Le protocole est important car il permet une surveillance fonctionnelle cardiaque haute fidélité dans de grands modèles animaux pour l’évaluation préclinique des thérapies cardiovasculaires. Le principal avantage de la technique est de permettre des procédures telles que l’enregistrement d’échocardiogrammes chez des porcs éveillés sans anesthésie. Greg Brown, co-concepteur, Pia Balmaceda, boursière postdoctorale, et Thuy Ha, spécialiste du Nora Eccles Harrison Cardiovascular Research and Training Institute, feront la démonstration de la procédure.
Commencez avec le chariot utilitaire préfabriqué à trois étagères de stock avec roues verrouillables. Scie à l’avant et à l’arrière du chariot. Ensuite, remplacez-les par des tuyaux en PVC de 1,25 pouce et des portes à mailles de chaîne.
Renforcez le chariot avec des barres métalliques sur les faces inférieures pour maintenir l’intégrité du chariot. Faites un trou sur le dessus du chariot assez grand pour accueillir une main tenant une sonde à ultrasons. Placez un couvercle en plastique ajusté à l’ouverture.
Créez une rampe en métal renforcé pour le montage et le démontage à l’aide d’une crosse en aluminium. Ajoutez un rembourrage en caoutchouc amovible pour l’adhérence à l’aide de boulons et d’œillets. Insérez des broches de 12 pouces de long et 3/8 de pouce dans les mécanismes de charnières en PVC des côtés gauche et droit Rails latéraux à encoche pour permettre les réglages de largeur des barrières latérales afin d’améliorer la retenue et d’empêcher l’animal de se retourner.
Pour entraîner les porcs à manger dans l’auge, remplissez-la de friandises congelées et prolongez le temps passé debout. Utilisez des combinaisons d’aliments tels que des jus, des boissons de substitution, du yogourt avec des céréales et des chow, des biscuits et des barres de fruits standard. Les repas normaux peuvent être retenus et nourris dans l’auge pendant la période d’échocardiographie à la place.
Avant de manger de l’engin, initier les porcs à des abreuvoirs de friandises congelés sur le sol pour encourager la reconnaissance de l’auge en tant que fournisseur de friandises de grande valeur. Pour entraîner les porcs à accepter les échocardiogrammes debout, commencez par introduire le porc dans le chariot en l’entourant de friandises de grande valeur pendant un à deux jours. Introduisez le cochon sur la rampe en plaçant des friandises le long de la rampe pendant quelques jours.
Offrez des récompenses supplémentaires lorsqu’un cochon monte la rampe. Fournir les abreuvoirs de friandises congelées à la porte d’entrée pendant deux à trois jours. Laissez le cochon se tenir debout sur le chariot sans engager ses dispositifs de retenue latéraux ou ses barrières.
Dans quelques jours, placez la sonde à ultrasons avec du gel sur le porc pour l’aider à s’habituer au contact de la sonde. Pour obtenir des images d’échocardiogramme, prenez des images des plans d’imagerie parasternale des côtés du chariot vers les aisselles droite et gauche. Les images en mode APICAL, en mode B et en mode M peuvent être obtenues en sondant à travers le plancher du chariot jusqu’à la région sous-xiphoïde.
Des images à axe court, à vue transversale, en mode M ont été obtenues à travers les côtés du chariot pour analyser le diamètre interne du ventricule gauche dans la systole et la diastole et le calcul ultérieur du volume d’éjection. La fraction d’éjection générée par les séances d’écho sous sédation était inférieure à celle des séances conscientes. Des images parasternales en mode B ont été utilisées pour calculer les volumes d’éjection avec la méthode surface/longueur.
Les fractions d’éjection dans les séances sous sédation et conscientes étaient similaires. Une chose importante à retenir est que le chariot doit être construit en tenant compte de la taille croissante des animaux. L’individualisation du mélange alimentaire peut aider à améliorer l’acclimatation.
Le chariot peut faciliter d’autres procédures, y compris le sang prélevé à partir de cathéters veineux implantés, l’enregistrement d’électrocardiogrammes et d’autres contrôles basés sur des ultrasons tels que l’échographie abdominale. Cette technique offre aux chercheurs la possibilité d’obtenir des données physiologiques clés de haute fidélité à partir de porcs éveillés utilisés pour des études sur diverses maladies humaines.
