Name: adoptive transfer of il-33-stimulated macrophages into bleomycin-induced mouse models to study their effect on idiopathic pulmonary fibrosis in vivo
Uploaded: 2023-05-05T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo at JoVE.c

Les auteurs reconnaissent le sujet spécial de la gestion de laboratoire de l’Université de Jiangnan: construction d’une bibliothèque de tranches numériques basée sur des spécimens pathologiques (JDSYS202223) et de la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (81800065).

Toutes les expériences ont été réalisées conformément au Guide pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire. Toutes les expériences sur les animaux ont été approuvées par le comité d’éthique du bien-être animal expérimental de l’Université de Jiangnan (JN n n ° 20211130m1720615 [501]).
NOTE: Au total, 10 souris mâles C57BL / 6 âgées de 6 à 8 semaines et pesant 20 à 25 g ont été utilisées dans cette étude. Les trois groupes expérimentaux de...

<ol>
	<li>Heukels, P., Moor, C. C., vonder Th&#252;sen, J. H., Wijsenbeek, M. S., Kool, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+and+immunity+in+IPF+pathogenesis+and+treatment.">Inflammation and immunity in IPF pathogenesis and treatment.</a> Respiratory Medicine. 147, 79-91 (2019).</li><li>Zhang, Y., Zhang, Y., Li, X., Zhang, M., Lv, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microarray+analysis+of+circular+RNA+expression+patterns+in+polarized+macrophages.">Microarray analysis of circular RNA expression patterns in polarized macrophages.</a> International Journal of Molecular Medicine. 39 (2), 373-379 (2017).</li><li>Lee, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+macrophages+in+the+development+of+acute+and+chronic+inflammatory+lung+diseases.">The role of macrophages in the development of acute and chronic inflammatory lung diseases.</a> Cells. 10 (4), 897 (2021).</li><li>Luzina, I. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-33+potentiates+bleomycin-induced+lung+injury.">Interleukin-33 potentiates bleomycin-induced lung injury.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 49 (6), 999-1008 (2013).</li><li>Nie, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AKT2+regulates+pulmonary+inflammation+and+fibrosis+via+modulating+macrophage+activation.">AKT2 regulates pulmonary inflammation and fibrosis via modulating macrophage activation.</a> Journal of Immunology. 198 (11), 4470-4480 (2017).</li><li>Qian, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+transcription+factor+PU.1+promotes+alternative+macrophage+polarization+and+asthmatic+airway+inflammation.">The transcription factor PU.1 promotes alternative macrophage polarization and asthmatic airway inflammation.</a> Journal of Molecular Cell Biology. 7 (6), 557-567 (2015).</li><li>Shah, S., Dhawan, V., Holm, R., Nagarsenker, M. S., Perrie, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liposomes:+Advancements+and+innovation+in+the+manufacturing+process.">Liposomes: Advancements and innovation in the manufacturing process.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 154 (155), 102-122 (2020).</li><li>He, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alveolar+macrophages+are+critical+for+broadly-reactive+antibody-mediated+protection+against+influenza+A+virus+in+mice.">Alveolar macrophages are critical for broadly-reactive antibody-mediated protection against influenza A virus in mice.</a> Nature Communications. 8 (1), 846 (2017).</li><li>Eyal, F. G., Hamm, C. R., Parker, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+in+alveolar+macrophages+attenuates+acute+ventilator+induced+lung+injury+in+rats.">Reduction in alveolar macrophages attenuates acute ventilator induced lung injury in rats.</a> Intensive Care Medicine. 33 (7), 1212-1218 (2007).</li><li>H&#252;bner, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+quantification+of+pulmonary+fibrosis+in+histological+samples.">Standardized quantification of pulmonary fibrosis in histological samples.</a> Biotechniques. 44 (4), 507-517 (2008).</li><li>Tacke, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immature+monocytes+acquire+antigens+from+other+cells+in+the+bone+marrow+and+present+them+to+T+cells+after+maturing+in+the+periphery.">Immature monocytes acquire antigens from other cells in the bone marrow and present them to T cells after maturing in the periphery.</a> The Journal of Experimental Medicine. 203 (3), 583-597 (2006).</li><li>Byrne, A. J., Maher, T. M., Lloyd, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+macrophages:+A+new+therapeutic+pathway+in+fibrosing+lung+disease.">Pulmonary macrophages: A new therapeutic pathway in fibrosing lung disease.</a> Trends in Molecular Medicine. 22 (4), 303-316 (2016).</li><li>Wendisch, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SARS-CoV-2+infection+triggers+profibrotic+macrophage+responses+and+lung+fibrosis.">SARS-CoV-2 infection triggers profibrotic macrophage responses and lung fibrosis.</a> Cell. 184 (26), 6243-6261 (2021).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages:+Friend+or+foe+in+idiopathic+pulmonary+fibrosis.">Macrophages: Friend or foe in idiopathic pulmonary fibrosis.</a> Respiratory Research. 19 (1), 170 (2018).</li></ol>

Cette étude fournit une méthode efficace pour épuiser, isoler, cultiver et transférer les macrophages, ce qui peut aider à étudier les mécanismes de la fibrose pulmonaire chez la souris. Il existe de nombreuses méthodes pour la déplétion des macrophages de souris, telles que l’administration trachéale, l’injection de veines de la queue et l’inhalation nasale11. Cette étude a optimisé la méthode d’inhalation nasale, simple à utiliser et capable d’épuiser efficacement les m...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/64742">Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo</a>. The Protocol section was updated.
Step 2.1 of the Protocol was updated from:
Anesthetize the host mouse with 3% isoflurane, and then euthanize it by cervical dislocation. Disinfect the skin of the euthanized mouse with 75% alcohol and iodine. Use scissors to cut through the skin and expose the cardiopulmonary tissue
to:
Anesthetize the host mouse&#160;with an intraperitoneal injection of Ketamine (120 mg/kg) and Xylazine (16 mg/kg). Confirm the depth of anesthesia via loss of the toe pinch reflex. Apply veterinary ointment to both eyes to prevent dryness under anesthesia. Then, disinfect the skin of the anesthetized mouse with 75% alcohol and iodine. Use scissors to cut through the skin and expose the cardiopulmonary tissue

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/64742">Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo</a>. The Protocol section was updated.

Erratum: Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo

La fibrose pulmonaire idiopathique (FPI) est une maladie inflammatoire pulmonaire diffuse causée par de nombreux facteurs1. Dans le microenvironnement des cytokines de la réponse immunitaire Th1 et Th2, les macrophages peuvent être polarisés en macrophages classiquement activés (M1) et en macrophages activés (M2). Les lipopolysaccharides (LPS) ou la cytokine IFN-γ induisent les macrophages M1 à polariser et à produire des cytokines pro-inflammatoires, notamment iNOS, IL-1, IL-6, TNF-α et IL-12. En revanche, les cytokines de type II IL-4 et IL-13 entraînent la polarisation des macrophages M2, qui peuvent produire différents facteurs favorisant la croissance des fibroblastes, tels que le TGF-β et le PDGF, qui favorisent la fibrose pulmonaire2. Le processus pathologique de la FPI s’accompagne d’une activation et d’une infiltration des macrophages. La FPI intervient dans la réparation des blessures, l’inflammation et la fibrose par la libération de cytokines3. Comme seules des options thérapeutiques limitées sont disponibles, l’exploration des mécanismes pathologiques moléculaires de la FPI revêt une grande importance pour le développement de nouvelles stratégies de prévention et de traitement de la FPI. Des études antérieures menées par notre groupe et d’autres chercheurs 4,5 ont confirmé la libération accrue d’IL-33 chez les patients atteints de FPI et dans des modèles murins atteints de FPI induite par la bléomycine (BLM). L’IL-33 est libérée par les cellules épithéliales et endothéliales lors de la fibrose et est impliquée dans l’activation des macrophages, entraînant la prolifération anormale des fibroblastes, l’infiltration des leucocytes et la perte éventuelle de la fonction pulmonaire5. Le protocole actuel décrit le transfert adoptif de macrophages interstitiels (IM) stimulés par l’IL-33 dans les alvéoles comme moyen d’étudier le développement de la FPI dans des modèles murins. Ici, les IM ont été isolés du tissu pulmonaire de souris hôtes, cultivés in vitro, stimulés avec de l’IL-33 pendant 24 h, puis transférés adoptivement dans les alvéoles de souris receveuses par injection trachéale. La collecte directe de macrophages de souris stimulés et leur transfert adoptif dans les alvéoles receveuses se sont avérés aggraver le degré de fibrose pulmonaire et peuvent illustrer plus clairement l’influence des facteurs stimulants sur la fibrose par rapport aux études précédentes6. La technique décrite dans cet article peut permettre aux chercheurs d’explorer la fonction des macrophages stimulés par des cytokines potentielles dans le développement de la FPI.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>&#160;DMEM</td>
			<td>Life technologies Biotechnology,USA</td>
			<td>1508012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arterial indwelling needle</td>
			<td>B Braun Melsingen AG,Germany</td>
			<td>21G15G8393</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD&#160;Accuri&#160;C6 Plus</td>
			<td>Becton Dickinson,USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bleomycin</td>
			<td>Biotang, USA</td>
			<td>Ab9465</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon dioxide incubator</td>
			<td>Thermo Forma, USA</td>
			<td>Thermo Forma370</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD11b</td>
			<td>R&#38;D Systems,USA</td>
			<td>1124F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD11c</td>
			<td>R&#38;D Systems,USA</td>
			<td>N418</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture dish</td>
			<td>Thermo Forma, USA</td>
			<td>174926</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clodronate liposomes&#160;</td>
			<td>Clodronate liposomes,Netherlands</td>
			<td>CI-150-150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase A</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>10103578001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F4/80</td>
			<td>R&#38;D Systems,USA</td>
			<td>521204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Cell Strainer</td>
			<td>Becton,Dickinson and Company, USA</td>
			<td>352340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Life technologies,USA</td>
			<td>1047571</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin Eosin&#160;</td>
			<td>Nanjing Jiancheng Technology,China</td>
			<td>06-570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LightCycler 480 PCR detection system</td>
			<td>Roche, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Murine recombinant factor IL-33</td>
			<td>Peprotech, USA</td>
			<td>210-33</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon microscope</td>
			<td>Nikon Corporation, Japan</td>
			<td>941185</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin, streptomycin</td>
			<td>Life technologies,USA</td>
			<td>877113</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffer (PBS)</td>
			<td>Guangdong Huankai Microbial Technology ,China</td>
			<td>1535882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RBC lysis buffer</td>
			<td>Beyotime Biotechnology Company,China</td>
			<td>C3702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNA Isolater</td>
			<td>Vazyme company,China</td>
			<td>R401-01-AA</td>
			<td>Total RNA extraction reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RWD Inhalation Anesthesia Machine</td>
			<td>Shenzhen Rayward Life Technology ,China</td>
			<td>R500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-automatic paraffin slicer</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td>LeicaRM2245</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYBR Premix Ex Taq</td>
			<td>Takara, Japan</td>
			<td>410800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin 0.25%</td>
			<td>Life Technologies, USA</td>
			<td>1627172</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

adoptive transfer of il-33-stimulated macrophages into bleomycin-induced mouse models to study their effect on idiopathic pulmonary fibrosis in vivo

La réponse inflammatoire causée par une lésion pulmonaire précoce est l’une des causes importantes du développement de la fibrose pulmonaire idiopathique (FPI), qui s’accompagne de l’activation de cellules inflammatoires telles que les macrophages et les neutrophiles, ainsi que de la libération de facteurs inflammatoires, notamment le TNF-α, l’IL-1β et l’IL-6. L’inflammation précoce causée par des macrophages interstitiels pulmonaires (IM) activés en réponse à la stimulation de l’IL-33 est connue pour jouer un rôle essentiel dans le processus pathologique de la FPI. Ce protocole décrit le transfert adoptif des IM stimulées par l’IL-33 dans les poumons de souris pour étudier le développement de la FPI. Il implique l’isolement et la culture de MI primaires à partir des poumons de souris hôtes, suivis du transfert adoptif de MI stimulés dans les alvéoles de souris receveuses de FPI induites par la bléomycine (BLM) (qui ont été précédemment appauvries en macrophages alvéolaires par un traitement avec des liposomes clodronates), et l’évaluation pathologique de ces souris. Les résultats représentatifs montrent que le transfert adoptif de macrophages stimulés par l’IL-33 aggrave la fibrose pulmonaire chez la souris, suggérant que la mise en place de l’expérience de transfert adoptif de macrophages est un bon moyen technique d’étudier la pathologie de la FPI.

Le protocole utilisé ici est résumé dans l’organigramme de la figure 1. L’inhalation de liposomes de clodronate par le nez (Figure 2) a été utilisée pour épuiser les macrophages pulmonaires de souris adultes C57BL/6, ce qui a produit un bon modèle de souris receveuse. Les MI pulmonaires ont été isolées chez une autre souris (hôte) non traitée (figure 3A,B) et cultivées in vitro. Les macro...

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Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo

Ce protocole décrit l’isolement des macrophages interstitiels pulmonaires (IM) et leur transfert adoptif après stimulation IL-33 des alvéoles pulmonaires dans un modèle murin, ce qui peut faciliter l’étude in vivo de la fibrose pulmonaire idiopathique (FPI).

Transfert adoptif de macrophages stimulés par l’IL-33 dans des modèles murins induits par la bléomycine pour étudier leur effet sur la fibrose pulmonaire idiopathique in vivo

The inflammatory response caused by early lung injury is one of the important causes of the development of idiopathic pulmonary fibrosis (IPF), which is ...

Le protocole décrit l’isolement de l’IMS pulmonaire et le transfert adoptif après détermination de l’IL-33 dans un modèle murin, ce qui peut faciliter l’étude in vivo de la fibrose pulmonaire idiopathique. La technique permet aux chercheurs d’explorer la fonction des macrophages, simulée par les cytokines traditionnelles dans le développement de la FPI. Pour commencer, sortez le flacon de liposomes de clodronate du réfrigérateur.Laisser chauffer pendant 30 minutes à température ambiante et le retourner plusieurs fois pour assurer un mélange uniforme. Aspirer 60 microlitres de liposomes clodronate à l’aide d’une pipette avec un embout d’aspiration stérile. Administrer le témoin et le médicament goutte à goutte dans la cavité nasale de la souris anesthésiée.Après chaque goutte, assurez-vous que la souris inhale complètement le médicament et respire uniformément. Après l’épuisement des macrophages alvéolaires chez la souris receveuse, commencez par désinfecter la peau de la souris hôte anesthésiée avec 75% d’alcool et d’iode. Utilisez des ciseaux pour couper à travers la peau et exposer le tissu cardiopulmonaire.Aspirez 10 millilitres de PBS dans une seringue équipée d’une aiguille de calibre 20 et insérez l’extrémité de l’aiguille dans l’oreillette droite de la souris. Ensuite, coupez la veine cave inférieure de la souris avec des ciseaux chirurgicaux et perfuser manuellement la souris avec du PBS à une vitesse constante de 10 à 20 millilitres par minute jusqu’à ce que le tissu pulmonaire devienne blanc. En outre, excisez le tissu pulmonaire et transférez-le dans du PBS glacé dans un plat de culture.Coupez le tissu pulmonaire en fragments et ajoutez 15 millilitres de milieu DMEM contenant 1% de collagénase A pour isoler les macrophages, puis incuber à 100 RPM pendant 30 minutes sur une table à agiter à 37 degrés Celsius. Aspirez la suspension de tissu pulmonaire environ 20 fois à travers une seringue de 10 millilitres pour la rendre fine. Filtrer la suspension à travers une crépine à cellules de 40 micromètres.Centrifuger le filtrat à 400 G pendant 10 minutes. Après avoir jeté le surnageant, lyser le sang rouge avec trois millilitres de tampon de lyse cellulaire sur de la glace pendant deux à trois minutes. Centrifuger à 150 G pendant cinq minutes et remettre en suspension la pastille de cellule dans 10 millilitres de DMEM.Ensuite, comptez les cellules à l’aide d’un hémocytomètre. Ensemencez les cellules dans une boîte de culture cellulaire adhérente de 10 centimètres et incuber pendant une heure à 37 degrés Celsius et 5% de dioxyde de carbone pour adhérer les macrophages interstitiels pulmonaires aux plats. Après une heure, aspirez le surnageant et les cellules flottantes.Ajouter 10 millilitres du milieu de culture frais et complet et incuber pendant plus de huit heures ou toute la nuit. Pour stimuler les macrophages interstitiels isolés, remplacer le milieu de culture usé par un milieu complet d’interleukines 33. Préparez également une plaque de contrôle en ajoutant du PBS au lieu d’interleukines 33.Incuber les plaques pendant 24 heures à 37 degrés Celsius et 5% de dioxyde de carbone. Pour dissocier les macrophages interstitiels pulmonaires, traitez-les avec un millilitre de trypsine à 0,25% pendant cinq minutes. Ajoutez ensuite trois millilitres de milieu complet de culture fraîche pour étancher la digestion et centrifuger la suspension cellulaire pour récolter les macrophages pulmonaires.Après avoir compté les cellules, remettre en suspension les cellules dans le PBS à une concentration finale de cinq fois 10 à la cinquième cellule par 50 microlitres. Pour commencer le transfert des macrophages interstitiels, fixez les membres de la souris receveuse anesthésiée sur une plaque verticale avec du ruban médical et tirez doucement la langue de la souris d’un côté, à l’aide d’un coton-tige. Après avoir allumé la lampe d’intubation, faites-la briller sur la gorge de la souris pour voir la trachée, qui doit être proche de la base de la langue.Insérez la canule à aiguille à demeure dans la trachée à l’aide de la lampe d’intubation de calibre 22 et du fil guide de 0,4 millimètre de diamètre. Pour terminer l’intubation, retirez le fil guide et poussez la canule dans la trachée de souris. Maintenant, injectez 50 microlitres de la suspension cellulaire dans la souris receveuse à travers la trachée lorsque la canule pénètre dans la trachée.Après 24 heures, administrer la bléomycine par la trachée pour induire une fibrose pulmonaire idiopathique. Administrez également un volume égal de solution saline au groupe témoin. Après 21 jours, déterminer le degré de gravité de la fibrose pulmonaire en évaluant l’expression des marqueurs de la fibrose et les scores d’Ashcroft.La coloration HE a montré que le transfert adoptif d’interleukines 33 stimulait les macrophages exacerbait le degré de destruction du tissu pulmonaire et augmentait l’agrégation des fibroblastes chez les souris stimulées par la bléomycine, par rapport au contrôle. L’augmentation du score d’Ashcroft illustre également le degré de fibrose pulmonaire. Les niveaux d’expression de l’ARNm de l’alpha SMA et de la fibronectine dans les tissus pulmonaires de la souris receveuse contenant des macrophages interstitiels stimulés par des interleukines 33 transférés par adoption et traités à la bléomycine étaient plus élevés que ceux des souris de type sauvage traitées par BLM.500 microlitres d’air doivent être immédiatement introduits dans les poumons avec une seringue d’un millimètre pour s’assurer que la suspension cellulaire dans la canule peut pénétrer complètement dans le tissu pulmonaire.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo

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