Collecting, Digesting Tissue, and Differential Centrifugation
4:11
Embedding Organoids in BECM and Collagen
7:22
Results: Immunofluorescent Imaging of Embedded Organoids
8:11
Conclusion
Transcript
이 프로토콜은 계대배양 없이 생성되는 기억 상피 오가노이드의 생산에 중요합니다. 이 기술의 주요 장점은 효소 소화 후 인간과 마우스의 유방 및 기억 조직에서 오가노이드를 분리할 수 있다는 것입니다. 우리는 세포를 통과할 필요 없이 상피 오가노이드를 분리하는 일련의 차등 원심분리 단계를 수행합니다.
이 기술을 수행하는 개인은 조직을 콜라겐 또는 매트릭스에 삽입하고 96웰 플레이트 내에 도금할 때 문제에 직면할 수 있습니다. 또한,
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이 프로토콜은 차등 원심분리를 통해 원발성 정상 및 종양 유방 조직에서 상피 오가노이드를 생성하는 접근 방식에 대해 논의합니다. 또한 3차원 배양 및 포매된 오가노이드의 면역형광 이미징에 대한 지침이 포함되어 있습니다.