Das Protokoll ist bedeutsam, da es eine hochgenaue Überwachung der Herzfunktion in Großtiermodellen für die präklinische Bewertung kardiovaskulärer Therapeutika ermöglicht. Der Hauptvorteil der Technik besteht darin, dass Verfahren wie die Aufzeichnung von Echokardiogrammen bei wachen Schweinen ohne Betäubung möglich sind. Greg Brown, Co-Designer, Pia Balmaceda, Postdoc-Stipendiatin, und Thuy Ha, Spezialistin vom Nora Eccles Harrison Cardiovascular Research and Training Institute, demonstrieren das Verfahren.
Beginnen Sie mit dem serienmäßigen, vorgefertigten Schwerlastwagen mit drei Regalböden und feststellbaren Rädern. Sägen Sie die Vorder- und Rückseite des Wagens ab. Ersetzen Sie sie dann durch 1,25-Zoll-PVC-Rohr- und Kettenglieder.
Verstärken Sie den Wagen mit Metallstangen an den Unterseiten, um die Unversehrtheit des Wagens zu erhalten. Machen Sie ein Loch auf der Oberseite des Wagens, das groß genug ist, um eine Hand aufzunehmen, die eine Ultraschallsonde hält. Setzen Sie eine Kunststoffabdeckung ein, die an der Öffnung angebracht ist.
Erstellen Sie eine verstärkte Metallrampe für die Montage und Demontage mit Aluminiumschaft. Fügen Sie eine herausnehmbare Gummipolsterung für den Halt mit Schrauben und Ösen hinzu. Setzen Sie 12-Zoll-Stifte mit 3/8-Zoll-Stiften in PVC-Scharniermechanismen auf der linken und rechten Seite ein Einkerbung der Seitenschienen, um die Breiteneinstellungen für die Seitentore zu ermöglichen, um die Rückhaltung zu verbessern und zu verhindern, dass sich das Tier umdreht.
Um den Schweinen beizubringen, aus dem Trog zu fressen, füllen Sie ihn mit gefrorenen Leckereien und verlängern Sie die Standzeit der Schweine. Verwenden Sie Kombinationen von Lebensmitteln wie Saft, Mahlzeitenersatzgetränk, Joghurt mit Müsli und Standard-Chow, Kekse und Fruchtriegel. Normale Mahlzeiten können während der Echokardiographie zurückgehalten und stattdessen in den Trog gefüttert werden.
Vor dem Fressen aus der Vorrichtung wurden die Schweine in gefrorene Leckerli-Tröge auf dem Boden eingeführt, um die Anerkennung des Trogs als hochwertigen Leckerli-Anbieter zu fördern. Um den Schweinen beizubringen, stehende Echokardiogramme zu akzeptieren, führen Sie das Schwein zunächst in den Wagen ein, indem Sie den Wagen ein bis zwei Tage lang mit hochwertigen Leckereien umgeben. Führen Sie das Schwein an die Rampe ein, indem Sie ein paar Tage lang Leckerlis entlang der Rampe platzieren.
Gewähren Sie zusätzliche Belohnungen, wenn ein Schwein die Rampe hinaufgeht. Stellen Sie die gefrorenen Leckerli-Tröge am Eingangstor für zwei bis drei Tage bereit. Lassen Sie das Schwein auf dem Wagen stehen, ohne die Seitenfesseln oder Tore zu betätigen.
Legen Sie in ein paar Tagen die Ultraschallsonde mit Gel auf das Schwein, damit es sich an den Sondenkontakt gewöhnen kann. Um Echokardiogramm-Bilder zu erhalten, nehmen Sie Bilder der parasternalen Bildgebungsebenen von den Seiten des Wagens zu den rechten und linken Achselhöhlen auf. Apikale Ansicht, B-Modus und M-Modus können durch Sondierung durch den Wagenboden in die subxiphoide Region aufgenommen werden.
Kurzachsen, transversale M-Mode-Bilder wurden durch die Wagenseiten aufgenommen, um den linksventrikulären Innendurchmesser in Systole und Diastole zu analysieren und das anschließende Auswurfvolumen zu berechnen. Die Ejektionsfraktion aus sedierten Echositzungen war geringer als aus bewussten Sitzungen. Zur Berechnung der Auswurfvolumina mit der Flächen-/Längenmethode wurden parasternale Längsachsenansichten der B-Mode verwendet.
Die Ejektionsfraktionen waren sowohl in sedierten als auch in bewussten Sitzungen ähnlich. Es ist wichtig, sich daran zu erinnern, dass der Wagen unter Berücksichtigung der wachsenden Größe von Tieren gebaut werden sollte. Eine Individualisierung der Futtermischung kann helfen, die Eingewöhnung zu verbessern.
Der Wagen kann andere Verfahren erleichtern, einschließlich Blutentnahme aus implantierten Ohrvenenkathetern, Elektrokardiogrammaufzeichnung und andere ultraschallbasierte Überwachungen wie Bauchultraschall. Diese Technik bietet Forschern die Möglichkeit, hochgenaue physiologische Schlüsseldaten von wachen Schweinen zu erhalten, die für Studien zu verschiedenen menschlichen Krankheiten verwendet werden.
