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08:57 min
November 11th, 2022
DOI :
10.3791/64626-v
Chapters
0:04
Introduction
0:55
Collecting, Digesting Tissue, and Differential Centrifugation
4:11
Embedding Organoids in BECM and Collagen
7:22
Results: Immunofluorescent Imaging of Embedded Organoids
8:11
Conclusion
Transcript
このプロトコルは、継代なしで生成される記憶上皮オルガノイドの産生にとって重要である。この技術の主な利点は、酵素消化後にヒトおよびマウスの乳房および記憶組織からオルガノイドを単離できることです。私たちは、細胞を継代することなく上皮オルガノイドを単離する一連の差動遠心分離ステップを実行します。
この技術を実行する個人は、組織をコラーゲンまたはマトリックスに埋め込み、96ウェルプレート内にプレーティングするときに課題に直面する可能性があります。さらに、適切に重合されたコラーゲンを使用
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Summary
このプロトコルでは、一次正常および腫瘍乳腺組織から差動遠心分離によって上皮オルガノイドを生成するためのアプローチについて説明します。さらに、包埋オルガノイドの3次元培養および免疫蛍光イメージングのための説明書が含まれています。
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