Протокол имеет большое значение, поскольку он позволяет проводить высокоточный функциональный мониторинг сердца на крупных животных моделях для доклинической оценки сердечно-сосудистой терапии. Основное преимущество методики заключается в том, что она позволяет проводить такие процедуры, как запись эхокардиограмм у бодрствующих свиней без использования анестетиков. Продемонстрируют процедуру Грег Браун, со-дизайнер, Пиа Бальмаседа, научный сотрудник постдока, и Туи Ха, специалист из Института сердечно-сосудистых исследований и обучения Норы Эклс Харрисон.
Начните со стандартной трехполочной, предварительно изготовленной сверхмощной универсальной тележки с фиксирующими колесами. Отпилили переднюю и заднюю часть тележки. Затем замените их 1.25-дюймовыми трубами из ПВХ и воротами из звеньев цепи.
Укрепите тележку металлическими стержнями на нижней стороне, чтобы сохранить целостность тележки. Сделайте отверстие в верхней части тележки, достаточно большое, чтобы вместить руку, держащую ультразвуковой датчик. Установите пластиковую крышку, установленную на проеме.
Создайте усиленную металлическую рампу для монтажа и демонтажа с помощью алюминиевого приклада. Добавьте съемную резиновую прокладку для захвата с помощью болтов и люверсов. Вставьте штифты длиной 12 дюймов и 3/8 дюйма в левосторонний и правый шарнирные механизмы из ПВХ. Боковые направляющие с надрезом, чтобы включить регулировку ширины боковых ворот, чтобы улучшить удержание и предотвратить разворот животного.
Чтобы приучить свиней есть из кормушки, наполните ее замороженными лакомствами и продлите время стояния свиней. Используйте комбинации таких продуктов, как сок, напиток-заменитель еды, йогурт с хлопьями, а также стандартный чау-чау, печенье и фруктовые батончики. Вместо этого нормальная пища может быть приостановлена и скармливаться в кормушке в период эхокардиографии.
Перед тем, как съесть из хитроумной штуковины, познакомили свиней с замороженными кормушками на земле, чтобы способствовать признанию кормушки в качестве ценного поставщика лакомств. Чтобы научить свиней принимать стоячие эхокардиограммы, начните с введения свиньи в тележку, окружив тележку ценными лакомствами в течение одного-двух дней. Познакомьте свинью с пандусом, разместив лакомства вдоль пандуса на пару дней.
Предоставляйте дополнительные награды, когда свинья поднимается по пандусу. Обеспечьте замороженные кормушки для угощений у входных ворот на два-три дня. Позвольте свинье стоять на тележке, не зацепляя ее боковые ограничители или ворота.
Через пару дней поместите ультразвуковой датчик с гелем на свинью, чтобы помочь ей привыкнуть к контакту с датчиком. Чтобы получить изображения эхокардиограммы, сделайте снимки плоскостей парастернальной визуализации с боков тележки до правой и левой подмышечных впадин. Изображения апикального вида, B-режима и M-режима можно получить, прощупав пол тележки до субксифоидной области.
По бокам тележки были получены изображения короткой оси, поперечного обзора, М-режима для анализа внутреннего диаметра левого желудочка в систоле и диастоле и последующего расчета объема выброса. Фракция выброса, генерируемая седативными эхо-сессиями, была ниже, чем при сеансах сознания. Для расчета объемов выброса методом «площадь/длина» использовались изображения B-режима парастернального вида с длинной осью.
Фракции выброса как в седативных, так и в сознательных сеансах были одинаковыми. Важно помнить, что тележка должна быть построена с учетом растущих размеров животных. Индивидуализация пищевой смеси может помочь улучшить акклиматизацию.
Тележка может облегчить другие процедуры, включая кровь, взятую из имплантированных катетеров ушной вены, запись электрокардиограммы и другой ультразвуковой мониторинг, такой как УЗИ брюшной полости. Этот метод дает исследователям возможность получить высокоточные ключевые физиологические данные от бодрствующих свиней, используемых для изучения различных заболеваний человека.
