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2.4K Views
•
11:35 min
December 9th, 2022
DOI :
10.3791/64557-v
Chapters
0:04
Introduction
0:35
Isolation of the Gracilis Muscles
1:26
Isolation of the Tibialis Anterior (TA) and the Extensor Digitorum Longus (EDL) Muscles
3:17
Isolation of the Gastrocnemius (GA) and Soleus Muscles
4:27
Isolation of the Triceps Muscles
5:07
Isolation of the Masseter Muscles
6:08
Isolation of the Diaphragm Muscle
7:20
Muscle Digestion to a Single‐Cell Suspension
8:40
Results: Purification, Purity Assessment, and Quantitative Measurement of Quiescent Stem Cell Populations from Individual Skeletal Muscles
10:47
Conclusion
Transcript
このプロトコルは、さまざまな骨格筋にわたる幹細胞機能の研究を可能にし、それらが恒常性、再生、および疾患の進行にどのように寄与するかについての理解を深めるのに役立つため、重要です。このプロトコルを使用して、特定の筋肉から生きた幹細胞の2つの集団を分離し、それらがどのように機能するかを研究することができます。筋肉の分離を開始するには、安楽死させたマウスにエタノールをスプレーし、腹部を上に向けて置きます。
はさみを使用して、腹部の皮膚に0.5センチメートルの長さの水平切開を行います。
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Summary
このプロトコルは、マウスの個々の骨格筋からの筋幹細胞および線維脂肪原性前駆細胞の単離について説明しています。このプロトコルには、単一筋解剖、蛍光活性化細胞選別による幹細胞の単離、免疫蛍光染色による純度評価、および5-エチニル-2'-デオキシウリジン取り込みアッセイによるS期侵入の定量的測定が含まれます。
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