 2/R-type calcium channel (Cav2.3) pathway to mediate spinal antinociception.</a> Pain. 163 (9), 1751-1762 (2021).</li><li>Peiser-Oliver, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glycinergic+modulation+of+pain+in+behavioral+animal+models.">Glycinergic modulation of pain in behavioral animal models.</a> Frontiers in Pharmacology. 13, 860903 (2022).</li><li>Ramiro, I. B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Somatostatin+venom+analogs+evolved+by+fish-hunting+cone+snails:+From+prey+capture+behavior+to+identifying+drug+leads.">Somatostatin venom analogs evolved by fish-hunting cone snails: From prey capture behavior to identifying drug leads.</a> Science Advances. 8 (12), (2022).</li><li>Chung, J. M., Schmidt, R. F., Willis, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Encyclopedia of Pain. , 1299-1300 (2007).</li><li>Zahn, P. K., Brennan, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+and+secondary+hyperalgesia+in+a+rat+model+for+human+postoperative+pain.">Primary and secondary hyperalgesia in a rat model for human postoperative pain.</a> Anesthesiology. 90 (3), 863-872 (1999).</li><li>Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+and+sensitive+method+for+measuring+thermal+nociception+in+cutaneous+hyperalgesia.">A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia.</a> Pain. 32 (1), 77-88 (1988).</li><li>Yeomans, D. C., Proudfit, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+foot+withdrawal+response+to+noxious+radiant+heat+in+the+rat.">Characterization of the foot withdrawal response to noxious radiant heat in the rat.</a> Pain. 59 (1), 85-94 (1994).</li><li>Cheah, M., Fawcett, J. W., Andrews, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+thermal+pain+sensation+in+rats+and+mice+using+the+Hargreaves+test.">Assessment of thermal pain sensation in rats and mice using the Hargreaves test.</a> Bio-Protocol. 7 (16), 2506 (2017).</li><li>Hook, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+morphine+after+a+spinal+cord+injury.">The impact of morphine after a spinal cord injury.</a> Behavioural brain research. 179 (2), 281-293 (2007).</li><li>Loram, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prior+exposure+to+repeated+morphine+potentiates+mechanical+allodynia+induced+by+peripheral+inflammation+and+neuropathy.">Prior exposure to repeated morphine potentiates mechanical allodynia induced by peripheral inflammation and neuropathy.</a> Brain, behavior, and immunity. 26 (8), 1256-1264 (2007).</li><li>Green-Fulgham, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxycodone,+fentanyl,+and+morphine+amplify+established+neuropathic+pain+in+male+rats.">Oxycodone, fentanyl, and morphine amplify established neuropathic pain in male rats.</a> Pain. 160 (11), 2634-2640 (2019).</li><li>Deuis, J. R., Dvorakova, L. S., Vetter, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+used+to+evaluate+pain+behaviors+in+rodents.">Methods used to evaluate pain behaviors in rodents.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 10, 284 (2017).</li><li>Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+tactile+allodynia+in+the+rat+paw.">Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.</a> Journal of Neuroscience Methods. 53 (1), 55-63 (1994).</li><li>Jensen, T. S., Finnerup, N. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Allodynia+and+hyperalgesia+in+neuropathic+pain:+clinical+manifestations+and+mechanisms.">Allodynia and hyperalgesia in neuropathic pain: clinical manifestations and mechanisms.</a> Lancet Neurology. 13 (9), 924-935 (2014).</li><li>Malmberg, A. B., Gilbert, H., McCabe, R. T., Basbaum, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Powerful+antinociceptive+effects+of+the+cone+snail+venom-derived+subtype-selective+NMDA+receptor+antagonists+conantokins+G+and+T.">Powerful antinociceptive effects of the cone snail venom-derived subtype-selective NMDA receptor antagonists conantokins G and T.</a> Pain. 101 (1-2), 109-116 (2003).</li><li>Nakamura, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropathic+pain+in+rats+with+a+partial+sciatic+nerve+ligation+is+alleviated+by+intravenous+injection+of+monoclonal+antibody+to+high+mobility+group+box-1.">Neuropathic pain in rats with a partial sciatic nerve ligation is alleviated by intravenous injection of monoclonal antibody to high mobility group box-1.</a> PLoS One. 8 (8), 73640 (2013).</li><li>Sherman, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+in+patterns+of+pain+development+after+nerve+injury+in+rats+and+the+influence+of+sex.">Heterogeneity in patterns of pain development after nerve injury in rats and the influence of sex.</a> Neurobiology of Pain. 10, 100069 (2021).</li><li>Ba, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cinobufacini+protects+against+paclitaxel-induced+peripheral+neuropathic+pain+and+suppresses+TRPV1+up-regulation+and+spinal+astrocyte+activation+in+rats.">Cinobufacini protects against paclitaxel-induced peripheral neuropathic pain and suppresses TRPV1 up-regulation and spinal astrocyte activation in rats.</a> Biomedicine Pharmacotherapy. 108, 76-84 (2018).</li><li>Hao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Huachansu+suppresses+TRPV1+up-regulation+and+spinal+astrocyte+activation+to+prevent+oxaliplatin-induced+peripheral+neuropathic+pain+in+rats.">Huachansu suppresses TRPV1 up-regulation and spinal astrocyte activation to prevent oxaliplatin-induced peripheral neuropathic pain in rats.</a> Gene. 680, 43-50 (2019).</li><li>Guo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+resveratrol+in+the+signaling+of+neuropathic+pain+involving+P2X3+in+the+dorsal+root+ganglion+of+rats.">Effects of resveratrol in the signaling of neuropathic pain involving P2X3 in the dorsal root ganglion of rats.</a> Acta Neurologica Belgica. 121 (2), 365-372 (2021).</li><li>Ni, W., Zheng, X., Hu, L., Kong, C., Xu, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preventing+oxaliplatin-induced+neuropathic+pain:+Using+berberine+to+inhibit+the+activation+of+NF-kappaB+and+release+of+pro-inflammatory+cytokines+in+dorsal+root+ganglions+in+rats.">Preventing oxaliplatin-induced neuropathic pain: Using berberine to inhibit the activation of NF-kappaB and release of pro-inflammatory cytokines in dorsal root ganglions in rats.</a> Experimental and Therapeutic Medicine. 21 (2), 135 (2021).</li><li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+activation+of+metabotropic+glutamate+receptor+7+blocks+paclitaxel-induced+acute+neuropathic+pain+and+suppresses+spinal+glial+reactivity+in+rats.">Selective activation of metabotropic glutamate receptor 7 blocks paclitaxel-induced acute neuropathic pain and suppresses spinal glial reactivity in rats.</a> Psychopharmacology. 238 (1), 107-119 (2021).</li><li>Sun, C., Wu, G., Zhang, Z., Cao, R., Cui, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+tyrosine+phosphatase+receptor+type+D+regulates+neuropathic+pain+after+nerve+injury+via+the+STING-IFN-I+pathway.">Protein tyrosine phosphatase receptor type D regulates neuropathic pain after nerve injury via the STING-IFN-I pathway.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 15, 859166 (2022).</li><li>Coyle, D. E., Sehlhorst, C. S., Mascari, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Female+rats+are+more+susceptible+to+the+development+of+neuropathic+pain+using+the+partial+sciatic+nerve+ligation+(PSNL)+model.">Female rats are more susceptible to the development of neuropathic pain using the partial sciatic nerve ligation (PSNL) model.</a> Neuroscience Letters. 186 (2-3), 135-138 (1995).</li></ol>

O tratamento da dor crônica muitas vezes requer medicação de longo prazo, tornando o tratamento da dor desafiador. Assim, os modelos pré-clínicos são uma ferramenta essencial para avaliar os potenciais benefícios de terapias inovadoras baseadas em abordagens farmacológicas ou não farmacológicas. Os inúmeros modelos de dor crônica neuropática trazem desafios devido ao aumento da variabilidade nas técnicas cirúrgicas entre diferentes pesquisadores, levando à redução da reprodutibilidade. Assim, é essenci...

A dor crônica é um problema de saúde significativo em todo o mundo e é um dos problemas de saúde mais caros nos Estados Unidos. O tratamento da dor crônica é mais bem conduzido quando as modalidades farmacológica e não farmacológica são utilizadas de forma multidisciplinar1. O manejo da dor crônica é desafiador e, em alguns casos, não trata adequadamente a dor2. Portanto, métodos novos e complementares são necessários para melhorar o tratamento da dor crônica, e modelos animais são cruciais para investigar terapias inovadoras.
A dor neuropática crônica resulta de lesões ou doenças no sistema somatossensorial, incluindo diabetes, infecções, compressões nervosas ou doenças autoimunes3. A dor neuropática depende tanto de mecanismos de sensibilização periférica quanto central e origina-se de uma lesão dos nervos. Essa dor pode ser caracterizada por hiperalgesia e alodínia evocadas pelo toque e termicamente, dor contínua e mudanças na temperatura do membro afetado4. Para melhor entender os mecanismos e avançar novos tratamentos, vários modelos têm sido desenvolvidos em roedores para mimetizar os sintomas e as causas da dor neuropática5. Por exemplo, a dor neuropática pode ser induzida com injeções de quimioterápicos, ligadura do nervo espinhal (LN), lesão de constrição crônica (ICC) do nervo ciático, LNPp, lesão do nervo poupado, transecção do nervo ciático e trisecção do nervo ciático6. Notadamente, a ligadura do nervo ciático reproduz múltiplas características da dor neuropática observadas em humanos, como hipersensibilidade mecânica e térmica, ou alterações na temperatura do membro afetado, características da síndrome dolorosa complexa regional (SDCR)7. Assim, esse modelo é adequado para o estudo da SDCR ou de qualquer outra lesão nervosa que induza dor neuropática crônica. O modelo foi desenvolvido pela primeira vez por Seltzer em 19908, sendo amplamente utilizado em estudos de dor para investigar novos compostos analgésicos ou avaliar os efeitos cognitivos da dor crônica 9,10,11,12,13. O modelo apresenta alta reprodutibilidade, e a ligadura parcial preserva as respostas comportamentais aos estímulosperiféricos6.
Muitos dos modelos atualmente utilizados apresentam deficiências não observadas no PNLp. O modelo CCI apresenta uma variabilidade de lesão muito maior entre cada animal, dependendo do conforto do constritor, e a autotomia altera os dígitos da pata traseira, tornando o modelo inadequado para análisecomportamental6. O modelo SNL é uma cirurgia muito mais complicada e mais longa, que não só requer habilidades técnicas avançadas, mas também apresenta um alto risco de déficits motoresgraves3. Essas deficiências não são observadas no modelo pSNL. A facilidade de reprodutibilidade, a curta duração da cirurgia e o risco reduzido de déficits motores observados no pós-operatório tornam esse modelo valioso para o estudo da dor neuropática periférica 8,14. No entanto, o próprio procedimento de ligadura parcial pode ter variabilidade entre os experimentadores, resultando em menor consistência no número de fibras nervosas ligadas. Assim, apresentar os detalhes da cirurgia é fundamental para aumentar a reprodutibilidade entre os estudos.
Para induzir neuropatia crônica, uma sutura de náilon inabsorvível 9-0 é usada para ligar um terço da largura do nervo ciático. Após a cirurgia, as respostas aos estímulos térmicos e mecânicos são exageradas, iniciando-se no 1º dia de pós-operatório e durando mais de 50dias8. Aqui, as sensibilidades térmica e mecânica foram avaliadas ao longo de 28 dias usando os testes de Hargreaves, placa quente e filamento de von Frey. Todos os ensaios comportamentais demonstraram a consistência da hipersensibilidade de longa duração. Demonstrou-se que esse modelo tem efeitos dose-dependentes tanto da morfina quanto do ibuprofeno, confirmando que é adequado para estudos pré-clínicos de dor. Notavelmente, este artigo descreve as instruções para uma ferramenta de vidro artesanal única, conhecida como "gancho de vidro nervoso". Esta ferramenta é usada no lugar da pinça para manipular o nervo e evitar lesões nervosas adicionais não intencionais durante a cirurgia.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5/0, FS-2, 30&#34; Undyed PGA Braided Polyglycolic Acid Synthetic Absorbable Suture</td>
			<td>CP Medical</td>
			<td>421A</td>
			<td>https://cpmedical.com/suturesearch/product/421a-visorb-50-fs-2-30/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6/0, P-1, 18&#34; Blue Polypropylene Monofilament Non-Absorbable Suture</td>
			<td>CP Medical</td>
			<td>8697P</td>
			<td>https://cpmedical.com/suturesearch/product/8697p-polypro-60-p-1-18/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>9/0 (0.3 metric) Nylon Black Monofilament Suture</td>
			<td>Crestpoint Ophthalmics</td>
			<td>MANI 1407</td>
			<td>https://crestpointophthalmics.com/mani-1407-suture-trape-spatula-nylon-black-mono-box-of-12.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Allodynia Software&#160;</td>
			<td>National Instruments, LabView 2015</td>
			<td></td>
			<td>Quantification of mean withdrawal thresholds (Von Frey data)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57Bl6/J mice&#160;</td>
			<td>The Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME</td>
			<td>000664</td>
			<td>https://www.jax.org/strain/000664</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo needle holder</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12565-14</td>
			<td>https://www.finescience.com/en-US/Products/Wound-Closure/Needle-Holders/Castroviejo-Needle-Holder/12565-14</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cold Hot Plate Test</td>
			<td>Bioseb</td>
			<td>BIO-CHP</td>
			<td>https://www.bioseb.com/en/pain-thermal-allodynia-hyperalgesia/563-cold-hot-plate-test.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elevated metal mesh stand for Von Frey</td>
			<td>Bioseb</td>
			<td>BIO-STD2-EVF</td>
			<td>https://www.bioseb.com/en/pain-mechanical-allodynia-hyperalgesia/1689-elevated-metal-mesh-stand-30-cm-height-to-fit-up-to-2-pvf-cages.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extra fine Graefe forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11152-10</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-curved-medium-point-general-purpose-forceps/16100110</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Castroviejo needle holder</td>
			<td>Simovision/Geuder</td>
			<td>17565</td>
			<td>https://simovision.com/assets/Uploads/Brochure-Geuder-Ophthalmic-Surgical-Instruments-EN2.pdf</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissors (11.5 cm)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14558-11</td>
			<td>https://www.finescience.com/en-US/Products/Scissors/Standard-Scissors/Fine-Scissors-Tungsten-Carbide-ToughCut%C2%AE/14558-11</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissors (9 cm)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14558-09</td>
			<td>https://www.finescience.com/en-US/Products/Scissors/Standard-Scissors/Fine-Scissors-Tungsten-Carbide-ToughCut%C2%AE/14558-09</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11064-07</td>
			<td>https://www.finescience.com/en-US/Products/Forceps-Hemostats/Fine-Forceps/Iris-Forceps/11064-07</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Adson forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>392487</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/micro-adson-tissue-forceps-1x2-teeth-german-steel/13820072#?keyword=adson%20forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modular holder cages for rats and mice</td>
			<td>Bioseb</td>
			<td>BIO-PVF</td>
			<td>https://www.bioseb.com/en/pain-mechanical-allodynia-hyperalgesia/1206-modular-holder-cages-for-rats-and-mice.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moretti/Effetre #240 Light Cobalt Blue glass rods 4 mm</td>
			<td>Ebay</td>
			<td>N/A</td>
			<td>https://www.ebay.com/itm/402389491328?hash=item5db0485e80:g:agYAAOS 
			w9CtfnIVJ&#38;amdata=enc 
			%3AAQAHAAAAwCoqvgWRo 
			NTe5Vq8PWOgfE4ygWeW4tL 
			k81J1AFu%2Fkcbsk6pxYtJi6 
			digE5TL9SzlgMzYUMNDr%2B 
			dku2%2B%2FEvB1qXqFmebE 
			020SGs9LPDXLL5w21un7jrM0 
			9xfWYvIzBYQYh6FRWyUJngC 
			uuA9Bkjb9lxtZoYlg5y6PyFR2P 
			34xFk5xaNC5ib65M1%2Fr%2F 
			4w2Iw45QqsSyXH2cuUKRom0 
			AGBoBaIr%2BbJw1VnlMjGuc9dtx 
			4fbPbqoBNSWjj3RbZPOPTYS8Q 
			%3D%3D%7Ctkp%3ABk9SR4q6- 
			6LfYA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plantar Test for Thermal Stimulation - Hargreaves Apparatus</td>
			<td>Ugo Basile</td>
			<td>37570</td>
			<td>https://ugobasile.com/products/categories/pain-and-inflammation/plantar-test-for-thermal-stimulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Touch-Test Sensory Evaluators, Set of 20 Monofilaments</td>
			<td>North Coast Medical</td>
			<td>NC12775-99</td>
			<td>https://www.ncmedical.com/products/touch-test-sensory-evaluators_1278.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tying forceps</td>
			<td>Duckworth &#38; Kent</td>
			<td>2-504ER8</td>
			<td>https://duckworth-and-kent.com/product/tying-forceps-9/</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

partial sciatic nerve ligation: a mouse model of chronic neuropathic pain to study the antinociceptive effect of novel therapies

O manejo da dor crônica permanece desafiador até hoje, e os tratamentos atuais estão associados a efeitos adversos, incluindo tolerância e dependência. A dor neuropática crônica resulta de lesões ou doenças no sistema somatossensorial. Para investigar potenciais terapias com efeitos colaterais reduzidos, modelos de dor em animais são o padrão-ouro em estudos pré-clínicos. Portanto, modelos bem caracterizados e bem descritos são cruciais para o desenvolvimento e validação de terapias inovadoras. 
A ligadura parcial do nervo ciático (NPNs) é um procedimento que induz dor neuropática crônica em camundongos, caracterizada por hipersensibilidade mecânica e térmica, dor contínua e alterações na temperatura do membro, tornando esse modelo um ótimo ajuste para estudar a dor neuropática pré-clinicamente. O NPNp é um modelo vantajoso para o estudo da dor neuropática, pois reproduz muitos sintomas observados em humanos com dor neuropática. Além disso, o procedimento cirúrgico é relativamente rápido e simples de ser realizado. O NPNp unilateral de um membro permite a comparação entre as patas ipsilateral e contralateral, bem como a avaliação da sensibilização central. 
Para induzir hipersensibilidade neuropática crônica, um fio de nylon inabsorvível 9-0 é usado para ligar o terço dorsal do nervo ciático. Este artigo descreve o procedimento cirúrgico e caracteriza o desenvolvimento de dor neuropática crônica por meio de múltiplos testes comportamentais comumente utilizados. Como uma infinidade de terapias inovadoras estão sendo investigadas para o tratamento da dor crônica, este artigo fornece conceitos cruciais para a padronização e uma descrição precisa das cirurgias necessárias para induzir dor neuropática.

A dor neuropática crônica foi induzida pela ligadura parcial do nervo ciático de camundongos machos C57Bl6/J (Figura 1A). A sensibilidade mecânica foi avaliada utilizando-se filamentos de von Frey e o método "up-and-down". A sensibilidade térmica ao calor foi avaliada pelos testes de Hargreaves e placa quente. Todos os dados foram analisados com ANOVA two-way para medidas repetidas com correção de Geisser-Greenhouse para comparar o efeito da cirurgia de NPNp em animais simulados ao l...

Watch this Scientific Journal Video about Partial Sciatic Nerve Ligation: A Mouse Model of Chronic Neuropathic Pain to Study the Antinociceptive Effect of Novel Therapies at JoVE.com

Partial Sciatic Nerve Ligation: A Mouse Model of Chronic Neuropathic Pain to Study the Antinociceptive Effect of Novel Therapies

A ligadura parcial do nervo ciático induz dor neuropática crônica de longa duração, caracterizada por respostas exageradas a estímulos térmicos e mecânicos. Este modelo murino de dor neuropática é comumente usado para estudar terapias inovadoras para o tratamento da dor. Este artigo descreve em detalhes o procedimento cirúrgico para melhorar a padronização e reprodutibilidade.

Ligadura parcial do nervo ciático: um modelo murino de dor neuropática crônica para estudar o efeito antinociceptivo de novas terapias

Management of chronic pain remains challenging to this day, and current treatments are associated with adverse effects, including tolerance and addiction. ...

Como uma infinidade de terapias inovadoras estão sendo investigadas para o tratamento da dor crônica, nosso protocolo fornece conceitos cruciais para a padronização das cirurgias necessárias para induzir dor neuropática. A ligadura parcial do nervo ciático, ou LSPS, é um modelo vantajoso para o estudo da dor neuropática, pois reproduz muitos sintomas observados em humanos com dor neuropática. Como a PNSP reproduz muitos sintomas observados em humanos com dor neuropática, esse protocolo fornece conceitos cruciais para estudar e desenvolver novas terapias para o tratamento da dor.Quem demonstrará o procedimento será Kevin Cheng, doutorando em meu laboratório. Para começar, habitue os ratos ao aparelho de teste de Von Frey por uma hora antes do teste, colocando-os em caixas de plexiglass transparentes em uma malha de arame na mesma sala da sala de teste. Aplicar uma série de monofilamentos finos calibrados perpendicularmente à superfície da plantadora da pata traseira ipsilateral do PSNL dos animais mantidos em gaiolas de malha de arame suspensas.Determinar o limiar de retirada aumentando ou diminuindo sequencialmente a força do estímulo correspondente ao tamanho do filamento. Aumente o tamanho do filamento quando a resposta for negativa e diminua o tamanho do filamento quando o animal retirar a pata. Relate respostas negativas e positivas na folha de dados e teste a mesma pata quatro vezes com filamentos diferentes após a primeira resposta positiva.Habitue os ratos ao aparelho de teste Hargreaves durante uma hora antes do teste, colocando-os em caixas de plexiglass transparentes na mesma sala que a sala de ensaio. Estabelecer as latências basais de retirada da pata usando o aparelho Hargreaves. Focalize uma fonte de calor radiante na superfície da planta da pata traseira ipsilateral à PSNL e inicie a estimulação.Quando o animal retirar a pata, aguarde um detector de movimento para interromper o estímulo e parar o temporizador. Ajustar a intensidade da fonte de calor para obter uma linha de base de latência de retirada da pata de aproximadamente 10 segundos. Em seguida, registre o tempo de retirada em uma tabela.Ajuste a placa quente para 52 graus Celsius. Coloque o animal na câmara de ensaio e inicie um cronómetro. Observe os comportamentos nocifensivos e pare o cronômetro assim que o comportamento nocifensivo for observado.Em seguida, retire o animal da câmara e registre a latência para esse comportamento. Certifique-se de limpar o aparelho de qualquer urina entre cada animal testado para evitar afetar a temperatura do estímulo térmico. Limpar a câmara de teste com etanol 70% entre os animais para reduzir o impacto comportamental dos odores.Para fazer um gancho de vidro nervoso, ligue o queimador de bunsen. Segure uma extremidade da haste de vidro no fogo em uma das mãos. À medida que esta haste de vidro derrete, use outra haste de vidro na outra mão para guiar e puxar o vidro de fusão na primeira haste.Retire a primeira haste de vidro do fogo e deixe a extremidade da porção derretida rolar naturalmente para dentro para formar uma pequena forma de esfera usando a segunda haste de vidro. Aperte os dedos de uma pata traseira com uma pinça para garantir a ausência do reflexo da pata e verifique o reflexo de piscar da córnea antes de aplicar pomada oftálmica lubrificante. Ao escolher de que lado realizar a cirurgia, modele a pata traseira do animal ao redor da região da coxa, inferiormente em direção à patela, superiormente em direção ao quadril e acima do fêmur.Em seguida, limpe três vezes com clorexidina em uma direção com três gazes separadas alternadas com soro fisiológico estéril quente. Em seguida, deslize a perna através de uma fenda feita em um drape estéril de 10 por 10 centímetros para criar um campo estéril ao redor da perna de escolha. Usando tesoura cirúrgica fina fazer um pequeno corte de dois milímetros da pele na linha média da face lateral da coxa.Deslize a tesoura sob a pele em um movimento circular para romper a fáscia e criar uma folga, ampliando o espaço da incisão. Em seguida, usando pinças de amarração criar uma incisão afiada de um centímetro de profundidade verticalmente em um ângulo de 90 graus nos músculos da coxa. Em seguida, insira a tesoura pequena fina na mesma incisão também em um ângulo de 90 graus e espalhe-as suavemente para separar os músculos até que o nervo ciático seja visualizado.Localize o nervo ciático correndo paralelo à coxa vertical na direção do quadril ao joelho. Retire a tesoura da pinça de amarração do corpo antes de prosseguir. Use a pinça extra fina no gancho de vidro do nervo para isolar o nervo por baixo.Liberte cuidadosamente os nervos dos tecidos conjuntivos circundantes em um local próximo ao trocanter do fêmur, que está mais próximo do quadril e mais distante do joelho. Deixe o nervo descansar sobre a haste de vidro e certifique-se de que a extremidade da haste impede que o nervo se desloque. Coloque um nó cirúrgico para amarrar um terço da largura do nervo ciático usando uma sutura de nove zero de náilon antes de se dividir nos ramos fibular comum, tibial e sural.Deslize cuidadosamente o nervo para fora da haste de vidro assim que o nó estiver completo e coloque-o de volta no local original no nível abaixo dos músculos separados. Em seguida, sutura da incisão muscular com fio absorvível poliglicólico cinco zero. Separadamente, sutura da pele com fio de polipropileno seis zero inabsorvível.Em seguida, registre o tempo de parada da cirurgia e da anestesia. Permita que o rato acorde sozinho numa gaiola de recuperação antes de o devolver a uma nova gaiola limpa. Use o teste de Von Frey, Hargreaves ou placa quente para avaliar a hipersensibilidade térmica e mecânica e sua potencial reversão.Camundongos submetidos à cirurgia de NPSP demonstraram limiares mais baixos para estímulos mecânicos em comparação com animais simulados ao longo de 28 dias. Resultados semelhantes foram obtidos com a avaliação da hipersensibilidade térmica. As latências de retirada da pata após exposição ao estímulo térmico radiante foram aumentadas nos animais da NPPS, bem como as latências de retirada quando os animais foram colocados em uma placa de 52 graus Celsius.Os grupos injetados com duas doses diferentes de morfina apresentaram reversão da hipersensibilidade, que durou de uma a duas horas. A hipersensibilidade mecânica retornou aos valores basais quatro horas após a injeção de morfina. Quando duas doses diferentes de ibuprofeno foram administradas intraperitonealmente aos camundongos, os resultados demonstraram menor hipersensibilidade mecânica em comparação com camundongos injetados com solução salina.Limitar o dano adicional ao nervo é essencial, pois pode afetar os limiares sensoriais da dor. O experimentador deve prestar atenção especial e usar o gancho de vidro para reduzir danos não intencionais Após esse procedimento, esse modelo de dor neuropática crônica pode ser usado para identificar e caracterizar o efeito antinociceptivo de fármacos, levando ao desenvolvimento de novas terapias para o tratamento da dor.

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Transplante ortotópico de aorta: um modelo de rato para estudar o desenvolvimento de vasculopatia crônica

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

Medicina

Chronic Constriction of the Sciatic Nerve and Pain Hypersensitivity Testing in Rats

Constrição crônica do nervo ciático e Teste de Hipersensibilidade dor em ratos

Chronic neuropathic pain, resulting from damage to the central or peripheral nervous system, is a prevalent and debilitating condition, affecting 7-18% of ...

Use of Animal Model of Sepsis to Evaluate Novel Herbal Therapies

Uso de Modelo Animal de Sepse para avaliar novas terapias à base de plantas

Sepsis refers to a systemic inflammatory response syndrome resulting from a microbial infection. It has been routinely simulated in animals by several ...

Breathing-controlled Electrical Stimulation (BreEStim) for Management of Neuropathic Pain and Spasticity

Breathing-controlled Electrical Stimulation BreEStim for Management of Neuropathic Pain and Spasticity

Respiração controlada Estimulação Elétrica (BreEStim) para tratamento de dor neuropática e espasticidade

Electrical stimulation (EStim) refers to the application of electrical current to muscles or nerves in order to achieve functional and therapeutic goals. ...

Urinary Bladder Distention Evoked Visceromotor Responses as a Model for Bladder Pain in Mice

Respostas Bexiga Distensão Evocado Visceromotor como um modelo para Bexiga dor em camundongos

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition ...

The Sciatic Nerve Cuffing Model of Neuropathic Pain in Mice

O ciático Nervo cuffing Modelo de Dor Neuropática em Ratos

Neuropathic pain arises as a consequence of a lesion or a disease affecting the somatosensory system. This syndrome results from maladaptive changes in ...

Chronic Constriction Injury of the Rat's Infraorbital Nerve (IoN-CCI) to Study Trigeminal Neuropathic Pain

Chronic Constriction Injury of the Rat's Infraorbital Nerve IoN-CCI to Study Trigeminal Neuropathic Pain

Crônica lesão por constrição de Infraorbital Nerve do Rato (Ion-CCI) para o Estudo do trigêmeo Dor neuropática

Animal models are important tools to study the pathophysiology and pharmacology of neuropathic pain. This manuscript describes the surgical and behavioral ...

The Monoiodoacetate Model of Osteoarthritis Pain in the Mouse

O Modelo Monoiodoacetate da osteoartrite Dor no mouse

A major symptom of patients with osteoarthritis (OA) is pain that&#160;is triggered by peripheral as well as central changes within the pain pathways. The ...

A Mouse Model of Orthopedic Surgery to Study Postoperative Cognitive Dysfunction and Tissue Regeneration

Um modelo do rato de cirurgia ortopédica para estudar a disfunção cognitiva pós-operatória e regeneração de tecidos

Surgery is commonly used to improve and maintain quality of life. Unfortunately, in vulnerable patients such as the elderly, complications may occur and ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Medição de contratilidade isométrica da artéria mesentérica Mouse usando fio miografia

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...