Name: adoptive transfer of il-33-stimulated macrophages into bleomycin-induced mouse models to study their effect on idiopathic pulmonary fibrosis in vivo
Uploaded: 2023-05-05T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo at JoVE.c

Forfatterne anerkender det særlige emne for laboratoriestyring af Jiangnan University: Konstruktion af digitalt skivebibliotek baseret på patologiske prøver (JDSYS202223) og National Natural Science Foundation of China (81800065).

Alle forsøg blev udført i overensstemmelse med vejledningen for pasning og brug af forsøgsdyr. Alle dyreforsøg blev godkendt af den eksperimentelle etiske komité for dyrevelfærd ved Jiangnan University (JN nr. 20211130m1720615[501]).
BEMÆRK: I alt blev 10 C57BL/6-hanmus i alderen 6-8 uger gamle og med en vægt på 20-25 g anvendt i dette studie. De tre eksperimentelle grupper i undersøgelsen omfattede tre modtagermus hver, og en værtsmus blev brugt til IM-isolering.
<p ...

<ol>
	<li>Heukels, P., Moor, C. C., vonder Th&#252;sen, J. H., Wijsenbeek, M. S., Kool, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+and+immunity+in+IPF+pathogenesis+and+treatment.">Inflammation and immunity in IPF pathogenesis and treatment.</a> Respiratory Medicine. 147, 79-91 (2019).</li><li>Zhang, Y., Zhang, Y., Li, X., Zhang, M., Lv, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microarray+analysis+of+circular+RNA+expression+patterns+in+polarized+macrophages.">Microarray analysis of circular RNA expression patterns in polarized macrophages.</a> International Journal of Molecular Medicine. 39 (2), 373-379 (2017).</li><li>Lee, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+macrophages+in+the+development+of+acute+and+chronic+inflammatory+lung+diseases.">The role of macrophages in the development of acute and chronic inflammatory lung diseases.</a> Cells. 10 (4), 897 (2021).</li><li>Luzina, I. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-33+potentiates+bleomycin-induced+lung+injury.">Interleukin-33 potentiates bleomycin-induced lung injury.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 49 (6), 999-1008 (2013).</li><li>Nie, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AKT2+regulates+pulmonary+inflammation+and+fibrosis+via+modulating+macrophage+activation.">AKT2 regulates pulmonary inflammation and fibrosis via modulating macrophage activation.</a> Journal of Immunology. 198 (11), 4470-4480 (2017).</li><li>Qian, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+transcription+factor+PU.1+promotes+alternative+macrophage+polarization+and+asthmatic+airway+inflammation.">The transcription factor PU.1 promotes alternative macrophage polarization and asthmatic airway inflammation.</a> Journal of Molecular Cell Biology. 7 (6), 557-567 (2015).</li><li>Shah, S., Dhawan, V., Holm, R., Nagarsenker, M. S., Perrie, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liposomes:+Advancements+and+innovation+in+the+manufacturing+process.">Liposomes: Advancements and innovation in the manufacturing process.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 154 (155), 102-122 (2020).</li><li>He, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alveolar+macrophages+are+critical+for+broadly-reactive+antibody-mediated+protection+against+influenza+A+virus+in+mice.">Alveolar macrophages are critical for broadly-reactive antibody-mediated protection against influenza A virus in mice.</a> Nature Communications. 8 (1), 846 (2017).</li><li>Eyal, F. G., Hamm, C. R., Parker, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+in+alveolar+macrophages+attenuates+acute+ventilator+induced+lung+injury+in+rats.">Reduction in alveolar macrophages attenuates acute ventilator induced lung injury in rats.</a> Intensive Care Medicine. 33 (7), 1212-1218 (2007).</li><li>H&#252;bner, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+quantification+of+pulmonary+fibrosis+in+histological+samples.">Standardized quantification of pulmonary fibrosis in histological samples.</a> Biotechniques. 44 (4), 507-517 (2008).</li><li>Tacke, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immature+monocytes+acquire+antigens+from+other+cells+in+the+bone+marrow+and+present+them+to+T+cells+after+maturing+in+the+periphery.">Immature monocytes acquire antigens from other cells in the bone marrow and present them to T cells after maturing in the periphery.</a> The Journal of Experimental Medicine. 203 (3), 583-597 (2006).</li><li>Byrne, A. J., Maher, T. M., Lloyd, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+macrophages:+A+new+therapeutic+pathway+in+fibrosing+lung+disease.">Pulmonary macrophages: A new therapeutic pathway in fibrosing lung disease.</a> Trends in Molecular Medicine. 22 (4), 303-316 (2016).</li><li>Wendisch, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SARS-CoV-2+infection+triggers+profibrotic+macrophage+responses+and+lung+fibrosis.">SARS-CoV-2 infection triggers profibrotic macrophage responses and lung fibrosis.</a> Cell. 184 (26), 6243-6261 (2021).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages:+Friend+or+foe+in+idiopathic+pulmonary+fibrosis.">Macrophages: Friend or foe in idiopathic pulmonary fibrosis.</a> Respiratory Research. 19 (1), 170 (2018).</li></ol>

Denne undersøgelse giver en effektiv metode til at nedbryde, isolere, dyrke og overføre makrofager, hvilket kan hjælpe med at studere mekanismerne for lungefibrose hos mus. Der er mange metoder til udtømning af musemakrofager, såsom trakeal administration, haleveneinjektion og nasal indånding11. Denne undersøgelse optimerede den nasale inhalationsmetode, som er enkel at betjene og effektivt kan nedbryde lungemakrofager 8,9. Efter IL...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/64742">Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo</a>. The Protocol section was updated.
Step 2.1 of the Protocol was updated from:
Anesthetize the host mouse with 3% isoflurane, and then euthanize it by cervical dislocation. Disinfect the skin of the euthanized mouse with 75% alcohol and iodine. Use scissors to cut through the skin and expose the cardiopulmonary tissue
to:
Anesthetize the host mouse&#160;with an intraperitoneal injection of Ketamine (120 mg/kg) and Xylazine (16 mg/kg). Confirm the depth of anesthesia via loss of the toe pinch reflex. Apply veterinary ointment to both eyes to prevent dryness under anesthesia. Then, disinfect the skin of the anesthetized mouse with 75% alcohol and iodine. Use scissors to cut through the skin and expose the cardiopulmonary tissue

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/64742">Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo</a>. The Protocol section was updated.

Erratum: Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo

Idiopatisk lungefibrose (IPF) er en diffus lungeinflammatorisk sygdom forårsaget af mange faktorer1. I cytokinmikromiljøet af Th1- og Th2-immunresponset kan makrofager polariseres til klassisk aktiverede makrofager (M1) og alternativt aktiverede makrofager (M2). Lipopolysaccharider (LPS) eller cytokinet IFN- γ inducerer M1-makrofager til at polarisere og producere proinflammatoriske cytokiner, herunder iNOS, IL-1, IL-6, TNF-α og IL-12. I modsætning hertil driver type II-cytokinerne IL-4 og IL-13 polariseringen af M2-makrofager, som kan producere forskellige fibroblastvækstfremmende faktorer, såsom TGF-β og PDGF, der fremmer lungefibrose2. Den patologiske proces af IPF ledsages af makrofagaktivering og infiltration. IPF formidler skadereparation, inflammation og fibrose gennem frigivelse af cytokiner3. Da der kun er begrænsede behandlingsmuligheder til rådighed, har udforskning af IPF's molekylærpatologiske mekanismer stor betydning for udviklingen af nye strategier for IPF-forebyggelse og -behandling. Tidligere undersøgelser foretaget af vores gruppe og andre forskere 4,5 har bekræftet den øgede frigivelse af IL-33 hos IPF-patienter og i musemodeller med bleomycin (BLM)-induceret IPF. IL-33 frigives af epitel- og endotelcellerne under fibrose og er involveret i makrofagaktivering, hvilket resulterer i unormal proliferation af fibroblaster, leukocytinfiltration og eventuelt tab af lungefunktion5. Den nuværende protokol beskriver den adoptive overførsel af IL-33-stimulerede interstitielle makrofager (IM'er) til alveolerne som et middel til at studere IPF-udvikling i musemodeller. Her blev IM'er isoleret fra lungevævet hos værtsmus, dyrket in vitro, stimuleret med IL-33 i 24 timer og derefter adoptivt overført til alveolerne hos modtagermus ved trakealinjektion. Den direkte indsamling af stimulerede musemakrofager og deres adoptive overførsel til modtageralveolerne viste sig at forværre graden af lungefibrose og kan tydeligere illustrere stimulerende faktorers indflydelse på fibrose sammenlignet med de tidligere undersøgelser6. Teknikken beskrevet i denne artikel kan gøre det muligt for forskere at udforske funktionen af makrofager stimuleret af potentielle cytokiner i udviklingen af IPF.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>&#160;DMEM</td>
			<td>Life technologies Biotechnology,USA</td>
			<td>1508012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arterial indwelling needle</td>
			<td>B Braun Melsingen AG,Germany</td>
			<td>21G15G8393</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD&#160;Accuri&#160;C6 Plus</td>
			<td>Becton Dickinson,USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bleomycin</td>
			<td>Biotang, USA</td>
			<td>Ab9465</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon dioxide incubator</td>
			<td>Thermo Forma, USA</td>
			<td>Thermo Forma370</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD11b</td>
			<td>R&#38;D Systems,USA</td>
			<td>1124F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD11c</td>
			<td>R&#38;D Systems,USA</td>
			<td>N418</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture dish</td>
			<td>Thermo Forma, USA</td>
			<td>174926</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clodronate liposomes&#160;</td>
			<td>Clodronate liposomes,Netherlands</td>
			<td>CI-150-150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase A</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>10103578001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F4/80</td>
			<td>R&#38;D Systems,USA</td>
			<td>521204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Cell Strainer</td>
			<td>Becton,Dickinson and Company, USA</td>
			<td>352340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Life technologies,USA</td>
			<td>1047571</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin Eosin&#160;</td>
			<td>Nanjing Jiancheng Technology,China</td>
			<td>06-570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LightCycler 480 PCR detection system</td>
			<td>Roche, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Murine recombinant factor IL-33</td>
			<td>Peprotech, USA</td>
			<td>210-33</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon microscope</td>
			<td>Nikon Corporation, Japan</td>
			<td>941185</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin, streptomycin</td>
			<td>Life technologies,USA</td>
			<td>877113</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffer (PBS)</td>
			<td>Guangdong Huankai Microbial Technology ,China</td>
			<td>1535882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RBC lysis buffer</td>
			<td>Beyotime Biotechnology Company,China</td>
			<td>C3702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNA Isolater</td>
			<td>Vazyme company,China</td>
			<td>R401-01-AA</td>
			<td>Total RNA extraction reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RWD Inhalation Anesthesia Machine</td>
			<td>Shenzhen Rayward Life Technology ,China</td>
			<td>R500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-automatic paraffin slicer</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td>LeicaRM2245</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYBR Premix Ex Taq</td>
			<td>Takara, Japan</td>
			<td>410800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin 0.25%</td>
			<td>Life Technologies, USA</td>
			<td>1627172</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

adoptive transfer of il-33-stimulated macrophages into bleomycin-induced mouse models to study their effect on idiopathic pulmonary fibrosis in vivo

Det inflammatoriske respons forårsaget af tidlig lungeskade er en af de vigtige årsager til udviklingen af idiopatisk lungefibrose (IPF), som ledsages af aktivering af inflammatoriske celler såsom makrofager og neutrofiler samt frigivelse af inflammatoriske faktorer, herunder TNF-α, IL-1β og IL-6. Tidlig inflammation forårsaget af aktiverede pulmonale interstitielle makrofager (IM'er) som reaktion på IL-33-stimulering er kendt for at spille en afgørende rolle i den patologiske proces af IPF. Denne protokol beskriver den adoptive overførsel af IM'er stimuleret af IL-33 til lungerne hos mus for at studere IPF-udvikling. Det involverer isolering og dyrkning af primære IM'er fra værtsmuselunger, efterfulgt af adoptiv overførsel af stimulerede IM'er til alveolerne hos bleomycin (BLM)-inducerede IPF-modtagermus (som tidligere er blevet udtømt for alveolære makrofager ved behandling med clodronatliposomer) og patologisk evaluering af disse mus. De repræsentative resultater viser, at adoptiv overførsel af IL-33-stimulerede makrofager forværrer lungefibrose hos mus, hvilket tyder på, at etableringen af makrofagadoptivoverførselseksperimentet er et godt teknisk middel til at studere IPF-patologi.

Den protokol, der anvendes her, er opsummeret i rutediagrammet i figur 1. Indånding af clodronatliposomer gennem næsen (figur 2) blev brugt til at nedbryde lungemakrofagerne hos voksne C57BL/6-mus, og dette gav en god modtagermusemodel. Pulmonale IM'er blev isoleret fra en anden ubehandlet (værts)mus (figur 3A,B) og dyrket in vitro. De isolerede makrofager blev stimuleret med IL-33 i 24 timer og derefte...

Watch this Scientific Journal Video about Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo at JoVE.c

Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo

Denne protokol beskriver isoleringen af pulmonale interstitielle makrofager (IM'er) og deres adoptive overførsel efter IL-33-stimulering af lungealveolerne i en musemodel, hvilket kan lette in vivo-undersøgelsen af idiopatisk lungefibrose (IPF).

Adoptiv overførsel af IL-33-stimulerede makrofager til bleomycin-inducerede musemodeller for at studere deres virkning på idiopatisk lungefibrose in vivo

The inflammatory response caused by early lung injury is one of the important causes of the development of idiopathic pulmonary fibrosis (IPF), which is ...

Protokollen beskriver isolering af pulmonal IMS og adoptivoverførsel efter IL-33-bestemmelse i en musemodel, hvilket kan lette in vivo-studiet af idiopatisk lungefibrose. Teknikken gør det muligt for forskerne at udforske funktionen af makrofager, simuleret af traditionelle cytokiner i udviklingen af IPF. Til at begynde med skal du tage hætteglasset med clodronat liposomer ud af køleskabet.Lad det varme i 30 minutter ved stuetemperatur og inverter flere gange for at sikre ensartet blanding. Opsug 60 mikroliter clodronatliposomer ved hjælp af en pipette med en steril sugespids. Administrer kontrol og lægemiddel dråbevis ind i næsehulen i den bedøvede mus.Efter hver dråbe skal du sørge for, at musen inhalerer stoffet fuldstændigt og trækker vejret jævnt. Efter udtømning af alveolære makrofager i modtagermusen skal du begynde med at desinficere huden på den bedøvede værtsmus med 75% alkohol og jod. Brug en saks til at skære gennem huden og udsætte det kardiopulmonale væv.Aspirer 10 ml PBS i en sprøjte udstyret med en 20-gauge nål, og indsæt nålens spids i musens højre atrium. Skær derefter musens ringere vena cava med kirurgisk saks og perfuser musen manuelt med PBS med en konstant hastighed på 10 til 20 ml i minuttet, indtil lungevævet bliver hvidt. Desuden punktafgifter lungevævet og overfør det til iskold PBS i en kulturskål.Skær lungevævet i fragmenter og tilsæt 15 ml DMEM-medium indeholdende 1% collagenase A for at isolere makrofagerne, og inkuber det derefter ved 100 RPM i 30 minutter på et 37 grader Celsius rystebord. Opsug lungevævssuspensionen ca. 20 gange gennem en 10 ml sprøjte for at gøre det fint. Suspensionen filtreres gennem en 40 mikrometer cellesi.Filtratet centrifugeres ved 400 G i 10 minutter. Efter at supernatanten er kasseret, lyser det røde blod med tre ml cellelysebuffer på is i to til tre minutter. Der centrifugeres ved 150 G i fem minutter, og cellepelletsen resuspenderes i 10 ml DMEM.Tæl derefter cellerne ved hjælp af et hæmocytometer. Frø cellerne i en 10 centimeter klæbende cellekulturskål og inkuber i en time ved 37 grader Celsius og 5% kuldioxid for at klæbe lungens interstitielle makrofager til opvasken. Efter en time aspireres supernatanten og de flydende celler.Tilsæt 10 ml af det friske, komplette dyrkningsmedium og inkuber i over otte timer eller natten over. For at stimulere de isolerede interstitielle makrofager skal du erstatte det brugte kulturmedium med et komplet medium interleukiner 33. Forbered også en kontrolplade ved at tilføje PBS i stedet for interleukiner 33.Inkuber pladerne i 24 timer ved 37 grader Celsius og 5% kuldioxid. For at dissociere de pulmonale interstitielle makrofager skal du behandle dem med en milliliter 0,25%trypsin i fem minutter. Derefter tilsættes tre ml frisk kultur, komplet medium for at slukke fordøjelsen og centrifugere cellesuspensionen for at høste lungemakrofagerne.Efter optælling af cellerne resuspenderes cellerne i PBS til en slutkoncentration på fem gange 10 til de femte celler pr. 50 mikroliter. For at begynde overførslen af interstitielle makrofager skal du fastgøre lemmerne på den bedøvede modtagermus på en lodret plade med medicinsk tape og forsigtigt trække musens tunge til den ene side ved hjælp af en vatpind. Når du har tændt intubationslampen, skal du skinne den på musens hals for at se luftrøret, som skal være tæt på bunden af tungen.Indsæt den indbyggede nålekanyle i luftrøret ved hjælp af 22-gauge intubationslampen og styretråden med en diameter på 0,4 millimeter. For at afslutte intubationen skal du fjerne styretråden og skubbe kanylen ind i muserøret. Injicer nu 50 mikroliter af cellesuspensionen i modtagermusen gennem luftrøret, når kanylen ses at komme ind i luftrøret.Efter 24 timer administreres bleomycin via luftrøret for at inducere idiopatisk lungefibrose. Administrer også et lige stort volumen saltvand til kontrolgruppen. Efter 21 dage bestemmes graden af sværhedsgrad af lungefibrose ved at evaluere ekspressionen af markører for fibrose og Ashcroft-scorerne.HE-farvningen viste, at den adoptive overførsel af interleukiner 33 stimulerede makrofager forværrede graden af lungevævsødelæggelse og øget fibroblastaggregering i de bleomycin-stimulerede mus sammenlignet med kontrol. Stigningen i Ashcroft score illustrerer også graden af lungefibrose. Ekspressionsniveauerne af mRNA af alfa SMA og fibronectin i lungevæv hos modtagermusen indeholdende adoptivt overførte interleukiner 33-stimulerede interstitielle makrofager og behandlet med bleomycin var højere sammenlignet med dem hos de BLM-behandlede vildtypemus.500 mikroliter luft skal straks indføres i lungerne med en millimeter sprøjte for at sikre, at cellesuspensionen i kanylen helt kan komme ind i lungevævet.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo

Experimental Metastasis and CTL Adoptive Transfer Immunotherapy Mouse Model

Experimental metastasis mouse model is a simple and yet physiologically relevant metastasis model. The tumor cells are injected intravenously (i.v) into ...

Overcoming Unresponsiveness in Experimental Autoimmune Encephalomyelitis (EAE) Resistant Mouse Strains by Adoptive Transfer and Antigenic Challenge

Overcoming Unresponsiveness in Experimental Autoimmune Encephalomyelitis EAE Resistant Mouse Strains by Adoptive Transfer and Antigenic Challenge

Overvinde unresponsiveness i eksperimentel autoimmun encephalomyelitis (EAE) Resistente musestammer ved adoptiv overførsel og antigenudfordring

Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) is an inflammatory disease of the central nervous system (CNS) and has been used as an animal model for ...

Isolation, Purification and Labeling of Mouse Bone Marrow Neutrophils for Functional Studies and Adoptive Transfer Experiments

Isolation, rensning og mærkning af museknoglemarv Neutrophils for Funktionelle Studier og adoptiv overføring Experiments

Neutrophils are critical effector cells of the innate immune system. They are rapidly recruited at sites of acute inflammation and exert protective or ...

Use of Shigella flexneri to Study Autophagy-Cytoskeleton Interactions

Use of Shigella flexneri to Study Autophagy-Cytoskeleton Interactions

Anvendelse af<em&gt; Shigella flexneri</em&gt; For at studere autofagi-Cytoskeleton interaktioner

Shigella flexneri is an intracellular pathogen that can escape from phagosomes to reach the cytosol, and polymerize the host actin cytoskeleton to promote ...

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Induktion af murine tarmbetændelse ved adoptiv overførsel af effektor CD4<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; Høj</sup&gt; T celler i immunsvækkede mus

There are many different animal models available for studying the pathogenesis of human inflammatory bowel diseases (IBD), each with its own advantages ...

Generation of Lymphocytic Microparticles and Detection of their Proapoptotic Effect on Airway Epithelial Cells

Generation af lymfatisk mikropartikler og påvisning af deres proapoptotiske Påvirkning af luftvejsepitelceller

Interest in the biological roles of cell membrane&#8211;derived vesicles in cell&#8211;cell communication has increased in recent years. Microparticles ...

Intranasal Administration of Recombinant Influenza Vaccines in Chimeric Mouse Models to Study Mucosal Immunity

Intranasal administration af rekombinant influenzavacciner i kimære musemodeller at studere slimhindeimmunitet

Vaccines are one of the greatest achievements of mankind, and have saved millions of lives over the last century. Paradoxically, little is known about the ...

Intra-tracheal Administration of Haemophilus influenzae in Mouse Models to Study Airway Inflammation

Intra-tracheal Administration of Haemophilus influenzae in Mouse Models to Study Airway Inflammation

Intratrakeal administration<em&gt; Haemophilus influenzae</em&gt; I musemodeller at studere Airway Inflammation

Here, we describe a detailed procedure to efficiently and directly deliver Haemophilus influenzae into the lower respiratory tracts of mice. We ...

Legionella pneumophila Outer Membrane Vesicles: Isolation and Analysis of Their Pro-inflammatory Potential on Macrophages

Legionella pneumophila Outer Membrane Vesicles: Isolation and Analysis of Their Pro-inflammatory Potential on Macrophages

Legionella pneumophila ydermembranvesikler: Isolering og analyse af deres pro-inflammatorisk potentiale på makrofager

Bacteria are able to secrete a variety of molecules via various secretory systems. Besides the secretion of molecules into the extracellular space or ...

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

En IL-8 Transient Transgenized Mouse Model for<em&gt; In vivo</em&gt; Langsigtet overvågning af inflammatoriske reaktioner

Airway inflammation is often associated with bacterial infections and represents a major determinant of lung disease. The in vivo determination of the ...