Name: adoptive transfer of il-33-stimulated macrophages into bleomycin-induced mouse models to study their effect on idiopathic pulmonary fibrosis in vivo
Uploaded: 2023-05-05T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo at JoVE.c

Os autores reconhecem o Tópico Especial de Gestão de Laboratório da Universidade de Jiangnan: Construção da Biblioteca Digital Slice Baseada em Espécimes Patológicos (JDSYS202223) e a Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (81800065).

Todos os experimentos foram realizados de acordo com o Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. Todos os experimentos com animais foram aprovados pelo Comitê de Ética em Bem-Estar Animal Experimental da Universidade de Jiangnan (JN No. 20211130m1720615[501]).
NOTA: No total, 10 camundongos C57BL/6 machos com idade entre 6-8 semanas e pesando 20-25 g foram usados neste estudo. Os três grupos experimentais do estudo incluíram três camundongos receptores cada, e um camund...

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	<li>Heukels, P., Moor, C. C., vonder Th&#252;sen, J. H., Wijsenbeek, M. S., Kool, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+and+immunity+in+IPF+pathogenesis+and+treatment.">Inflammation and immunity in IPF pathogenesis and treatment.</a> Respiratory Medicine. 147, 79-91 (2019).</li><li>Zhang, Y., Zhang, Y., Li, X., Zhang, M., Lv, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microarray+analysis+of+circular+RNA+expression+patterns+in+polarized+macrophages.">Microarray analysis of circular RNA expression patterns in polarized macrophages.</a> International Journal of Molecular Medicine. 39 (2), 373-379 (2017).</li><li>Lee, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+macrophages+in+the+development+of+acute+and+chronic+inflammatory+lung+diseases.">The role of macrophages in the development of acute and chronic inflammatory lung diseases.</a> Cells. 10 (4), 897 (2021).</li><li>Luzina, I. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-33+potentiates+bleomycin-induced+lung+injury.">Interleukin-33 potentiates bleomycin-induced lung injury.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 49 (6), 999-1008 (2013).</li><li>Nie, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AKT2+regulates+pulmonary+inflammation+and+fibrosis+via+modulating+macrophage+activation.">AKT2 regulates pulmonary inflammation and fibrosis via modulating macrophage activation.</a> Journal of Immunology. 198 (11), 4470-4480 (2017).</li><li>Qian, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+transcription+factor+PU.1+promotes+alternative+macrophage+polarization+and+asthmatic+airway+inflammation.">The transcription factor PU.1 promotes alternative macrophage polarization and asthmatic airway inflammation.</a> Journal of Molecular Cell Biology. 7 (6), 557-567 (2015).</li><li>Shah, S., Dhawan, V., Holm, R., Nagarsenker, M. 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M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+macrophages:+A+new+therapeutic+pathway+in+fibrosing+lung+disease.">Pulmonary macrophages: A new therapeutic pathway in fibrosing lung disease.</a> Trends in Molecular Medicine. 22 (4), 303-316 (2016).</li><li>Wendisch, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SARS-CoV-2+infection+triggers+profibrotic+macrophage+responses+and+lung+fibrosis.">SARS-CoV-2 infection triggers profibrotic macrophage responses and lung fibrosis.</a> Cell. 184 (26), 6243-6261 (2021).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages:+Friend+or+foe+in+idiopathic+pulmonary+fibrosis.">Macrophages: Friend or foe in idiopathic pulmonary fibrosis.</a> Respiratory Research. 19 (1), 170 (2018).</li></ol>

Este estudo fornece um método eficaz para depletar, isolar, cultivar e transferir macrófagos, o que pode ajudar no estudo dos mecanismos de fibrose pulmonar em camundongos. Existem vários métodos para a depleção de macrófagos em camundongos, como administração traqueal, injeção na veia caudal e inalação nasal11. Este estudo otimizou o método de inalação nasal, que é simples de operar e pode efetivamente esgotar macrófagospulmonares 8,9<sup class...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/64742">Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo</a>. The Protocol section was updated.
Step 2.1 of the Protocol was updated from:
Anesthetize the host mouse with 3% isoflurane, and then euthanize it by cervical dislocation. Disinfect the skin of the euthanized mouse with 75% alcohol and iodine. Use scissors to cut through the skin and expose the cardiopulmonary tissue
to:
Anesthetize the host mouse&#160;with an intraperitoneal injection of Ketamine (120 mg/kg) and Xylazine (16 mg/kg). Confirm the depth of anesthesia via loss of the toe pinch reflex. Apply veterinary ointment to both eyes to prevent dryness under anesthesia. Then, disinfect the skin of the anesthetized mouse with 75% alcohol and iodine. Use scissors to cut through the skin and expose the cardiopulmonary tissue

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/64742">Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo</a>. The Protocol section was updated.

Erratum: Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo

A fibrose pulmonar idiopática (FPI) é uma doença inflamatória pulmonar difusa causada por váriosfatores1. No microambiente de citocinas da resposta imune Th1 e Th2, os macrófagos podem ser polarizados em macrófagos classicamente ativados (M1) e, alternativamente, macrófagos ativados (M2). Os lipopolissacarídeos (LPS) ou a citocina IFN-γ induzem macrófagos M1 a polarizar e produzir citocinas pró-inflamatórias, incluindo iNOS, IL-1, IL-6, TNF-α e IL-12. Em contraste, as citocinas tipo II IL-4 e IL-13 conduzem a polarização dos macrófagos M2, que podem produzir diferentes fatores promotores de crescimento de fibroblastos, como TGF-β e PDGF, que promovem fibrose pulmonar2. O processo patológico da FPI é acompanhado por ativação e infiltração de macrófagos. A FPI medeia o reparo da lesão, inflamação e fibrose por meio da liberação de citocinas3. Como apenas opções terapêuticas limitadas estão disponíveis, explorar os mecanismos patológicos moleculares da FPI tem grande importância para o desenvolvimento de novas estratégias de prevenção e tratamento da FPI. Estudos prévios realizados por nosso grupo e por outros pesquisadores 4,5 confirmaram o aumento da liberação de IL-33 em pacientes com FPI e em modelos de camundongos com FPI induzida por bleomicina (BLM). A IL-33 é liberada pelas células epiteliais e endoteliais durante a fibrose e está envolvida na ativação de macrófagos, resultando na proliferação anormal de fibroblastos, infiltração leucocitária e eventual perda da função pulmonar5. O protocolo atual descreve a transferência adotiva de macrófagos intersticiais (MIs) estimulados por IL-33 para os alvéolos como um meio de estudar o desenvolvimento de FPI em modelos de camundongos. Aqui, as MIs foram isoladas do tecido pulmonar de camundongos hospedeiros, cultivadas in vitro, estimuladas com IL-33 por 24 h e, em seguida, transferidas adotivamente para os alvéolos de camundongos receptores por injeção traqueal. A coleta direta de macrófagos de camundongos estimulados e sua transferência adotiva para os alvéolos receptores agravou o grau de fibrose pulmonar e pode ilustrar mais claramente a influência dos fatores estimulantes na fibrose em comparação com os estudos anteriores6. A técnica descrita neste trabalho pode permitir que os pesquisadores explorem a função de macrófagos estimulados por potenciais citocinas no desenvolvimento da FPI.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>&#160;DMEM</td>
			<td>Life technologies Biotechnology,USA</td>
			<td>1508012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arterial indwelling needle</td>
			<td>B Braun Melsingen AG,Germany</td>
			<td>21G15G8393</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD&#160;Accuri&#160;C6 Plus</td>
			<td>Becton Dickinson,USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bleomycin</td>
			<td>Biotang, USA</td>
			<td>Ab9465</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon dioxide incubator</td>
			<td>Thermo Forma, USA</td>
			<td>Thermo Forma370</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD11b</td>
			<td>R&#38;D Systems,USA</td>
			<td>1124F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD11c</td>
			<td>R&#38;D Systems,USA</td>
			<td>N418</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture dish</td>
			<td>Thermo Forma, USA</td>
			<td>174926</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clodronate liposomes&#160;</td>
			<td>Clodronate liposomes,Netherlands</td>
			<td>CI-150-150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase A</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>10103578001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F4/80</td>
			<td>R&#38;D Systems,USA</td>
			<td>521204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Cell Strainer</td>
			<td>Becton,Dickinson and Company, USA</td>
			<td>352340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Life technologies,USA</td>
			<td>1047571</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin Eosin&#160;</td>
			<td>Nanjing Jiancheng Technology,China</td>
			<td>06-570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LightCycler 480 PCR detection system</td>
			<td>Roche, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Murine recombinant factor IL-33</td>
			<td>Peprotech, USA</td>
			<td>210-33</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon microscope</td>
			<td>Nikon Corporation, Japan</td>
			<td>941185</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin, streptomycin</td>
			<td>Life technologies,USA</td>
			<td>877113</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffer (PBS)</td>
			<td>Guangdong Huankai Microbial Technology ,China</td>
			<td>1535882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RBC lysis buffer</td>
			<td>Beyotime Biotechnology Company,China</td>
			<td>C3702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNA Isolater</td>
			<td>Vazyme company,China</td>
			<td>R401-01-AA</td>
			<td>Total RNA extraction reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RWD Inhalation Anesthesia Machine</td>
			<td>Shenzhen Rayward Life Technology ,China</td>
			<td>R500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-automatic paraffin slicer</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td>LeicaRM2245</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYBR Premix Ex Taq</td>
			<td>Takara, Japan</td>
			<td>410800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin 0.25%</td>
			<td>Life Technologies, USA</td>
			<td>1627172</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

adoptive transfer of il-33-stimulated macrophages into bleomycin-induced mouse models to study their effect on idiopathic pulmonary fibrosis in vivo

A resposta inflamatória causada pela lesão pulmonar precoce é uma das causas importantes do desenvolvimento da fibrose pulmonar idiopática (FPI), que é acompanhada pela ativação de células inflamatórias, como macrófagos e neutrófilos, bem como pela liberação de fatores inflamatórios, incluindo TNF-α, IL-1β e IL-6. Sabe-se que a inflamação precoce causada por macrófagos intersticiais (MIs) pulmonares ativados em resposta à estimulação com IL-33 desempenha um papel vital no processo patológico da FPI. Este protocolo descreve a transferência adotiva de MIs estimuladas por IL-33 para os pulmões de camundongos para estudar o desenvolvimento de FPI. Envolve o isolamento e a cultura de MIs primárias de pulmões de camundongos hospedeiros, seguida pela transferência adotiva de MIs estimuladas para os alvéolos de camundongos receptores de FPI induzidos por bleomicina (BLM) (que foram previamente depletados de macrófagos alveolares pelo tratamento com lipossomas clodronatos) e a avaliação patológica desses camundongos. Os resultados representativos mostram que a transferência adotiva de macrófagos estimulados por IL-33 agrava a fibrose pulmonar em camundongos, sugerindo que o estabelecimento do experimento de transferência adotiva de macrófagos é um bom meio técnico para estudar a patologia da FPI.

O protocolo aqui utilizado está resumido no fluxograma da Figura 1. A inalação de lipossomas clodronados pelo nariz (Figura 2) foi utilizada para esgotar os macrófagos pulmonares de camundongos adultos C57BL/6, o que produziu um bom modelo de camundongo receptor. As MIs pulmonares foram isoladas de outro camundongo (hospedeiro) não tratado (Figura 3A,B) e cultivadas in vitro. Os macrófagos isolados f...

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Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo

Este protocolo descreve o isolamento de macrófagos intersticiais (MIs) pulmonares e sua transferência adotiva após estimulação com IL-33 dos alvéolos pulmonares em modelo murino, o que pode facilitar o estudo in vivo da fibrose pulmonar idiopática (FPI).

Transferência Adotiva de Macrófagos Estimulados por IL-33 em Modelos de Camundongos Induzidos por Bleomicina para Estudar seu Efeito na Fibrose Pulmonar Idiopática In Vivo

The inflammatory response caused by early lung injury is one of the important causes of the development of idiopathic pulmonary fibrosis (IPF), which is ...

O protocolo descreve o isolamento do IMS pulmonar e a transferência adotiva após a determinação de IL-33 em modelo muro, o que pode facilitar o estudo in vivo da fibrose pulmonar idiopática. A técnica permite explorar a função dos macrófagos, simulada pelas citocinas tradicionais, no desenvolvimento da FPI. Para começar, retire o frasco de lipossomas clodronatos da geladeira.Deixe aquecer por 30 minutos em temperatura ambiente e inverta várias vezes para garantir uma mistura uniforme. Aspirar 60 microlitros de lipossomas clodronados usando uma pipeta com uma ponta de sucção estéril. Administrar o controle e a droga gota a gota na cavidade nasal do camundongo anestesiado.Após cada gota, certifique-se de que o rato inala a droga completamente e respira uniformemente. Após a depleção de macrófagos alveolares no camundongo receptor, comece desinfetando a pele do camundongo hospedeiro anestesiado com álcool e iodo a 75%. Use tesoura para cortar a pele e expor o tecido cardiopulmonar.Aspirar 10 mililitros de PBS em uma seringa equipada com uma agulha de calibre 20 e inserir a ponta da agulha no átrio direito do mouse. Em seguida, corte a veia cava inferior do camundongo com tesoura cirúrgica e perfunda manualmente o camundongo com PBS a uma velocidade constante de 10 a 20 mililitros por minuto até que o tecido pulmonar fique branco. Além disso, excise o tecido pulmonar e transfira-o para PBS gelado em uma placa de cultura.Cortar o tecido pulmonar em fragmentos e adicionar 15 mililitros de meio DMEM contendo 1% de colagenase A para isolar os macrófagos e, em seguida, incubá-lo a 100 RPM por 30 minutos em uma mesa de agitação de 37 graus Celsius. Aspirar a suspensão de tecido pulmonar aproximadamente 20 vezes através de uma seringa de 10 mililitros para torná-la fina. Filtre a suspensão através de um filtro de células de 40 micrômetros.Centrifugar o filtrado a 400 G durante 10 minutos. Depois de descartar o sobrenadante, lise o sangue vermelho com três mililitros de tampão de lise celular no gelo por dois a três minutos. Centrifugar a 150 G por cinco minutos e ressuspender o pellet celular em 10 mililitros de DMEM.Em seguida, conte as células usando um hemocitômetro. Seme as células em uma placa de cultura celular aderente de 10 centímetros e incube por uma hora a 37 graus Celsius e 5% de dióxido de carbono para aderir os macrófagos intersticiais pulmonares às placas. Após uma hora, aspirar o sobrenadante e as células flutuantes.Adicione 10 mililitros do meio de cultura fresco e completo e incube por mais de oito horas ou durante a noite. Para estimular os macrófagos intersticiais isolados, substituir o meio de cultura irradiado por um meio completo de interleucinas 33. Prepare também uma placa de controle adicionando PBS em vez de interleucinas 33.Incubar as placas por 24 horas a 37 graus Celsius e 5% de dióxido de carbono. Para dissociar os macrófagos intersticiais pulmonares, tratá-los com um mililitro de tripsina a 0,25% por cinco minutos. Em seguida, adicione três mililitros de meio de cultura fresco completo para apagar a digestão e centrifugar a suspensão celular para colher os macrófagos pulmonares.Após a contagem das células, ressuspenda as células em PBS para uma concentração final de cinco vezes 10 a quinta células por 50 microlitros. Para iniciar a transferência de macrófagos intersticiais, fixe os membros do camundongo receptor anestesiado em uma placa vertical com fita adesiva e puxe suavemente a língua do camundongo para um lado, usando um cotonete. Depois de ligar a lâmpada de intubação, brilhe-a na garganta do rato para ver a traqueia, que deve estar perto da base da língua.Insira a cânula da agulha de demora na traqueia usando a lâmpada de intubação de calibre 22 e o fio-guia de 0,4 milímetro de diâmetro. Para terminar a intubação, remova o fio-guia e empurre a cânula para dentro da traqueia do rato. Agora injete 50 microlitros da suspensão celular no camundongo receptor através da traqueia quando a cânula for vista entrando na traqueia.Após 24 horas, administrar bleomicina pela traqueia para induzir fibrose pulmonar idiopática. Administrar também um volume igual de soro fisiológico ao grupo controle. Após 21 dias, determinar o grau de gravidade da fibrose pulmonar avaliando a expressão dos marcadores de fibrose e os escores de Ashcroft.A coloração HE mostrou que a transferência adotiva de interleucinas 33 estimulou macrófagos exacerbados o grau de destruição do tecido pulmonar e aumentou a agregação de fibroblastos nos camundongos estimulados por bleomicina, em comparação com o controle. O aumento do escore de Ashcroft também ilustra o grau de fibrose pulmonar. Os níveis de expressão de RNAm de alfa SMA e fibronectina nos tecidos pulmonares do camundongo receptor contendo macrófagos intersticiais estimulados por 33 interleucinas transferidas adotivamente e tratados com bleomicina foram mais altos, em comparação com os dos camundongos selvagens tratados com BLM.500 microlitros de ar devem ser imediatamente inseridos nos pulmões com uma seringa de um milímetro para garantir que a suspensão celular na cânula possa entrar completamente no tecido pulmonar.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo

Experimental Metastasis and CTL Adoptive Transfer Immunotherapy Mouse Model

Metástase experimental e CTL Adoptive Transferência Modelo rato Imunoterapia

Experimental metastasis mouse model is a simple and yet physiologically relevant metastasis model. The tumor cells are injected intravenously (i.v) into ...

Imunologia e Infecção

Overcoming Unresponsiveness in Experimental Autoimmune Encephalomyelitis (EAE) Resistant Mouse Strains by Adoptive Transfer and Antigenic Challenge

Overcoming Unresponsiveness in Experimental Autoimmune Encephalomyelitis EAE Resistant Mouse Strains by Adoptive Transfer and Antigenic Challenge

Superando indiferença em Encefalomielite autoimune experimental (EAE) linhagens mais resistentes por transferência adotiva e desafio antigênico

Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) is an inflammatory disease of the central nervous system (CNS) and has been used as an animal model for ...

Isolation, Purification and Labeling of Mouse Bone Marrow Neutrophils for Functional Studies and Adoptive Transfer Experiments

Isolamento, purificação e Rotulagem de neutrófilos da medula óssea do rato de Estudos funcionais e Experimentos de transferência adotiva

Neutrophils are critical effector cells of the innate immune system. They are rapidly recruited at sites of acute inflammation and exert protective or ...

Use of Shigella flexneri to Study Autophagy-Cytoskeleton Interactions

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Utilização de<em&gt; Shigella flexneri</em&gt; Para estudar interações Autophagy-Cytoskeleton

Shigella flexneri is an intracellular pathogen that can escape from phagosomes to reach the cytosol, and polymerize the host actin cytoskeleton to promote ...

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Indução de Murino inflamação intestinal por transferência adotiva de Effector CD4<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; Alta</sup&gt; Células T em imunodeficientes Mice

There are many different animal models available for studying the pathogenesis of human inflammatory bowel diseases (IBD), each with its own advantages ...

Generation of Lymphocytic Microparticles and Detection of their Proapoptotic Effect on Airway Epithelial Cells

Geração de Lymphocytic micropartículas e Detecção de seu efeito pró-apoptóticos em células epiteliais das vias aéreas

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Intranasal Administration of Recombinant Influenza Vaccines in Chimeric Mouse Models to Study Mucosal Immunity

A administração intranasal de recombinantes Vacinas contra Influenza em quimérico rato Modelos para estudar a imunidade mucosal

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Intra-tracheal Administration of Haemophilus influenzae in Mouse Models to Study Airway Inflammation

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Administração intra-traqueal de<em&gt; Haemophilus influenzae</em&gt; No mouse modelos para o Estudo de inflamação das vias aéreas

Here, we describe a detailed procedure to efficiently and directly deliver Haemophilus influenzae into the lower respiratory tracts of mice. We ...

Legionella pneumophila Outer Membrane Vesicles: Isolation and Analysis of Their Pro-inflammatory Potential on Macrophages

Legionella pneumophila Outer Membrane Vesicles: Isolation and Analysis of Their Pro-inflammatory Potential on Macrophages

Legionella pneumophila Outer Membrane vesículas: Isolamento e Análise do seu potencial pró-inflamatórios em macrófagos

Bacteria are able to secrete a variety of molecules via various secretory systems. Besides the secretion of molecules into the extracellular space or ...

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

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Um modelo de mouse transiente Transientized IL-8 para o<em&gt; In Vivo</em&gt; Monitoramento de Longo Prazo de Respostas Inflamatórias

Airway inflammation is often associated with bacterial infections and represents a major determinant of lung disease. The in vivo determination of the ...