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•
08:50 min
May 12th, 2023
DOI :
10.3791/65137-v
Chapters
0:04
Introduction
0:59
Apparatus Construction
2:36
Flow Cell Fabrication
3:50
Assembly of Bead‐Tether Constructs
4:20
Identification of Target Constructs
5:00
Calibration of Magnetic Force
5:50
Bead Tracking for Extension Measurement
6:28
Results: Effect of Magnetic Force on DNA Constructs
8:11
Conclusion
Transcript
生物分子经常在力的作用下经历小而快速的结构变化。高分辨率磁镊可以在生理相关力下探索这些动力学。由于该方法以毫秒级精度进行纳米级测量,因此可以实时监测核酸和蛋白质的细微变化。
第一轴承和机械敏感蛋白的缺陷可能导致心血管和肌肉骨骼疾病。磁性镊子可以深入了解这些蛋白质的工作机制。必须正确对齐和校准该装置以获得良好的分辨率。
此外,在制备和鉴定用于测量的分子构建体时必须小心。首先在防振光学台上设置倒置显微镜。接下来,安装高速CMOS相机和图像采集卡。
在手动XY
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Summary
在这里,我们描述了一种高速磁镊装置,该装置以最大1.2 kHz的速率对力敏生物分子进行纳米力学测量。我们将它作为模型系统介绍其在DNA发夹和SNARE复合物中的应用,但它也适用于参与机械生物学事件的其他分子。
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