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04:04 min
January 20th, 2023
DOI :
10.3791/64825-v
Chapters
0:05
Introduction
0:44
Slide Preparation
1:59
Timelapse Fluorescence Microscopy
2:25
Results: Visualizing Transposon Activity in Live E. coli Cells
3:30
Conclusion
Transcript
このプロトコルにより、バルク挙動を調べるのではなく、単一細胞ベースで切除統計を定量化することができます。このレベルでは、切除する細胞と切除しない細胞のTnpAおよびTnpBレベルなど、個々の細胞の挙動を経時的に追跡できるため、たとえば、特定された突然変異イベントが成長率に及ぼす影響を測定できます。この方法は、生細胞の突然変異動態を測定するための簡単で低コストな方法です。
一般的なアプローチは、生細胞蛍光イメージングを必要とするあらゆるシステムに適用できます。M63を電子レンジで
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Summary
アクセサリータンパク質TnpBが個々の生きた 大腸菌 細胞の転位のダイナミクスにどのように影響するかを定量化するために、ライブリアルタイムイメージングを実行するためのプロトコルが概説されています。
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