Name: in situ imaging of the mouse thymus using 2-photon microscopy
Uploaded: 2008-01-25T19:52:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In situ Imaging of the Mouse Thymus Using 2-Photon Microscopy at JoVE.com

نشكر مات بول وجيمي وو للمساعدة التقنية.

نقل بالتبني حقن الولدان مع 50 100ul من نخاع العظام باستخدام حقنة الانسولين 2-4 مرات خلال الأيام 3-7 الأولى من الحياة ، مع نسبة المانحة إلى المضيف النهائي 1:1. تهدف لموقع الحقن تحت القص والقفص الصدري ، ولكن قبل الأمعاء والمعدة. ادخال الإبرة بعيدا بما ف?...

<ol>
	<li>Kyewski, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seeding+of+thymic+microenvironments+defined+by+distinct+thymocyte-stromal+cell+interactions+is+developmentally+controlled.">Seeding of thymic microenvironments defined by distinct thymocyte-stromal cell interactions is developmentally controlled.</a> J Exp Med. 166, 520-538 (1987).</li><li>Ladi, E., Yin, X., Chtanova, T., Robey, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thymic+microenvironments+for+T+cell+differentiation+and+selection.">Thymic microenvironments for T cell differentiation and selection.</a> Nat Immunol. 7, 338-343 (2006).</li><li>Witt, C. M., Raychaudhuri, S., Schaefer, B., Chakraborty, A. K., Robey, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directed+Migration+of+Positively+Selected+Thymocytes+Visualized+in+Real+Time.">Directed Migration of Positively Selected Thymocytes Visualized in Real Time.</a> PLoS Biol. 3, (2005).</li></ol>

التصوير ثنائي الفوتون في الغدة الصعترية تمكننا من النظر في الهيئات ، الذين يعيشون على حالها والتفاعلات والأحداث التي تكمن وراء الهجرات الاختيار داخل الغدة الصعترية.

in situ imaging of the mouse thymus using 2-photon microscopy

الميكروسكوب ثنائي الفوتون (TPM) يتيح لنا صورة عميقة في الغدة الصعترية وتوثيق الأحداث التي تعتبر مهمة لتطوير خلية توتية. لمتابعة هجرة الأفراد في حشد من thymocytes ، فإننا توليد الوهم حديثي الولادة حيث يتم استخلاص أقل من واحد في المئة من thymocytes من الجهات المانحة التي تم المعدلة وراثيا لبروتين فلوري أعرب بتواجد مطلق. لإنشاء هذه الجزئية hematopoetic الوهم ، يتم حقن الأطفال حديثي الولادة مع متلقي نخاع العظم بين 3-7 أيام من العمر. بعد 4-6 أسابيع ، يتم التضحية الماوس ويتم تشريح بعناية التوتة bissected والحفاظ على بنية النسيج التي سيتم تصويرها. يتم لصقها الغدة الصعترية في الصعود إلى ساترة استعدادا للخارج الجسم بواسطة التصوير TPM. أثناء التصوير يتم الاحتفاظ بها في الغدة الصعترية DMEM دون الحمراء الفينول التي perfused مع الأكسجين 95 ٪ و 5 ٪ ثاني أكسيد الكربون ودرجة حرارة إلى 37 درجة مئوية. باستخدام هذا النهج ، يمكننا دراسة الأحداث اللازمة لجيل من ذخيرة متنوعة الخلايا التائية.

Watch this Scientific Journal Video about In situ Imaging of the Mouse Thymus Using 2-Photon Microscopy at JoVE.com

In situ Imaging of the Mouse Thymus Using 2-Photon Microscopy

نقدم خطوة بخطوة تعليمات لتوليد الوهم حديثي الولادة ، فضلا عن تشريح وإعداد الغدة الصعترية لخارج الجسم بواسطة التصوير 2 - فوتون الميكروسكوب.

التصوير في الموقع من الغدة الصعترية ماوس باستخدام الميكروسكوب 2 فوتون

Two-photon Microscopy (TPM) enables us to image deep into the thymus and document the events that are important for thymocyte development.  To follow the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection and 2-Photon Imaging of Peripheral Lymph Nodes in Mice

تشريح و 2 الفوتون التصوير من العقد الليمفاوية الطرفية في الفئران

Two-photon imaging has revealed an elegant choreography of motility and cellular interactions within the lymph node under basal conditions and at the ...

A Method for 2-Photon Imaging of Blood Flow in the Neocortex through a Cranial Window

A - 2 لأسلوب التصوير فوتون من تدفق الدم في القشرة المخية الحديثة من خلال نافذة القحف

The ability to image the cerebral vasculature (from large vessels to capillaries) and record blood flow dynamics in the intact brain of living rodents is ...

In Vivo 2-Photon Calcium Imaging in Layer 2/3 of Mice

في فيفو 2 فوتون التصوير الكالسيوم في طبقة 2 / 3 من الفئران

To understand network dynamics of microcircuits in the neocortex, it is essential to simultaneously record the activity of a large number of neurons .  ...

Generation of Bone Marrow Derived Murine Dendritic Cells for Use in 2-photon Imaging

جيل من نخاع عظام الفئران الخلايا الجذعية المشتقة للاستخدام في 2 الفوتون التصوير

Several methods for the preparation of murine dendritic cells can be found in the literature. Here, we present a method that produces greater than 85% ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

في الجسم الحي التصوير والعلاجات العلاجية في الفأر نموذج مثلي من سرطان المبيض

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

التصور والتحليل من جزيئات الرنا المرسال عن طريق الإسفار<em&gt; في الموضع</em&gt; التهجين في<em&gt; خميرة الخباز</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

في فيفو تتبع 4 الأبعاد للالجذعية المكونة للدم والسلف الكبار في خلايا الفأر قبي نخاع العظم

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Detection and Analysis of DNA Damage in Mouse Skeletal Muscle In Situ Using the TUNEL Method

Detection and Analysis of DNA Damage in Mouse Skeletal Muscle In Situ Using the TUNEL Method

كشف وتحليل الحمض النووي من التلف في العضلات الهيكلية ماوس<em&gt; في الموقع</em&gt; استخدام أسلوب TUNEL

Terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) deoxyuridine triphosphate (dUTP) nick end labeling (TUNEL) is the method of using the TdT enzyme to covalently ...

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

قياس صلابة من<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; ماوس Aortas باستخدام مجهر القوة الذرية

Arterial stiffening is a significant risk factor and biomarker for cardiovascular disease and a hallmark of aging. Atomic force microscopy (AFM) is a ...

Micropuncture of Bowman's Space in Mice Facilitated by 2 Photon Microscopy

ميكروبونكتوري الفضاء بومان في الفئران التي يسرتها 2 فوتون مجهرية

Renal micropuncture and renal 2-photon imaging are seminal techniques in renal physiology. However, micropuncture is limited by dependence on conventional ...