Het protocol is belangrijk omdat het high-fidelity cardiale functionele monitoring mogelijk maakt in grote diermodellen voor de preklinische evaluatie van cardiovasculaire therapieën. Het belangrijkste voordeel van de techniek is om het mogelijk te maken voor de procedures zoals het opnemen van echocardiogrammen bij wakkere varkens zonder gebruik te maken van anesthetica. Greg Brown, co-ontwerper, Pia Balmaceda, postdoc fellow, en Thuy Ha, specialist van Nora Eccles Harrison Cardiovascular Research and Training Institute, demonstreren de procedure.
Begin met de voorraad drie planken, vooraf gemaakte heavy duty utility cart met vergrendelingswielen. Zaag de voor- en achterkant van de kar af. Vervang ze vervolgens door 1,25-inch PVC-buis en kettingschakelpoorten.
Versterk de kar met metalen staven aan de onderkant om de integriteit van de kar te behouden. Maak een gat aan de bovenkant van de kar dat groot genoeg is voor een hand die een ultrasone sonde vasthoudt. Plaats een plastic deksel dat op de opening is bevestigd.
Maak een versterkte metalen oprijplaat voor montage en demontage met behulp van aluminium materiaal. Voeg verwijderbare rubberen vulling toe voor grip met behulp van bouten en grommets. Plaats 12-inch lange, 3/8-inch pinnen in pvc-scharniermechanismen aan de linker- en rechterkant Inkepingzijrails om breedte-instellingen voor de zijpoorten mogelijk te maken om de terughoudendheid te verbeteren en te voorkomen dat het dier zich omdraait.
Voor het trainen van de varkens om uit de trog te eten, vult u deze met bevroren lekkernijen en verlengt u de statijd van de varkens. Gebruik combinaties van voedingsmiddelen zoals sap, maaltijdvervanger, yoghurt met ontbijtgranen en standaard chow, koekjes en fruitrepen. Normale maaltijden kunnen in plaats daarvan worden ingehouden en in de trog worden gevoerd tijdens de echocardiografieperiode.
Voordat ze van het apparaat aten, introduceerden de varkens bevroren behandelbakken op de grond om de erkenning van de trog als een hoogwaardige traktatieaanbieder aan te moedigen. Om de varkens te trainen om staande echocardiogrammen te accepteren, begint u met het varken aan de kar te introduceren door de kar gedurende één tot twee dagen te omringen met hoogwaardige lekkernijen. Introduceer het varken aan de oprit door een paar dagen traktaties langs de oprit te plaatsen.
Zorg voor extra beloningen wanneer een varken de helling oploopt. Zorg voor de bevroren traktatietroggen bij de voordeur gedurende twee tot drie dagen. Laat het varken op de kar staan zonder de zijsteunen of poorten in te schakelen.
Plaats binnen een paar dagen de ultrasone sonde met gel op het varken om het te laten wennen aan het sondecontact. Om echocardiogrambeelden te verkrijgen, maakt u afbeeldingen van de parasternale beeldvormingsvlakken van de zijkanten van de kar naar de rechter- en linkeroksels. Apicale weergave, B-modus en M-modus beelden kunnen worden verkregen door door de karvloer naar het subxiphoid-gebied te tasten.
Kort-assige, transversale weergave, M-modus beelden werden verkregen via de karzijden om de linker ventrikel interne diameter in systole en diastole en daaropvolgende ejectievolumeberekening te analyseren. De ejectiefractie gegenereerd door verdoofde echosessies was lager dan door bewuste sessies. Parasternale lange-asweergave B-modusbeelden werden gebruikt om de uitwerpvolumes te berekenen met de gebieds-/lengtemethode.
De ejectiefracties in zowel verdoofde als bewuste sessies waren vergelijkbaar. Een belangrijk ding om te onthouden is dat de kar moet worden gebouwd met de groeiende maten van dieren in gedachten. Individualisering van het voedselmengsel kan helpen de acclimatisatie te verbeteren.
De kar kan andere procedures vergemakkelijken, waaronder bloed dat wordt afgenomen van geïmplanteerde ooraderkatheters, elektrocardiogramopname en andere op echografie gebaseerde monitoring zoals abdominale echografie. Deze techniek biedt onderzoekers de mogelijkheid om high-fidelity belangrijke fysiologische gegevens te verkrijgen van wakkere varkens die worden gebruikt voor studies van verschillende menselijke ziekten.