Name: adoptive transfer of il-33-stimulated macrophages into bleomycin-induced mouse models to study their effect on idiopathic pulmonary fibrosis in vivo
Uploaded: 2023-05-05T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo at JoVE.c

Los autores reconocen el tema especial de gestión de laboratorio de la Universidad de Jiangnan: construcción de una biblioteca digital basada en muestras patológicas (JDSYS202223) y la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (81800065).

Todos los experimentos se realizaron de acuerdo con la Guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio. Todos los experimentos con animales fueron aprobados por el Comité de Ética de Bienestar Animal Experimental de la Universidad de Jiangnan (JN No. 20211130m1720615[501]).
NOTA: En total, se utilizaron 10 ratones machos C57BL / 6 de 6-8 semanas de edad y con un peso de 20-25 g en este estudio. Los tres grupos experimentales en el estudio incluyeron tres ratones receptores ...

<ol>
	<li>Heukels, P., Moor, C. C., vonder Th&#252;sen, J. H., Wijsenbeek, M. S., Kool, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+and+immunity+in+IPF+pathogenesis+and+treatment.">Inflammation and immunity in IPF pathogenesis and treatment.</a> Respiratory Medicine. 147, 79-91 (2019).</li><li>Zhang, Y., Zhang, Y., Li, X., Zhang, M., Lv, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microarray+analysis+of+circular+RNA+expression+patterns+in+polarized+macrophages.">Microarray analysis of circular RNA expression patterns in polarized macrophages.</a> International Journal of Molecular Medicine. 39 (2), 373-379 (2017).</li><li>Lee, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+macrophages+in+the+development+of+acute+and+chronic+inflammatory+lung+diseases.">The role of macrophages in the development of acute and chronic inflammatory lung diseases.</a> Cells. 10 (4), 897 (2021).</li><li>Luzina, I. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-33+potentiates+bleomycin-induced+lung+injury.">Interleukin-33 potentiates bleomycin-induced lung injury.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 49 (6), 999-1008 (2013).</li><li>Nie, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AKT2+regulates+pulmonary+inflammation+and+fibrosis+via+modulating+macrophage+activation.">AKT2 regulates pulmonary inflammation and fibrosis via modulating macrophage activation.</a> Journal of Immunology. 198 (11), 4470-4480 (2017).</li><li>Qian, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+transcription+factor+PU.1+promotes+alternative+macrophage+polarization+and+asthmatic+airway+inflammation.">The transcription factor PU.1 promotes alternative macrophage polarization and asthmatic airway inflammation.</a> Journal of Molecular Cell Biology. 7 (6), 557-567 (2015).</li><li>Shah, S., Dhawan, V., Holm, R., Nagarsenker, M. 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C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+in+alveolar+macrophages+attenuates+acute+ventilator+induced+lung+injury+in+rats.">Reduction in alveolar macrophages attenuates acute ventilator induced lung injury in rats.</a> Intensive Care Medicine. 33 (7), 1212-1218 (2007).</li><li>H&#252;bner, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+quantification+of+pulmonary+fibrosis+in+histological+samples.">Standardized quantification of pulmonary fibrosis in histological samples.</a> Biotechniques. 44 (4), 507-517 (2008).</li><li>Tacke, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immature+monocytes+acquire+antigens+from+other+cells+in+the+bone+marrow+and+present+them+to+T+cells+after+maturing+in+the+periphery.">Immature monocytes acquire antigens from other cells in the bone marrow and present them to T cells after maturing in the periphery.</a> The Journal of Experimental Medicine. 203 (3), 583-597 (2006).</li><li>Byrne, A. J., Maher, T. M., Lloyd, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+macrophages:+A+new+therapeutic+pathway+in+fibrosing+lung+disease.">Pulmonary macrophages: A new therapeutic pathway in fibrosing lung disease.</a> Trends in Molecular Medicine. 22 (4), 303-316 (2016).</li><li>Wendisch, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SARS-CoV-2+infection+triggers+profibrotic+macrophage+responses+and+lung+fibrosis.">SARS-CoV-2 infection triggers profibrotic macrophage responses and lung fibrosis.</a> Cell. 184 (26), 6243-6261 (2021).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages:+Friend+or+foe+in+idiopathic+pulmonary+fibrosis.">Macrophages: Friend or foe in idiopathic pulmonary fibrosis.</a> Respiratory Research. 19 (1), 170 (2018).</li></ol>

Este estudio proporciona un método eficaz para agotar, aislar, cultivar y transferir macrófagos, lo que puede ayudar a estudiar los mecanismos de la fibrosis pulmonar en ratones. Existen muchos métodos para el agotamiento de macrófagos en ratones, como la administración traqueal, la inyección de venas de la cola y la inhalación nasal11. Este estudio optimizó el método de inhalación nasal, que es fácil de operar y puede agotar eficazmente los macrófagos pulmonares</sup...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/64742">Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo</a>. The Protocol section was updated.
Step 2.1 of the Protocol was updated from:
Anesthetize the host mouse with 3% isoflurane, and then euthanize it by cervical dislocation. Disinfect the skin of the euthanized mouse with 75% alcohol and iodine. Use scissors to cut through the skin and expose the cardiopulmonary tissue
to:
Anesthetize the host mouse&#160;with an intraperitoneal injection of Ketamine (120 mg/kg) and Xylazine (16 mg/kg). Confirm the depth of anesthesia via loss of the toe pinch reflex. Apply veterinary ointment to both eyes to prevent dryness under anesthesia. Then, disinfect the skin of the anesthetized mouse with 75% alcohol and iodine. Use scissors to cut through the skin and expose the cardiopulmonary tissue

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/64742">Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo</a>. The Protocol section was updated.

Erratum: Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo

La fibrosis pulmonar idiopática (FPI) es una enfermedad inflamatoria pulmonar difusa causada por muchos factores1. En el microambiente de citoquinas de la respuesta inmune Th1 y Th2, los macrófagos pueden polarizarse en macrófagos activados clásicamente (M1) y macrófagos activados alternativamente (M2). Los lipopolisacáridos (LPS) o la citoquina IFN-γ inducen a los macrófagos M1 a polarizarse y producir citoquinas proinflamatorias, incluyendo iNOS, IL-1, IL-6, TNF-α e IL-12. En contraste, las citoquinas tipo II IL-4 e IL-13 impulsan la polarización de los macrófagos M2, que pueden producir diferentes factores promotores del crecimiento de fibroblastos, como TGF-β y PDGF, que promueven la fibrosis pulmonar2. El proceso patológico de la FPI se acompaña de activación e infiltración de macrófagos. La FPI media la reparación de lesiones, la inflamación y la fibrosis a través de la liberación de citoquinas3. Como solo se dispone de opciones terapéuticas limitadas, explorar los mecanismos patológicos moleculares de la FPI tiene gran importancia para desarrollar nuevas estrategias para la prevención y el tratamiento de la FPI. Estudios previos realizados por nuestro grupo y otros investigadores 4,5 han confirmado el aumento de la liberación de IL-33 en pacientes con FPI y en modelos de ratón con FPI inducida por bleomicina (BLM). La IL-33 es liberada por las células epiteliales y endoteliales durante la fibrosis y está involucrada en la activación de macrófagos, lo que resulta en la proliferación anormal de fibroblastos, la infiltración de leucocitos y la eventual pérdida de la función pulmonar5. El protocolo actual describe la transferencia adoptiva de macrófagos intersticiales (IM) estimulados por IL-33 en los alvéolos como un medio para estudiar el desarrollo de FPI en modelos de ratón. Aquí, los IM se aislaron del tejido pulmonar de ratones huéspedes, se cultivaron in vitro, se estimularon con IL-33 durante 24 h y luego se transfirieron adoptivamente a los alvéolos de los ratones receptores mediante inyección traqueal. Se encontró que la recolección directa de macrófagos de ratón estimulados y su transferencia adoptiva a los alvéolos receptores agrava el grado de fibrosis pulmonar y puede ilustrar más claramente la influencia de los factores estimulantes en la fibrosis en comparación con los estudios previos6. La técnica descrita en este documento puede permitir a los investigadores explorar la función de los macrófagos estimulados por citoquinas potenciales en el desarrollo de la FPI.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>&#160;DMEM</td>
			<td>Life technologies Biotechnology,USA</td>
			<td>1508012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arterial indwelling needle</td>
			<td>B Braun Melsingen AG,Germany</td>
			<td>21G15G8393</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD&#160;Accuri&#160;C6 Plus</td>
			<td>Becton Dickinson,USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bleomycin</td>
			<td>Biotang, USA</td>
			<td>Ab9465</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon dioxide incubator</td>
			<td>Thermo Forma, USA</td>
			<td>Thermo Forma370</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD11b</td>
			<td>R&#38;D Systems,USA</td>
			<td>1124F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD11c</td>
			<td>R&#38;D Systems,USA</td>
			<td>N418</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture dish</td>
			<td>Thermo Forma, USA</td>
			<td>174926</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clodronate liposomes&#160;</td>
			<td>Clodronate liposomes,Netherlands</td>
			<td>CI-150-150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase A</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>10103578001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F4/80</td>
			<td>R&#38;D Systems,USA</td>
			<td>521204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon Cell Strainer</td>
			<td>Becton,Dickinson and Company, USA</td>
			<td>352340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Life technologies,USA</td>
			<td>1047571</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin Eosin&#160;</td>
			<td>Nanjing Jiancheng Technology,China</td>
			<td>06-570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LightCycler 480 PCR detection system</td>
			<td>Roche, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Murine recombinant factor IL-33</td>
			<td>Peprotech, USA</td>
			<td>210-33</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon microscope</td>
			<td>Nikon Corporation, Japan</td>
			<td>941185</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin, streptomycin</td>
			<td>Life technologies,USA</td>
			<td>877113</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffer (PBS)</td>
			<td>Guangdong Huankai Microbial Technology ,China</td>
			<td>1535882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RBC lysis buffer</td>
			<td>Beyotime Biotechnology Company,China</td>
			<td>C3702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNA Isolater</td>
			<td>Vazyme company,China</td>
			<td>R401-01-AA</td>
			<td>Total RNA extraction reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RWD Inhalation Anesthesia Machine</td>
			<td>Shenzhen Rayward Life Technology ,China</td>
			<td>R500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-automatic paraffin slicer</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td>LeicaRM2245</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYBR Premix Ex Taq</td>
			<td>Takara, Japan</td>
			<td>410800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin 0.25%</td>
			<td>Life Technologies, USA</td>
			<td>1627172</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

adoptive transfer of il-33-stimulated macrophages into bleomycin-induced mouse models to study their effect on idiopathic pulmonary fibrosis in vivo

La respuesta inflamatoria causada por la lesión pulmonar temprana es una de las causas importantes del desarrollo de la fibrosis pulmonar idiopática (FPI), que se acompaña de la activación de células inflamatorias como macrófagos y neutrófilos, así como la liberación de factores inflamatorios como TNF-α, IL-1β e IL-6. Se sabe que la inflamación temprana causada por macrófagos intersticiales pulmonares (IM) activados en respuesta a la estimulación de IL-33 desempeña un papel vital en el proceso patológico de la FPI. Este protocolo describe la transferencia adoptiva de IMs estimulados por IL-33 a los pulmones de ratones para estudiar el desarrollo de FPI. Implica el aislamiento y cultivo de MI primarios de pulmones de ratón huésped, seguido de la transferencia adoptiva de MI estimulados a los alvéolos de ratones receptores de FPI inducidos por bleomicina (BLM) (que han sido previamente agotados de macrófagos alveolares por tratamiento con liposomas clodronatos), y la evaluación patológica de esos ratones. Los resultados representativos muestran que la transferencia adoptiva de macrófagos estimulados por IL-33 agrava la fibrosis pulmonar en ratones, lo que sugiere que el establecimiento del experimento de transferencia adoptiva de macrófagos es un buen medio técnico para estudiar la patología de la FPI.

El protocolo utilizado aquí se resume en el diagrama de flujo de la Figura 1. La inhalación de liposomas de clodronato a través de la nariz (Figura 2) se utilizó para agotar los macrófagos pulmonares de ratones adultos C57BL / 6, y esto produjo un buen modelo de ratón receptor. Los IM pulmonares se aislaron de otro ratón no tratado (huésped) (Figura 3A, B) y se cultivaron in vitro. Los macrófagos ...

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Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo

Este protocolo describe el aislamiento de macrófagos intersticiales pulmonares (MI) y su transferencia adoptiva después de la estimulación de IL-33 de los alvéolos pulmonares en un modelo de ratón, lo que puede facilitar el estudio in vivo de la fibrosis pulmonar idiopática (FPI).

Transferencia adoptiva de macrófagos estimulados por IL-33 en modelos de ratón inducidos por bleomicina para estudiar su efecto sobre la fibrosis pulmonar idiopática in vivo

The inflammatory response caused by early lung injury is one of the important causes of the development of idiopathic pulmonary fibrosis (IPF), which is ...

El protocolo describe el aislamiento del IMS pulmonar y la transferencia adoptiva después de la determinación de IL-33 en un modelo de ratón, lo que puede facilitar el estudio in vivo de la fibrosis pulmonar idiopática. La técnica permite a los investigadores explorar la función de los macrófagos, simulada por citoquinas tradicionales en el desarrollo de FPI. Para comenzar, saque el frasco de liposomas de clodronato del refrigerador.Deje que se caliente durante 30 minutos a temperatura ambiente e invierta varias veces para asegurar una mezcla uniforme. Aspirar 60 microlitros de liposomas de clodronato usando una pipeta con una punta de succión estéril. Administrar el control y el fármaco gota a gota en la cavidad nasal del ratón anestesiado.Después de cada gota, asegúrese de que el ratón inhale el medicamento por completo y respire uniformemente. Después del agotamiento de los macrófagos alveolares en el ratón receptor, comience desinfectando la piel del ratón huésped anestesiado con 75% de alcohol y yodo. Use tijeras para cortar a través de la piel y exponer el tejido cardiopulmonar.Aspire 10 mililitros de PBS en una jeringa equipada con una aguja de calibre 20 e inserte la punta de la aguja en la aurícula derecha del ratón. Luego corte la vena cava inferior del ratón con tijeras quirúrgicas y perfunda manualmente el ratón con PBS a una velocidad constante de 10 a 20 mililitros por minuto hasta que el tejido pulmonar se vuelva blanco. Además, extirpe el tejido pulmonar y transfiéralo a PBS helado en una placa de cultivo.Corte el tejido pulmonar en fragmentos y agregue 15 mililitros de medio DMEM que contenga 1% de colagenasa A para aislar los macrófagos, luego incube a 100 RPM durante 30 minutos en una mesa de agitación de 37 grados centígrados. Aspire la suspensión de tejido pulmonar aproximadamente 20 veces a través de una jeringa de 10 mililitros para que esté bien. Filtre la suspensión a través de un colador de células de 40 micrómetros.Centrifugar el filtrado a 400 G durante 10 minutos. Después de desechar el sobrenadante, lisar la sangre roja con tres mililitros de tampón de lisis celular en hielo durante dos o tres minutos. Centrifugar a 150 G durante cinco minutos y resuspender el pellet celular en 10 mililitros de DMEM.Luego cuente las células usando un hemocitómetro. Sembrar las células en una placa de cultivo celular adherente de 10 centímetros e incubar durante una hora a 37 grados centígrados y 5% de dióxido de carbono para adherir los macrófagos intersticiales pulmonares a los platos. Después de una hora, aspire el sobrenadante y las células flotantes.Agregue 10 mililitros del medio de cultivo fresco y completo e incube durante más de ocho horas o durante la noche. Para estimular los macrófagos intersticiales aislados, sustituir el medio de cultivo gastado por un medio completo de interleucinas 33. También prepare una placa de control agregando PBS en lugar de interleucinas 33.Incubar las placas durante 24 horas a 37 grados centígrados y 5% de dióxido de carbono. Para disociar los macrófagos intersticiales pulmonares, trátelos con un mililitro de tripsina al 0,25% durante cinco minutos. Luego agregue tres mililitros de medio completo de cultivo fresco para calmar la digestión y centrifugar la suspensión celular para cosechar los macrófagos pulmonares.Después de contar las células, resuspender las células en PBS a una concentración final de cinco veces 10 a la quinta célula por 50 microlitros. Para comenzar la transferencia de macrófagos intersticiales, fije las extremidades del ratón receptor anestesiado en una placa vertical con cinta médica y tire suavemente de la lengua del ratón hacia un lado, usando un hisopo de algodón. Después de encender la lámpara de intubación, póngala en la garganta del ratón para ver la tráquea, que debe estar cerca de la base de la lengua.Inserte la cánula de aguja permanente en la tráquea con la lámpara de intubación de calibre 22 y el alambre guía de 0,4 milímetros de diámetro. Para finalizar la intubación, retire el alambre guía y empuje la cánula en la tráquea del ratón. Ahora inyecte 50 microlitros de la suspensión celular en el ratón receptor a través de la tráquea cuando se vea que la cánula entra en la tráquea.Después de 24 horas, administrar bleomicina a través de la tráquea para inducir fibrosis pulmonar idiopática. También administrar un volumen igual de solución salina al grupo de control. Después de 21 días, determinar el grado de gravedad de la fibrosis pulmonar mediante la evaluación de la expresión de marcadores de fibrosis y las puntuaciones de Ashcroft.La tinción HE mostró que la transferencia adoptiva de macrófagos estimulados por interleucinas 33 exacerbó el grado de destrucción del tejido pulmonar y aumentó la agregación de fibroblastos en los ratones estimulados por bleomicina, en comparación con el control. El aumento en la puntuación de Ashcroft también ilustra el grado de fibrosis pulmonar. Los niveles de expresión de ARNm de alfa SMA y fibronectina en los tejidos pulmonares del ratón receptor que contenía macrófagos intersticiales estimulados con interleucinas 33 transferidas adoptivamente y tratados con bleomicina fueron más altos, en comparación con los de los ratones de tipo salvaje tratados con BLM.Se deben ingresar inmediatamente 500 microlitros de aire en los pulmones con una jeringa de un milímetro para garantizar que la suspensión celular en la cánula pueda ingresar completamente al tejido pulmonar.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Adoptive Transfer of IL-33-Stimulated Macrophages into Bleomycin-Induced Mouse Models to Study Their Effect on Idiopathic Pulmonary Fibrosis In Vivo

Experimental Metastasis and CTL Adoptive Transfer Immunotherapy Mouse Model

La metástasis experimentales y CTL Modelo inmunoterapia adoptiva de transferencia de ratón

Experimental metastasis mouse model is a simple and yet physiologically relevant metastasis model. The tumor cells are injected intravenously (i.v) into ...

Investigación

Inmunología e Infección

Overcoming Unresponsiveness in Experimental Autoimmune Encephalomyelitis (EAE) Resistant Mouse Strains by Adoptive Transfer and Antigenic Challenge

Overcoming Unresponsiveness in Experimental Autoimmune Encephalomyelitis EAE Resistant Mouse Strains by Adoptive Transfer and Antigenic Challenge

Superar la falta de respuesta en encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) cepas de ratones resistentes a través de transferencia adoptiva y la estimulación antigénica

Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) is an inflammatory disease of the central nervous system (CNS) and has been used as an animal model for ...

Isolation, Purification and Labeling of Mouse Bone Marrow Neutrophils for Functional Studies and Adoptive Transfer Experiments

Aislamiento, Purificación y Etiquetado de neutrófilos de médula ósea de ratón de Estudios funcionales y experimentos de transferencia adoptivos

Neutrophils are critical effector cells of the innate immune system. They are rapidly recruited at sites of acute inflammation and exert protective or ...

Use of Shigella flexneri to Study Autophagy-Cytoskeleton Interactions

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El uso de<em&gt; Flexneri Shigella</em&gt; Para estudiar las interacciones Autophagy Citoesqueleto

Shigella flexneri is an intracellular pathogen that can escape from phagosomes to reach the cytosol, and polymerize the host actin cytoskeleton to promote ...

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

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La inducción de la inflamación intestinal murino por transferencia adoptiva de Efector CD4<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; Alta</sup&gt; T células en ratones inmunodeficientes

There are many different animal models available for studying the pathogenesis of human inflammatory bowel diseases (IBD), each with its own advantages ...

Generation of Lymphocytic Microparticles and Detection of their Proapoptotic Effect on Airway Epithelial Cells

Generación de linfocítica micropartículas y detección de su efecto proapoptótico sobre las células epiteliales de la vía aérea

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Intranasal Administration of Recombinant Influenza Vaccines in Chimeric Mouse Models to Study Mucosal Immunity

Administración intranasal de vacunas contra la influenza recombinante en modelos de ratón quimérico para el Estudio de la mucosa Inmunidad

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Intra-tracheal Administration of Haemophilus influenzae in Mouse Models to Study Airway Inflammation

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Administración intra-traqueal de<em&gt; Haemophilus influenzae</em&gt; En modelos de ratón para estudiar las vías respiratorias inflamación

Here, we describe a detailed procedure to efficiently and directly deliver Haemophilus influenzae into the lower respiratory tracts of mice. We ...

Legionella pneumophila Outer Membrane Vesicles: Isolation and Analysis of Their Pro-inflammatory Potential on Macrophages

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Legionella pneumophila exterior vesículas de membrana: Aislamiento y análisis de su potencial pro-inflamatoria en los macrófagos

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An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

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Un modelo de ratón IL-8 transgénicamente transgéni-<em&gt; In Vivo</em&gt; Monitoreo a Largo Plazo de las Respuestas Inflamatorias

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