Name: establishment and culture of patient-derived breast organoids
Uploaded: 2023-02-17T13:20:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Establishment and Culture of Patient-Derived Breast Organoids at JoVE.com

Мы хотели бы поблагодарить членов лаборатории Спектора за критические дискуссии на протяжении всей этой работы. Мы благодарим Нормана Сакса и Ханса Клеверса (Hans Clevers) из Института Хубрехта, Нидерланды за то, что они изначально предоставили нам свой протокол культивирования органоидов. Мы выражаем признательность Совместным ресурсам по гистологии и микроскопии Онкологического центра CSHL за услуги и техническую экспертизу (NCI 2P3OCA45508). Мы благодарим доктора Цин Гао за помощь в подготовке гистологического образца. Мы благодарны за поддержку доктору Карен Кострофф (Northwell Health) за предоставление пациентам образцов опухолей. Мы также высоко ценим усилия команды Northwell Health Biobanking по сбору образцов и благодарим пациентов и их семьи за пожертвование тканей для исследований. Это исследование было поддержано CSHL / Northwell Health (D.L.S.), NCI 5P01CA013106-Project 3 (D.L.S.) и Leidos Biomedical HHSN26100008 (Дэвид Тувесон и D.L.S.).

Резекции опухолей у пациентов с раком молочной железы вместе с дистальными и прилегающими нормальными тканями были получены от Northwell Health в соответствии с протоколами Институционального наблюдательного совета IRB-03-012 и IRB 20-0150 и с письменного информированного согласия пациентов.
<p class=...

<ol>
	<li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Fuchs, H. E., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+statistics,+2022.">Cancer statistics, 2022.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 72 (1), 7-33 (2022).</li><li>Greenwalt, I., Zaza, N., Das, S., Li, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precision+Medicine+and+Targeted+Therapies+in+Breast+Cancer.">Precision Medicine and Targeted Therapies in Breast Cancer.</a> Surgical Oncology Clinics of North America. 29 (1), 51-62 (2020).</li><li>di Fiore, P. P., Pierce, J. H., Kraus, M. H., Segatto, O., King, C. R., Aaronson, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=erbB-2+is+a+potent+oncogene+when+overexpressed+in+NIH/3T3+cells.">erbB-2 is a potent oncogene when overexpressed in NIH/3T3 cells.</a> Science. 237 (4811), 178 (1987).</li><li>Hortobagyi, G. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breast.">Breast.</a> AJCC Cancer Staging Manual. 4 (4), 589-636 (2017).</li><li>Goutsouliak, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Towards+personalized+treatment+for+early+stage+HER2-positive+breast+cancer.">Towards personalized treatment for early stage HER2-positive breast cancer.</a> Nature reviews. Clinical oncology. 17 (4), 233 (2020).</li><li>Tuveson, D., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+modeling+meets+human+organoid+technology.">Cancer modeling meets human organoid technology.</a> Science. 364 (6444), 952-955 (2019).</li><li>Huang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PDX-derived+organoids+model+in+vivo+drug+response+and+secrete+biomarkers.">PDX-derived organoids model in vivo drug response and secrete biomarkers.</a> JCI Insight. 5 (21), (2020).</li><li>Wood, L. D., Ewald, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids+in+cancer+research:+a+review+for+pathologist-scientists.">Organoids in cancer research: a review for pathologist-scientists.</a> The Journal of Pathology. 254 (4), 395-404 (2021).</li><li>Simian, M., Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids:+A+historical+perspective+of+thinking+in+three+dimensions.">Organoids: A historical perspective of thinking in three dimensions.</a> Journal of Cell Biology. 216 (1), 31-40 (2017).</li><li>Sumbal, J., Budkova, Z., Traustad&#243;ttir, G. &. #. 1. 9. 3. ;., Koledova, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammary+Organoids+and+3D+Cell+Cultures:+Old+Dogs+with+New+Tricks.">Mammary Organoids and 3D Cell Cultures: Old Dogs with New Tricks.</a> Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia. 25 (4), 273-288 (2020).</li><li>Bhatia, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patient-derived+triple+negative+breast+cancer+organoids+provide+robust+model+systems+that+recapitulate+tumor+intrinsic+characteristics.">Patient-derived triple negative breast cancer organoids provide robust model systems that recapitulate tumor intrinsic characteristics.</a> Cancer Research. , (2022).</li><li>Huang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ductal+pancreatic+cancer+modeling+and+drug+screening+using+human+pluripotent+stem+cell&#8211;+and+patient-derived+tumor+organoids.">Ductal pancreatic cancer modeling and drug screening using human pluripotent stem cell&#8211; and patient-derived tumor organoids.</a> Nature Medicine. 21 (11), 1364-1371 (2015).</li><li>Bleijs, M., van de Wetering, M., Clevers, H., Drost, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenograft+and+organoid+model+systems+in+cancer.">Xenograft and organoid model systems in cancer.</a> The EMBO Journal. 38 (15), (2019).</li><li>Hendriks, D., Clevers, H., Artegiani, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CRISPR-Cas+Tools+and+Their+Application+in+Genetic+Engineering+of+Human+Stem+Cells+and+Organoids.">CRISPR-Cas Tools and Their Application in Genetic Engineering of Human Stem Cells and Organoids.</a> Cell Stem Cell. 27 (5), 705-731 (2020).</li><li>Dekkers, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+Breast+Cancer+Using+CRISPR-Cas9&#8211;Mediated+Engineering+of+Human+Breast+Organoids.">Modeling Breast Cancer Using CRISPR-Cas9&#8211;Mediated Engineering of Human Breast Organoids.</a> JNCI: Journal of the National Cancer Institute. 112 (5), 540-544 (2020).</li><li>Drost, J., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids+in+cancer+research.">Organoids in cancer research.</a> Nature Reviews Cancer. 18 (7), 407-418 (2018).</li><li>Ooft, S. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patient-derived+organoids+can+predict+response+to+chemotherapy+in+metastatic+colorectal+cancer+patients.">Patient-derived organoids can predict response to chemotherapy in metastatic colorectal cancer patients.</a> Science Translational Medicine. 11 (513), 2574 (2019).</li><li>Grossman, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoid+Sensitivity+Correlates+with+Therapeutic+Response+in+Patients+with+Pancreatic+Cancer.">Organoid Sensitivity Correlates with Therapeutic Response in Patients with Pancreatic Cancer.</a> Clinical Cancer Research. 28 (4), 708-718 (2022).</li><li>Ganesh, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rectal+cancer+organoid+platform+to+study+individual+responses+to+chemoradiation.">A rectal cancer organoid platform to study individual responses to chemoradiation.</a> Nature Medicine. 25 (10), 1607-1614 (2019).</li><li>Yao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patient-Derived+Organoids+Predict+Chemoradiation+Responses+of+Locally+Advanced+Rectal+Cancer.">Patient-Derived Organoids Predict Chemoradiation Responses of Locally Advanced Rectal Cancer.</a> Cell Stem Cell. 26 (1), 17-26 (2020).</li><li>. HCMI Catalog Available from: <a target="_blank" href="https://hcmi-searchable-catalog.ni.nih.gov/">https://hcmi-searchable-catalog.ni.nih.gov/</a> (2022)</li><li>. Search ATCC Available from: <a target="_blank" href="https://www.atcc.org/search#q=hcm&amp;sort=relevancy&amp;numberOfResults=24">https://www.atcc.org/search#q=hcm&amp;sort=relevancy&amp;numberOfResults=24</a> (2022)</li><li>Rosenbluth, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoid+cultures+from+normal+and+cancer-prone+human+breast+tissues+preserve+complex+epithelial+lineages.">Organoid cultures from normal and cancer-prone human breast tissues preserve complex epithelial lineages.</a> Nature Communications. 11 (1), (2020).</li><li>Pal, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocrine+Therapy-Resistant+Breast+Cancer+Cells+Are+More+Sensitive+to+Ceramide+Kinase+Inhibition+and+Elevated+Ceramide+Levels+Than+Therapy-Sensitive+Breast+Cancer+Cells.">Endocrine Therapy-Resistant Breast Cancer Cells Are More Sensitive to Ceramide Kinase Inhibition and Elevated Ceramide Levels Than Therapy-Sensitive Breast Cancer Cells.</a> Cancers. 14 (10), 2380 (2022).</li><li>Ding, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+cell+heterogeneity+and+evolution+of+breast+cancer+bone+metastasis+and+organoids+reveals+therapeutic+targets+for+precision+medicine.">Single cell heterogeneity and evolution of breast cancer bone metastasis and organoids reveals therapeutic targets for precision medicine.</a> Annals of Oncology. , (2022).</li><li>Sudhan, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperactivation+of+TORC1+Drives+Resistance+to+the+Pan-HER+Tyrosine+Kinase+Inhibitor+Neratinib+in+HER2-Mutant+Cancers.">Hyperactivation of TORC1 Drives Resistance to the Pan-HER Tyrosine Kinase Inhibitor Neratinib in HER2-Mutant Cancers.</a> Cancer Cell. 37 (2), 183-199 (2020).</li><li>Dijkstra, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+Tumor-Reactive+T+Cells+by+Co-culture+of+Peripheral+Blood+Lymphocytes+and+Tumor+Organoids.">Generation of Tumor-Reactive T Cells by Co-culture of Peripheral Blood Lymphocytes and Tumor Organoids.</a> Cell. 174 (6), 1586-1598 (2018).</li><li>Neal, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoid+Modeling+of+the+Tumor+Immune+Microenvironment.">Organoid Modeling of the Tumor Immune Microenvironment.</a> Cell. 175 (7), 1972-1988 (2018).</li><li>Tsai, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+primary+human+pancreatic+cancer+organoids,+matched+stromal+and+immune+cells+and+3D+tumor+microenvironment+models.">Development of primary human pancreatic cancer organoids, matched stromal and immune cells and 3D tumor microenvironment models.</a> BMC Cancer. 18 (1), 1-13 (2018).</li><li>&#214;hlund, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+populations+of+inflammatory+fibroblasts+and+myofibroblasts+in+pancreatic+cancer.">Distinct populations of inflammatory fibroblasts and myofibroblasts in pancreatic cancer.</a> Journal of Experimental Medicine. 214 (3), 579-596 (2017).</li><li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer-Associated+Fibroblasts+Provide+a+Stromal+Niche+for+Liver+Cancer+Organoids+That+Confers+Trophic+Effects+and+Therapy+Resistance.">Cancer-Associated Fibroblasts Provide a Stromal Niche for Liver Cancer Organoids That Confers Trophic Effects and Therapy Resistance.</a> Cellular and Molecular Gastroenterology and Hepatology. 11 (2), 407-431 (2021).</li><li>Puschhof, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intestinal+organoid+cocultures+with+microbes.">Intestinal organoid cocultures with microbes.</a> Nature Protocols. 16 (10), 4633-4649 (2021).</li><li>Puschhof, J., Pleguezuelos-Manzano, C., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids+and+organs-on-chips:+Insights+into+human+gut-microbe+interactions.">Organoids and organs-on-chips: Insights into human gut-microbe interactions.</a> Cell Host &amp; Microbe. 29 (6), 867-878 (2021).</li><li>Chan, I. S., Ewald, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoid+Co-culture+Methods+to+Capture+Cancer+Cell&#8211;Natural+Killer+Cell+Interactions.">Organoid Co-culture Methods to Capture Cancer Cell&#8211;Natural Killer Cell Interactions.</a> Methods in Molecular Biology. 2463, 235-250 (2022).</li><li>Chatterjee, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paracrine+Crosstalk+between+Fibroblasts+and+ER++Breast+Cancer+Cells+Creates+an+IL1&#946;-Enriched+Niche+that+Promotes+Tumor+Growth.">Paracrine Crosstalk between Fibroblasts and ER+ Breast Cancer Cells Creates an IL1&#946;-Enriched Niche that Promotes Tumor Growth.</a> iScience. 19, 388 (2019).</li><li>Sachs, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Living+Biobank+of+Breast+Cancer+Organoids+Captures+Disease+Heterogeneity.">A Living Biobank of Breast Cancer Organoids Captures Disease Heterogeneity.</a> Cell. 172 (1-2), 373-386 (2018).</li><li>. HUB Organoids: Patient in the lab Available from: <a target="_blank" href="https://www.huborganoids.nl">https://www.huborganoids.nl</a> (2022)</li><li>Dekkers, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+culture,+genetic+manipulation+and+xenotransplantation+of+human+normal+and+breast+cancer+organoids.">Long-term culture, genetic manipulation and xenotransplantation of human normal and breast cancer organoids.</a> Nature Protocols. 16 (4), 1936-1965 (2021).</li><li>Guillen, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+human+breast+cancer-derived+xenograft+and+organoid+platform+for+drug+discovery+and+precision+oncology.">A human breast cancer-derived xenograft and organoid platform for drug discovery and precision oncology.</a> Nature Cancer. 3 (2), 232 (2022).</li><li>. PDX Portal Available from: <a target="_blank" href="https://pdxportal.research.bcm.edu/pdxportal/;jsessionid=3rrpefh3qlisqgbbq4vywfywc1dvn2vwaedbnizs.pdxportal?dswid=8217">https://pdxportal.research.bcm.edu/pdxportal/;jsessionid=3rrpefh3qlisqgbbq4vywfywc1dvn2vwaedbnizs.pdxportal?dswid=8217</a> (2022)</li><li>Veeman, M. T., Slusarski, D. C., Kaykas, A., Louie, S. H., Moon, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+Prickle,+a+Modulator+of+Noncanonical+Wnt/Fz+Signaling,+Regulates+Gastrulation+Movements.">Zebrafish Prickle, a Modulator of Noncanonical Wnt/Fz Signaling, Regulates Gastrulation Movements.</a> Current Biology. 13 (8), 680-685 (2003).</li><li>Chen, X., Prywes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serum-Induced+Expression+of+the+cdc25A+Gene+by+Relief+of+E2F-Mediated+Repression+.">Serum-Induced Expression of the cdc25A Gene by Relief of E2F-Mediated Repression .</a> Molecular and Cellular Biology. 19 (7), 4695-4702 (1999).</li><li>Sflomos, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atlas+of+lobular+breast+cancer+models:+Challenges+and+strategic+directions.">Atlas of lobular breast cancer models: Challenges and strategic directions.</a> Cancers. 13 (21), 5396 (2021).</li><li>Sharick, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+Heterogeneity+in+Patient+Tumor-Derived+Organoids+by+Primary+Site+and+Drug+Treatment.">Metabolic Heterogeneity in Patient Tumor-Derived Organoids by Primary Site and Drug Treatment.</a> Frontiers in Oncology. 10, 1-17 (2020).</li></ol>

Наша лаборатория успешно использовала вышеуказанные протоколы для создания органоидов из наивных опухолевых резекций или соскобов. Мы также использовали этот протокол для разработки нормальных органоидов из ткани молочной железы, полученной с помощью восстановительной маммоп?...

Рак молочной железы (РМЖ) является наиболее часто встречающимся злокачественным новообразованием у женщин: по оценкам, в 2022 году в Соединенных Штатах будет диагностировано 287 850 новых случаев1. Несмотря на недавние достижения в области раннего выявления с ежегодными скринингами, таргетной терапией и лучшим пониманием генетической предрасположенности, он является второй по значимости причиной смерти от рака у женщин в Соединенных Штатах, с > 40 000 смертей ежегодно от рака молочной железы1. Рак молочной железы в настоящее время классифицируется на несколько подтипов на основе гистопатологической и молекулярной оценки первичной опухоли. Лучшая стратификация подтипов улучшила результаты лечения пациентов с вариантами лечения для конкретных подтипов2. Например, идентификация HER2 как протоонкогена3 привела к разработке трастузумаба, который сделал этот высокоагрессивный подтип управляемым у большинства пациентов4. Дальнейшие исследования генетики и транскриптомики этого сложного заболевания с учетом специфики пациента помогут в разработке и прогнозировании более эффективных персонализированных схем лечения для конкретного пациента 2,5. Органоиды, полученные от пациентов (PDO), являются многообещающей новой моделью для получения информации о раке на молекулярном уровне, выявления новых мишеней или биомаркеров и разработки новых стратегий лечения 6,7,8.
PDO представляют собой многоклеточные трехмерные (3D) структуры, полученные из недавно резецированных первичных образцов тканей 8,9. Они выращиваются трехмерно, будучи встроенными в гидрогелевую матрицу, обычно состоящую из комбинации белков внеклеточного матрикса (ECM), и, следовательно, могут использоваться для изучения взаимодействий опухолевой клетки с ECM. PDO представляют разнообразие пациентов и повторяют клеточную гетерогенность и генетические особенности опухоли10,11,12. Будучи моделями in vitro, они позволяют проводить генетические манипуляции и высокопроизводительные скрининги лекарств13,14,15. Кроме того, PDO могут быть правдоподобно использованы для оценки чувствительности пациента к лекарственным средствам и стратегий лечения параллельно с клиникой и помогают прогнозировать результаты лечения пациентов16,17,18. Помимо химиотерапии, некоторые органоидные модели также использовались для изучения индивидуальных реакций пациентов на химиолучевую терапию19,20. Учитывая многообещающую применимость PDO для исследований и клинического использования, Национальный институт рака инициировал международный консорциум The Human Cancer Models Initiative (HCMI)21 для создания и предоставления этих новых моделей рака, полученных из опухолей. Многие из органоидных моделей различных типов рака, разработанных с помощью HCMI, доступны через Американскую коллекцию типовых культур (ATCC)22.
Было показано, что нормальные органоиды молочной железы состоят из различных популяций эпителиальных клеток, присутствующих в молочной железе 11,23, и, таким образом, служат отличными моделями для изучения основных биологических процессов, анализа мутаций-драйверов, вызывающих онкогенез, и для исследований происхождения раковых клеток 6,15 . Органоидные модели опухолей молочной железы были использованы для идентификации новых мишеней, которые обнадеживают перспективы для разработки новых методов лечения, особенно для резистентных опухолей24,25,26. Используя ксенотрансплантат пациента (PDX) и соответствующие модели органоидов, полученных из PDX (PDxO) резистентных к лечению опухолей молочной железы, Guillen et al. показали, что органоиды являются мощными моделями для точной медицины, которые могут быть использованы для параллельной оценки реакции на лекарства и принятия решений о прямой терапии28. Кроме того, разработка новых методов совместного культивирования ЗОП с различными иммунными клетками27,28,29, фибробластами 30,31 и микробами 32,33 дает возможность изучить влияние микроокружения опухоли на прогрессирование рака. В то время как многие такие методы совместного культивирования активно внедряются для PDO, полученных из опухолей поджелудочной железы или колоректальных опухолей, аналогичные установленные методы совместного культивирования PDO молочной железы были зарегистрированы только для естественных клеток-киллеров34 и фибробластов35.
Первый биобанк из >100 органоидов, полученных от пациентов, представляющих различные подтипы рака молочной железы, был разработан группой Ханса Клеверса36,37. В рамках этих усилий группа Clevers также разработала первую сложную питательную среду для роста органоидов молочной железы, которая в настоящее время широко используется36. Последующее исследование предоставило всесторонний отчет о создании и культивировании PDO молочной железы и органоидных ксенотрансплантатов, полученных от пациентов (PDOX)38. Лаборатория Welm разработала большую коллекцию моделей BC PDX и PDxO, которые культивируются в сравнительно более простой питательной среде, содержащей эмбриональную бычью сыворотку (FBS) и меньшее количество факторов роста39,40. Мы независимо разработали и охарактеризовали большой массив наивных моделей органоидов рака молочной железы11 и участвовали в разработке моделей BC PDO в рамках инициативыHCMI 21. Здесь мы стремимся предоставить практическое руководство с подробным описанием методологии, используемой нами при создании систем моделей органоидов молочной железы, полученных от пациентов.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>15 mL conical tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>525-1068</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>175 cm2 tissue culture flask</td>
			<td>VWR (Corning)</td>
			<td>29185-308</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>37 &#176;C bead bath</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>37 &#176;C CO2 incubator</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL conical tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>525-1077</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL vacuum filtration system (0.22 &#181;m Filter)</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>SCGP00525</td>
			<td>SCGP00525</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>500 mL Rapid-Flow Filter Unit, 0.2 &#181;m aPES membrane, 75 mm diameter</td>
			<td>Nalgene</td>
			<td>566-0020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well culture plates&#160;</td>
			<td>Greiner Cellstar</td>
			<td>82050-842</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75 cm2 tissue culture flask</td>
			<td>VWR (Corning)</td>
			<td>29185-304</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well opaque plates</td>
			<td>Corning</td>
			<td>353296</td>
			<td>For CTG assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A83-01</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>2939</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Advanced DMEM/F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12634-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B-27 supplement</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>12587010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BioTek&#160;Synergy H4 Hybrid Microplate Reader</td>
			<td>Fisher Scientific (Agilent)</td>
			<td></td>
			<td>For dual luciferase assay and CTG assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA fraction V (7.5%)</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>15260037</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Titer-Glo (CTG) Reagent</td>
			<td>Promega</td>
			<td>G9683</td>
			<td>luminescent cell viability assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge&#160;</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5804</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase from Clostridium histolyticum</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>C5138</td>
			<td>Type IV</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryolabels</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>DTCR-1000</td>
			<td>Direct Thermal Cryo-Tags, White, 1.05 x 0.5&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryovials&#160;</td>
			<td>Simport Scientific Inc.</td>
			<td>T311-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Countess 3 Automated Cell Counter</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>AMQAX2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM, high glucose, pyruvate</td>
			<td>Thermo Fisher (Gibco)</td>
			<td>11995040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dual Luciferase Reporter Assay System</td>
			<td>Promega</td>
			<td>E1910</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Phosphate Buffered Saline (1X)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190-144</td>
			<td>DPBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epidermal growth factor (hEGF)</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>AF-100-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>35-010-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGF-10 (human)</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-26</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGF-7/KGF (human)</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-19</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutaMax</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>35050061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEK293T cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-3216&#160;</td>
			<td>For TOPFlash Assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEK293T-HA-Rspondin1-Fc cells</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>3710-001-01</td>
			<td>Cultrex HA-R-Spondin1-Fc 293T Cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>15630-080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heregulin&#946;-1 (human)</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel Growth Factor Reduced (GFR) Basement Membrane Matrix</td>
			<td>Corning</td>
			<td>356231</td>
			<td>Phenol-red free, LDEV-free; basement membrane matrix</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mr. Frosty Cell Freezing Container</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>5100-0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mycoplasma detection kit</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>LT07-418</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-acetyl-l-cysteine</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>A9165</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nalgene Rapid-Flow Sterile Disposable Filter Units with PES Membranes</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>166-0045&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nicotinamide</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>N0636</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Noggin (human)</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>120-10C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P1000, P200, P10 pipettes with tips</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>p38 MAPK inhibitor (p38i) SB 202190</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>S7067</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>transparent film</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plasmid1: pRL-SV40P</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>27163</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plasmid2: M51 Super 8x FOPFlash</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>12457</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plasmid3: M50 Super 8x TOPFlash</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>12456</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pluriStrainer 200 &#181;m</td>
			<td>pluriSelect</td>
			<td>43-50200-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primocin</td>
			<td>Invivogen</td>
			<td>ANT-PM-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recovery Cell Culture Freezing Medium</td>
			<td>Thermo Fisher (Gibco)</td>
			<td>12648-010</td>
			<td>cell freezing medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red Blood Cell lysis buffer</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>11814389001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>R-spondin conditioned media</td>
			<td>In-house or commercial from Peprotech</td>
			<td>120-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel (No.10)</td>
			<td>Sklar Instruments</td>
			<td>Jun-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaker (Incu-shaker Mini)</td>
			<td>Benchmark</td>
			<td>H1001-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TGF-&#946; receptor inhibitor A 83-01</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>2939</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue Stain (0.4%)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15250-061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TrypLE Express Enzyme (1X), phenol red</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>12605028</td>
			<td>cell dissociation reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-tremeGENE 9 DNA transfection reagent</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>6365779001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Y-27632 Dihydrochloride (RhoKi)</td>
			<td>Abmole Bioscience</td>
			<td>Y-27632</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeocin</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>R25001</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishment and culture of patient-derived breast organoids

Рак молочной железы является сложным заболеванием, которое было классифицировано на несколько различных гистологических и молекулярных подтипов. Органоиды опухолей молочной железы, полученные от пациентов, разработанные в нашей лаборатории, состоят из смеси нескольких популяций клеток, полученных из опухоли, и, таким образом, представляют собой лучшее приближение к разнообразию опухолевых клеток и среде, чем установленные 2D-линии раковых клеток. Органоиды служат идеальной моделью in vitro , позволяющей взаимодействовать между клетками и внеклеточным матриксом, которые, как известно, играют важную роль в межклеточных взаимодействиях и прогрессировании рака. Органоиды, полученные от пациентов, также имеют преимущества перед мышиными моделями, поскольку они имеют человеческое происхождение. Кроме того, было показано, что они повторяют геномную, транскриптомную, а также метаболическую гетерогенность опухолей пациентов; Таким образом, они способны представлять сложность опухоли, а также разнообразие пациентов. В результате они готовы предоставить более точную информацию об обнаружении и проверке мишеней, а также анализах чувствительности к лекарственным средствам. В этом протоколе мы предоставляем подробную демонстрацию того, как органоиды молочной железы, полученные от пациента, создаются из резецированных опухолей молочной железы (раковых органоидов) или ткани молочной железы, полученной из редуктивной маммопластики (нормальные органоиды). Затем следует всесторонний отчет о 3D-культуре органоидов, расширении, прохождении, замораживании, а также размораживании культур органоидов молочной железы, полученных от пациентов.

Мы создали биобанк органоидов опухолей молочной железы, полученных от пациентов, включающий различные подтипы11. Кроме того, мы установили несколько нормальных органоидных линий молочной железы, полученных из образцов тканей редуктивной маммопластики или смежной/дисталь...

Watch this Scientific Journal Video about Establishment and Culture of Patient-Derived Breast Organoids at JoVE.com

Establishment and Culture of Patient-Derived Breast Organoids

Здесь приведен подробный протокол для определения органоидов молочной железы человека из резекций опухоли молочной железы пациента или нормальной ткани молочной железы. Протокол содержит исчерпывающие пошаговые инструкции по культивированию, замораживанию и размораживанию органоидов молочной железы, полученных от пациентов.

Создание и культивирование органоидов молочной железы пациента

Breast cancer is a complex disease that has been classified into several different histological and molecular subtypes. Patient-derived breast tumor ...

Органоиды, полученные от пациента человека, представляют собой трехмерные модельные системы in vitro, которые представляют как разнообразие пациентов, так и клеточную гетерогенность опухолей. Этот протокол и видеодемонстрация представляют собой подробное практическое руководство по установлению опухоли молочной железы пациента и нормальных органоидов. Органоиды опухолей молочной железы, полученные от пациентов, являются захватывающими новыми моделями, но их трудно установить.Всеобъемлющий протокол, который мы здесь приводим, должен помочь в подготовке исследователей, пытающихся разработать органоиды молочной железы, и ознакомить их с ожидаемыми проблемами. Каждая линия PDO, полученная от другого пациента, уникальна по морфологии и скорости роста. В отличие от двух 2D-систем клеточных линий, органоиды лучше растут при высокой плотности, что обеспечивает лучшее межклеточное взаимодействие.Продемонстрирует процедуру Диша Аггарвал, аспирант моей лаборатории. Для начала разморозьте бутылку с матрицей базальной мембраны на льду или на ночь при температуре четыре градуса Цельсия. Перенесите резецированную ткань в 10-сантиметровую стерильную чашку Петри.Осмотрите ткань макроскопически и отметьте, кажется ли она морфологически жирной, васкуляризированной или некротической. Кроме того, запишите размер и форму ткани и сфотографируйте ткань с линейкой в поле зрения. Стерильным скальпелем No 10 измельчите ткань на мелкие кусочки и переложите в коническую трубку объемом 50 миллилитров.Добавьте 10 миллилитров по два миллиграмма на миллилитр раствора коллагеназы для внутривенного вливания и запечатайте пробирку. Поместите трубку на орбитальный шейкер при температуре 37 градусов Цельсия при 140 об/мин на 30–90 минут под углом 30 градусов. Во время инкубации поместите аликвоту полной среды для предварительного нагрева при температуре 37 градусов Цельсия на бусину или водяную баню.Каждые 15 минут ресуспендируйте ткань, энергично перемешивая вверх и вниз с помощью пятимиллилитровой стерильной серологической пипетки с предварительно нанесенным покрытием. Отслеживал диссоциацию с течением времени, наблюдая за пробиркой под микроскопом при 5-кратном или более увеличении. После того, как ткань диссоциирована, центрифугируйте при 400 г в течение пяти минут, аспирируйте надосадочную жидкость и добавьте 10 миллилитров AdDF + Опять же, центрифугируйте и осторожно аспирируйте надосадочную жидкость, так как тканевые гранулы иногда могут быть рыхлыми.Если тканевая гранула частично красная, добавьте два миллилитра буфера для лизиса эритроцитов и инкубируйте в течение пяти минут при комнатной температуре. После инкубации добавьте 10 миллилитров AdDF+ в пробирку, центрифугу при 400 г в течение пяти минут и выбросьте надосадочную жидкость. Ресуспендируют гранулы в 50-300 микролитрах неразбавленной матрицы холодной базальной мембраны и тщательно перемешивают пипеткой, чтобы избежать образования пузырьков.Используя шестилуночную тарелку для культивирования тканей, которую предварительно нагревают в инкубаторе в течение ночи, накладывают 300 микролитров матричного купола базальной мембраны, содержащего органоиды в каждой лунке. Оставьте пластину нетронутой в вытяжке на пять минут, прежде чем поместить ее при температуре 37 градусов Цельсия на 20–30 минут, чтобы купол матрицы фундаментальной мембраны полностью затвердел. В конце инкубации добавьте три миллилитра предварительно подогретой полной среды по каплям в каждую лунку и инкубируйте при температуре 37 градусов Цельсия и 5% углекислого газа.После инкубации сделайте снимки органоидов с помощью объектива 5X на инвертированном светлопольном микроскопе. Поднимите матричный купол базальной мембраны в среду в лунке с помощью клеточного скребка или наконечника пипетки объемом один миллилитр. Используя предварительно покрытый наконечник пипетки, перенесите плавающий купол органоидов со средой в коническую трубку объемом 15 или 50 миллилитров, в зависимости от количества собираемых лунок.Затем добавьте DPBS, чтобы увеличить объем как минимум до пяти миллилитров. Крутите тюбики при 400 г в течение пяти минут. Матрикс базальной мембраны с органоидами образует слой на дне.После аспирации надосадочной жидкости добавьте от 5 до 20 миллилитров DPBS, в зависимости от количества лунок, объединенных в трубку. Смешайте гранулы матричной матрицы базоидной мембраны органоида в DBPS с помощью стерильной одноразовой пипетки с предварительно нанесенным покрытием. Снова центрифугу и выбросьте надосадочную жидкость.Используя наконечник пипетки с покрытием, добавьте реагент для диссоциации клеток, в три раза превышающий объем матрицы базальной мембраны, и ресуспендируйте органоиды. Поместите трубку на орбитальный шейкер при температуре 37 градусов Цельсия при 140 об/мин на 8–15 минут под углом. Контролируйте пробирку, наблюдая за ней под микроскопом каждые пять минут, чтобы убедиться, что органоиды разбиты на более мелкие кластеры.Добавьте AdDF+ в объеме, равном или большем, чем реагент для диссоциации клеток, и пипетку для смешивания органоидов. Отжим при 400 г в течение пяти минут до получения органоидной гранулы. Как только будет получена белая органоидная гранула без нерастворенной матрицы базальной мембраны, выбросьте надосадочную жидкость и ресуспендируйте гранулу в одном миллилитре AdDF + Доведите объем до 10 миллилитров с помощью AdDF + Открутите трубку для стадии промывки и выбросьте надосадочную жидкость.Добавьте необходимое количество матрицы базальной мембраны к переваренным органоидам на основе соответствующего коэффициента расщепления. Перемешайте, аккуратно пипетируя вверх и вниз, чтобы избежать образования пузырьков, и сразу же положите на лед. Пластинчатые 300-микролитровые купола органоидов, ресуспендированные в матрице базальной мембраны в предварительно разогретой шестилуночной пластине.Оставьте пластину нетронутой в колпаке на пять минут, прежде чем поместить ее при температуре 37 градусов Цельсия с 5% углекислого газа на 20-30 минут, чтобы купола затвердели. По окончании инкубации по три миллилитра предварительно подогретой комплектуйте среду в каждую лунку и поместите тарелку обратно в инкубатор. Добавляйте свежую полную среду каждые пять-семь дней.Различные органоидные линии опухолей молочной железы, полученные от пациентов, различаются по морфологии и скорости роста. Нормальные органоиды молочной железы и несколько ранних протоковых карцином в органоидах, полученных из C2, напоминали нормальную структуру молочной железы с центральным просветом, окруженным протоковыми клетками. Органоиды, полученные из инвазивной лобулярной карциномы, имеют тенденцию образовывать слабо прикрепленные структуры, похожие на виноградные грозди.Между тем, органоиды, полученные из инвазивных протоковых карцином, имеют тенденцию образовывать плотные, большие и круглые органоиды. Рост органоидов измеряли с помощью анализа жизнеспособности люминесцентных клеток на третий, шесть, девятый и 12-й дни с базовым показанием на первый день после нанесения покрытия. Здесь показаны изображения яркого поля тех же органоидов, расширенных с течением времени.Некоторые линии органоидов, полученные от пациентов, имеют время удвоения два дня, в то время как некоторые занимают пять дней. Важно быть терпеливым с конкретными органоидными линиями, которые медленно устанавливаются. По нашему опыту, увеличение плотности покрытия или фильтрация мусора способствует росту PDO.Органоиды, полученные от пациентов, или PDO, являются отличными моделями для скрининга лекарств. Они моделируют межклеточные, а также межклеточные матричные взаимодействия, которые являются ключом к изучению патофизиологии рака. Кроме того, PDO могут подвергаться генетическим манипуляциям и могут использоваться для разработки ксенотрансплантатов в системах совместного культивирования, что делает их отличными моделями для механистических исследований.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Labeling of Breast Cancer Patient-derived Xenografts with Traceable Reporters for Tumor Growth and Metastasis Studies

Маркировку рака молочной железы на пациента получены ксенотрансплантатов с прослеживаемы Репортеров для опухолевого роста и метастазирования исследований

The use of preclinical models to study tumor biology and response to treatment is central to cancer research. Long-established human cell lines, and many ...

Establishment of a Primary Culture of Patient-derived Soft Tissue Sarcoma

Создание основной культуры саркомы мягких тканей, пациент производные

Soft tissue sarcomas (STS) represent a spectrum of heterogeneous malignancies with a difficult diagnosis, classification, and management. To date, more ...

Establishment of Gastric Cancer Patient-derived Xenograft Models and Primary Cell Lines

Создание желудка рака пациента полученных Ксенотрансплантат Модели и первичные линии клеток

The use of preclinical models to advance our understanding of tumor biology and investigate the efficacy of therapeutic agents is key to cancer research. ...

The Establishment and Utilization of Patient Derived Xenograft Models of Central Nervous System Metastasis

Создание и использование моделей ксенотрансплантатов, полученных от пациентов, для метастазирования в центральную нервную систему

The development of novel therapies for central nervous system (CNS) metastasis has been hindered by the lack of preclinical models that accurately ...

High-Throughput In Vitro Assay using Patient-Derived Tumor Organoids

High-Throughput In Vitro Assay using Patient-Derived Tumor Organoids

Высокопроизводительный анализ in vitro с использованием органоидов опухолей, полученных от пациента

Patient-derived tumor organoids (PDOs) are expected to be a preclinical cancer model with better reproducibility of disease than traditional cell culture ...

Profiling Sensitivity to Targeted Therapies in EGFR-Mutant NSCLC Patient-Derived Organoids

Профилирование чувствительности к таргетной терапии в органоидах EGFR-мутантного НМРЛ, полученных из пациента

Novel 3D cancer organoid cultures derived from clinical patient specimens represent an important model system to evaluate intratumor heterogeneity and ...

Generation and Culturing of High-Grade Serous Ovarian Cancer Patient-Derived Organoids

Генерация и культивирование высокодифференцированных серозных органоидов, полученных от пациентов с раком яичников

Organoids are 3D dynamic tumor models that can be grown successfully from patient-derived ovarian tumor tissue, ascites, or pleural fluid and aid in the ...

Establishment of Zebrafish Patient-Derived Xenografts from Pancreatic Cancer for Chemosensitivity Testing

Создание ксенотрансплантатов, полученных от пациентов с рыбками данио, из рака поджелудочной железы для тестирования на химиочувствительность

Cancer is one of the main causes of death worldwide, and the incidence of many types of cancer continues to increase. Much progress has been made in terms ...

Establishment and Characterization of Patient-Derived Xenograft Models of Anaplastic Thyroid Carcinoma and Head and Neck Squamous Cell Carcinoma

Создание и характеристика моделей ксенотрансплантатов анапластической карциномы щитовидной железы и плоскоклеточного рака головы и шеи

Patient-derived xenograft (PDX) models faithfully preserve the histological and genetic characteristics of the primary tumor and maintain its ...

Optimizing HCC Organoid Formation for Target Identification and Drug Development

Development and Optimization of A Human Hepatocellular Carcinoma Patient-Derived Organoid Model for Potential Target Identification and Drug Discovery

Author Spotlight: Investigating Liver Cancer Pathogenesis Using Patient-Derived Organoids 

Разработка и оптимизация модели органоида гепатоцеллюлярной карциномы человека, полученной от пациента, для идентификации потенциальных мишеней и поиска лекарств

Hepatocellular carcinoma (HCC) is a highly prevalent and lethal tumor worldwide and its late discovery and lack of effective specific therapeutic agents ...