Name: determination of the mating efficiency of haploids in saccharomyces cerevisiae
Uploaded: 2022-12-02T14:00:00
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इस कार्य को डीबीटी/वेलकम ट्रस्ट (इंडिया एलायंस) अनुदान (आईए/एस/19/2/504632) द्वारा वित्त पोषित किया गया था, जो डीबीटी/वेलकम ट्रस्ट (इंडिया एलायंस) अनुदान (आईए/एस/19/2/504632) द्वारा समर्थित एक रिसर्च फेलो है। एएम को वैज्ञानिक और औद्योगिक अनुसंधान परिषद (सीएसआईआर), भारत सरकार द्वारा एक वरिष्ठ रिसर्च फेलो (09/087 (0873)/2017-ईएमआर-आई) के रूप में समर्थित किया गया है। लेखक चर्चा के लिए पाइके जयदेव भट को धन्यवाद देते हैं।

नोट: प्रोटोकॉल में मोटे तौर पर निम्नलिखित चरण शामिल हैं: (1) वाईपीडी प्लेट पर संभोग दक्षता ग्रिड में अगुणित को पैच करना, (2) इनक्यूबेशन 24 घंटे के बाद अगुणित को समान संख्या में मिलाना और मिश्रित अगुणित को संभ...

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	<li>Neiman, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sporulation+in+the+budding+yeast+Saccharomyces+cerevisiae.">Sporulation in the budding yeast Saccharomyces cerevisiae.</a> Genetics. 189 (3), 737-765 (2011).</li><li>Duina, A. A., Miller, M. E., Keeney, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Budding+yeast+for+budding+geneticists:+A+primer+on+the+Saccharomyces+cerevisiae+model+system.">Budding yeast for budding geneticists: A primer on the Saccharomyces cerevisiae model system.</a> Genetics. 197 (1), 33-48 (2014).</li><li>Herskowitz, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+cycle+of+the+budding+yeast+Saccharomyces+cerevisiae.">Life cycle of the budding yeast Saccharomyces cerevisiae.</a> Microbiological Reviews. 52 (4), 536-553 (1988).</li><li>Erdman, S., Lin, L., Malczynski, M., Snyder, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pheromone-regulated+genes+required+for+yeast+mating+differentiation.">Pheromone-regulated genes required for yeast mating differentiation.</a> Journal of Cell Biology. 140 (3), 461-483 (1998).</li><li>Merlini, L., Dudin, O., Martin, S. 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P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+nucleolar+protein+that+affects+mating+efficiency+in+Saccharomyces+cerevisiae+by+altering+the+morphological+response+to+pheromone.">A nucleolar protein that affects mating efficiency in Saccharomyces cerevisiae by altering the morphological response to pheromone.</a> Genetics. 149 (2), 795-805 (1998).</li><li>Jin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Yeast+dynamically+modify+their+environment+to+achieve+better+mating+efficiency.">Yeast dynamically modify their environment to achieve better mating efficiency.</a> Science Signaling. 4 (186), (2011).</li><li>Rogers, D. W., Denton, J. A., McConnell, E., Greig, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+evolution+of+species+recognition.">Experimental evolution of species recognition.</a> Current Biology. 25 (13), 1753-1758 (2015).</li><li>McClure, A. W., Jacobs, K. C., Zyla, T. R., Lew, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mating+in+wild+yeast:+Delayed+interest+in+sex+after+spore+germination.">Mating in wild yeast: Delayed interest in sex after spore germination.</a> Molecular Biology of the Cell. 29 (26), 3119-3127 (2018).</li><li>Sena, E. P., Radin, D. N., Fogel, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synchronous+mating+in+yeast.">Synchronous mating in yeast.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 70 (5), 1373-1377 (1973).</li><li>Werner-Washburne, M., Braun, E., Johnston, G. C., Singer, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stationary+phase+in+the+yeast+Saccharomyces+cerevisiae.">Stationary phase in the yeast Saccharomyces cerevisiae.</a> Microbiology Reviews. 57 (2), 383-401 (1993).</li><li>Johnston, S. A., Hopper, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+the+yeast+regulatory+gene+GAL4+and+analysis+of+its+dosage+effects+on+the+galactose/melibiose+regulon.">Isolation of the yeast regulatory gene GAL4 and analysis of its dosage effects on the galactose/melibiose regulon.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 79 (22), 6971-6975 (1982).</li><li>Mahilkar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Study of metabolic specialization leading to speciation, using yeast as a model system. , (2021).</li><li>Blank, T. E., Woods, M. P., Lebo, C. M., Xin, P., Hopper, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+Gal3+proteins+showing+altered+Gal80p+binding+cause+constitutive+transcription+of+Gal4p-activated+genes+in+Saccharomyces+cerevisiae.">Novel Gal3 proteins showing altered Gal80p binding cause constitutive transcription of Gal4p-activated genes in Saccharomyces cerevisiae.</a> Molecular and Cellular Biology. 17 (5), 2566-2575 (1997).</li><li>Rice, W. R., Hostert, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+experiments+on+speciation:+What+have+we+learned+in+40+years.">Laboratory experiments on speciation: What have we learned in 40 years.</a> Evolution. 47 (6), 1637-1653 (1993).</li><li>White, N. J., Snook, R. 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C., Spiegelman, S., Lindegren, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mendelian+inheritance+of+adaptive+enzymes.">Mendelian inheritance of adaptive enzymes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 30 (11), 346-352 (1944).</li><li>Dettman, J. R., Sirjusingh, C., Kohn, L. M., Anderson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incipient+speciation+by+divergent+adaptation+and+antagonistic+epistasis+in+yeast.">Incipient speciation by divergent adaptation and antagonistic epistasis in yeast.</a> Nature. 447 (7144), 585-588 (2007).</li><li>Jhuang, H. Y., Lee, H. Y., Leu, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial-nuclear+co-evolution+leads+to+hybrid+incompatibility+through+pentatricopeptide+repeat+proteins.">Mitochondrial-nuclear co-evolution leads to hybrid incompatibility through pentatricopeptide repeat proteins.</a> EMBO Reports. 18 (1), 87-101 (2017).</li><li>Lee, H. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incompatibility+of+nuclear+and+mitochondrial+genomes+causes+hybrid+sterility+between+two+yeast+species.">Incompatibility of nuclear and mitochondrial genomes causes hybrid sterility between two yeast species.</a> Cell. 135 (6), 1065-1073 (2008).</li><li>Pronk, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Auxotrophic+yeast+strains+in+fundamental+and+applied+research.">Auxotrophic yeast strains in fundamental and applied research.</a> Applied and Environmental Microbiology. 68 (5), 2095-2100 (2002).</li><li>Madhani, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> From a to &#945;: Yeast as a Model for Cellular Differentiation. , (2007).</li><li>Huxley, C., Green, E. D., Dunham, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+assessment+of+S.+cerevisiae+mating+type+by+PCR.">Rapid assessment of S. cerevisiae mating type by PCR.</a> Trends in Genetics. 6 (8), 236 (1990).</li><li>Rang, C., Galen, J. E., Kaper, J. 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संभोग मार्गों में शामिल जीन से संबंधित अध्ययन करने या संभोग व्यवहार पर बाहरी वातावरण के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए एस सेरेविसिया में संभोग दक्षता का परिमाणीकरण आवश्यक है। पिछले दो दशकों में, एस...

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Adenine</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>A8626</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar Powder regular grade for bacteriology</td>
			<td>SRL</td>
			<td>19661 (0140186)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium Sulphate, Hi-AR</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>GRM1273</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-(+)-glucose</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>G8270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Petri plates</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>PW008</td>
			<td>&#160;90 mm x 15 mm dimension</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Arginine</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>A8094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Aspartic acid</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>A7219</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Histidine monochloride monohydrate</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>H5659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Isoleucine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>I2752</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Leucine</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>L8912</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Lysine</td>
			<td>Aldrich</td>
			<td>62840</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Methionine</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>M5308</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Phenylalanine</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>P5482</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Threonine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T8625</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Tyrosine</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>T8566</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Valine</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>V0513</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mating efficiency grid</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>1 cm x 1.5 cm rectangular grid drawn on the Petri plate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge tubes</td>
			<td>Tarsons</td>
			<td>500010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peptone</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>RM001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Uracil</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>U0750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast Extract Powder</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>RM027</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast Nitrogen Base w/o Amino acids and Ammonium Sulphate</td>
			<td>BD Difco</td>
			<td>233520</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

determination of the mating efficiency of haploids in saccharomyces cerevisiae

सैक्रोमाइसेस सेरेविसिया आनुवंशिकी , विकास और आणविक जीव विज्ञान में एक व्यापक रूप से इस्तेमाल किया जाने वाला मॉडल जीव है। हाल के वर्षों में, यह प्रजातिकरण से संबंधित समस्याओं का अध्ययन करने के लिए एक लोकप्रिय मॉडल जीव भी बन गया है। खमीर के जीवन चक्र में अलैंगिक और यौन प्रजनन चरण दोनों शामिल हैं। विकास प्रयोगों को करने में आसानी और जीव की छोटी पीढ़ी का समय प्रजनन बाधाओं के विकास के अध्ययन की अनुमति देता है। जिस दक्षता के साथ दो संभोग प्रकार (ए और α) ए / α द्विगुणित बनाने के लिए संभोग करते हैं, उसे संभोग दक्षता के रूप में जाना जाता है। अगुणित के बीच संभोग दक्षता में कोई भी कमी एक पूर्व-युग्मक बाधा को इंगित करती है। इस प्रकार, दो अगुणित के बीच प्रजनन अलगाव की सीमा को निर्धारित करने के लिए, संभोग दक्षता को निर्धारित करने के लिए एक मजबूत विधि की आवश्यकता होती है। इस अंत में, एक सरल और अत्यधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य प्रोटोकॉल यहां प्रस्तुत किया गया है। प्रोटोकॉल में चार मुख्य चरण शामिल हैं, जिसमें वाईपीडी प्लेट पर अगुणित को पैच करना, अगुणित को समान संख्या में मिलाना, एकल कॉलोनियों के लिए पतला और चढ़ाना और अंत में, ड्रॉप-आउट प्लेट पर कॉलोनियों की संख्या के आधार पर दक्षता की गणना करना शामिल है। ऑक्सोट्रोफिक मार्करों को स्पष्ट रूप से अगुणित और द्विगुणित के बीच अंतर करने के लिए नियोजित किया जाता है।

दो संभोग प्रकारों की संभोग दक्षता का परिमाणीकरण यहां वर्णित प्रोटोकॉल का उपयोग दो खमीर उपभेदों के बीच संभोग दक्षता को निर्धारित करने के लिए किया गया था- एसके 1 एएमए और एसके 1 एएमα के ?...

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Determination of the Mating Efficiency of Haploids in Saccharomyces cerevisiae

इस काम में, खमीर सैक्रोमाइसेस सेरेविसिया में संभोग दक्षता की मात्रा का ठहराव करने के लिए एक मजबूत विधि का वर्णन किया गया है। यह विधि विशेष रूप से प्रजातिकरण अध्ययनों में पूर्व-युग्मक बाधाओं की मात्रा का ठहराव करने के लिए उपयोगी है।

सैक्रोमाइसेस सेरेविसिया में अगुणित की संभोग क्षमता का निर्धारण

Saccharomyces cerevisiae is a widely used model organism in genetics, evolution, and molecular biology. In recent years, it has also become a popular ...

यह प्रोटोकॉल दक्षता को निर्धारित करने के लिए एक सरल विधि है जिसके साथ खमीर के विभिन्न उपभेद और प्रजातियां एक दूसरे के साथ संभोग करती हैं। प्रस्तावित विधि सरल, मजबूत और कुशल है। विधि को खमीर के किसी भी तनाव तक बढ़ाया जा सकता है।इस अध्ययन में वर्णित विधि का उपयोग यह समझने के लिए किया जा सकता है कि खमीर में प्रजातिकरण कैसे होता है। इसके अलावा, जिन उपभेदों का हम वर्णन करते हैं, वे जीन प्रवाह के साथ प्रयोगों को डिजाइन करने के लिए विशेष रूप से उपयोगी हो सकते हैं। विधि की ताकत यह है कि यह वास्तव में सरल है।उपयोग किए गए विशेष तनाव के आधार पर इनक्यूबेशन के समय जैसे कुछ मामूली समायोजन की आवश्यकता हो सकती है। खमीर निकालने वाले पेप्टोन डेक्सट्रोज, या वाईपीडी एगर प्लेट पर खमीर इनोकुलम को लकीर करके जमे हुए स्टॉक से अगुणित ए और अल्फा को पुनर्जीवित करना शुरू करें। एकल कॉलोनियों को प्राप्त करने के लिए उन्हें 30 डिग्री सेल्सियस पर 48 घंटे तक बढ़ने दें।इनक्यूबेशन बाद, वाईपीडी प्लेट और वाईपीडी माध्यम के पांच मिलीलीटर से एकल कॉलोनियों को टीका लगाएं, और 250 आरपीएम झटकों के साथ 48 घंटे के लिए 30 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें। कोशिकाएं इस इनक्यूबेशन अवधि के बाद विकास के स्थिर चरण में हैं। एक ताजा वाईपीडी प्लेट पर, संभोग दक्षता ग्रिड को 1 से 1.5 सेंटीमीटर आयत के रूप में तीन बक्से में विभाजित करें, जिनमें से प्रत्येक का आयाम 1 बाय 0.5 सेंटीमीटर है।बाएं और दाएं आयताकारों पर दो संभोग प्रकारों के वाईपीडी संस्कृति के पांच माइक्रोलीटर का टीकाकरण करें। यह मात्रा प्रत्येक खंड में पांचवें अगुणित कोशिकाओं से लगभग 5 गुना 10 से मेल खाती है। प्लेटों को 30 डिग्री सेल्सियस पर 24 घंटे के लिए इनक्यूबेट करें।खमीर कोशिकाओं की एक समान संख्या को मिलाने के लिए, एक बाँझ टूथपिक का उपयोग करके बाहरी बक्से में विकसित खमीर वृद्धि के लगभग 1/3 को हटा दें और बाँझ 1.5 मिलीलीटर शीशी में 20 माइक्रोलीटर पानी में हटाई गई कोशिकाओं को पुन: निलंबित करें। प्रत्येक अगुणित के लिए इसका पालन करें। फिर, दो मिलीलीटर पानी में इस निलंबन के पांच माइक्रोलीटर को पतला करें और 600 नैनोमीटर पर स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग करके ऑप्टिकल घनत्व को मापें।ऑप्टिकल घनत्व मूल्य और एक ऑप्टिकल घनत्व पर प्रति मिलीलीटर कोशिकाओं की संख्या के आधार पर, एक ताजा और बाँझ 1.5-मिलीलीटर शीशी में दोनों अगुणित की आवश्यक मात्रा जोड़ें। पिपेट का उपयोग करके इसे अच्छी तरह से मिलाएं। इस निलंबन की अंतिम मात्रा आम तौर पर लगभग छह से आठ माइक्रोलीटर होती है।इसके बाद, इस निलंबन को केंद्र ग्रिड में टीका लगाएं। प्लेट को सात घंटे के लिए 30 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें, जिससे अगुणित संभोग कर सकें। इनक्यूबेशन के सात घंटे के बाद, टूथपिक या पिपेट टिप का उपयोग करके केंद्र आयत से कोशिकाओं को खुरचें और दो मिलीलीटर बाँझ पानी में पतला करें।आगे कमजोर पड़ने का काम करें, और फिर एकल कॉलोनियों को प्राप्त करने के लिए वाईपीडी एगर पर सेल निलंबन फैलाएं। चढ़ाना के बाद, एकल कॉलोनियों को विकसित करने के लिए 36 से 48 घंटों के लिए 30 डिग्री सेल्सियस पर वाईपीडी प्लेटों को इनक्यूबेट करें। सुनिश्चित करें कि डेटा के सांख्यिकीय महत्व को सुनिश्चित करने के लिए स्क्रीनिंग के लिए प्रत्येक संभोग प्रयोग से कुछ सौ व्यक्तिगत उपनिवेश प्राप्त किए जाते हैं।प्लेट पर द्विगुणित कॉलोनियों की पहचान करने के लिए, एकल कॉलोनियों को व्यक्तिगत रूप से डबल ड्रॉप-आउट प्लेट पर लकीर करके स्थानांतरित करें, जिसमें अमीनो एसिड की कमी होती है जिसके लिए उपभेद ऑक्सोट्रोफिक होते हैं। प्लेटों को 48 घंटों के लिए 30 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें और संभोग दक्षता की गणना करें। प्रोटोकॉल की मजबूती ने दो उपभेदों, एसके 1 एएम और एससीएएम के बीच संभोग दक्षता के आसान भेदभाव को सक्षम किया।जबकि एसके 1 उपभेदों को बहुत उच्च दक्षता के साथ जोड़ा गया था, एससीएएम उपभेदों को अपेक्षाकृत कम दक्षता के साथ जोड़ा गया था। एससीएएम उपभेदों की संभोग दक्षता में काफी गिरावट आई जब पर्यावरण में प्राथमिक कार्बन स्रोत के रूप में ग्लूकोज नहीं था, यह दर्शाता है कि संभोग एक ऊर्जावान रूप से महंगी प्रक्रिया है और वैकल्पिक कार्बन स्रोतों पर वृद्धि गुणात्मक रूप से संभोग की दक्षता को कम करती है। जब अलग-अलग समय अवधि के लिए संभोग करने की अनुमति दी गई, तो पहले चार से पांच घंटों के लिए कोई संभोग नहीं देखा गया।पहले द्विगुणित केवल चार से पांच घंटे के बाद दिखाई दिए, यह दर्शाता है कि यह दिए गए वातावरण में संभोग प्रक्रिया को पूरा करने के लिए आवश्यक समय है। उसके बाद, संभोग दक्षता तेजी से बढ़ी। सात घंटे से परे, संभोग दक्षता गणना इस तथ्य से प्रभावित थी कि प्लेट पर माइटोटिक विकास शुरू हुआ।सुनिश्चित करें कि दोनों अगुणित की समान संख्या मिश्रित है। इससे विचलन से प्रोटोकॉल के स्वतंत्र दोहराव में भिन्नता होगी। जीन प्रवाह अनुकूलन और प्रजातिकरण को कैसे प्रभावित करता है, यह एक खुला सवाल है।चूंकि ऑक्सोट्रोफिक मार्कर हमारे उपभेदों में मैट लोकस के बगल में डाले जाते हैं, इसलिए यह इस महत्वपूर्ण प्रश्न को संबोधित करने में मदद करता है।

Research

JoVE Journal

Biology

Determination of the Mating Efficiency of Haploids in Saccharomyces cerevisiae

Dissection of Saccharomyces Cerevisiae Asci

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के विच्छेदन Saccharomyces cerevisiae एएससीआई

Yeast is a highly tractable model system that is used to study many different cellular processes. The common laboratory strain Saccharomyces cerevisiae ...

Quantitative Phosphoproteomics in Fatty Acid Stimulated Saccharomyces cerevisiae

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फैटी एसिड में मात्रात्मक Phosphoproteomics प्रेरित Saccharomyces cerevisiae</em

This protocol describes the growth and stimulation, with the fatty acid oleate, of isotopically heavy and light S. cerevisiae cells. Cells are ground ...

Microarray Analysis for Saccharomyces cerevisiae

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माइक्रोएरे विश्लेषण के लिए Saccharomyces cerevisiae</em

In this protocol, gene expression in yeast (Saccharomyces cerevisiae) is changed after exposure to oxidative stress induced by the addition of hydrogen ...

A Fluorescence Microscopy Assay for Monitoring Mitophagy in the Yeast Saccharomyces cerevisiae

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Autophagy is important for turnover of cellular components under a range of different conditions. It serves an essential homeostatic function as well as a ...

Expression and Purification of the Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Protein in Saccharomyces cerevisiae

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The  cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) is a chloride  channel, that when mutated, can give rise to cystic fibrosis in  ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

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प्रतिदीप्ति का प्रयोग mRNA अणुओं के दृश्य और विश्लेषण<em&gt; स्वस्थानी</emमें&gt; संकरण<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

Coupled Assays for Monitoring Protein Refolding in Saccharomyces cerevisiae

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में निगरानी प्रोटीन refolding के लिए युग्मित Assays<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em

Proteostasis, defined as the combined processes of protein folding/biogenesis, refolding/repair, and degradation, is a delicate cellular balance that must ...

Purification of the Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Protein Expressed in Saccharomyces cerevisiae

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में अभिव्यक्त किए जाते हैं सिस्टिक फाइब्रोसिस transmembrane प्रवाहकत्त्व नियामक प्रोटीन का शुद्धीकरण<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em

Defects in the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) protein cause cystic fibrosis (CF), an autosomal recessive disease that ...

EPR Monitored Redox Titration of the Cofactors of Saccharomyces cerevisiae Nar1

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EPR की Cofactors की रिडॉक्स अनुमापन निगरानी<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em&gt; Nar1

Electron Paramagnetic Resonance (EPR) monitored redox titrations are a powerful method to determine the midpoint potential of cofactors in proteins and to ...

Measurement of mRNA Decay Rates in Saccharomyces cerevisiae Using rpb1-1 Strains

Measurement of mRNA Decay Rates in Saccharomyces cerevisiae Using rpb1-1 Strains

MRNA के क्षय दरों की माप में<em&gt; Saccharomyces cerevisiae</em&gt; का प्रयोग<em&gt; Rpb1-1</em&gt; खींच

mRNA steady state levels vary depending on environmental conditions. Regulation of the steady state accumulation levels of an mRNA ensures that the ...