Name: in situ imaging of the mouse thymus using 2-photon microscopy
Uploaded: 2008-01-25T19:52:00
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我々は技術支援のためにマットポールとジミー呉に感謝。

養子免疫伝達 1:1の最終的なドナーとホスト間の比で、人生の最初の3-7日中にインスリン注射器の2-4倍を使用して骨髄の50 - 100ulで新生児を注入する。胸骨や胸郭の下注射部位のため、しかし、腸や胃上記の目的。十分ではない穿刺ダイアフラムに注意して腹膜を貫通する針を挿入します。それは、骨髄の一部が注入中に失われることは珍しくありません。もし皮膚が徐々に針を除去、その?...

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	<li>Kyewski, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seeding+of+thymic+microenvironments+defined+by+distinct+thymocyte-stromal+cell+interactions+is+developmentally+controlled.">Seeding of thymic microenvironments defined by distinct thymocyte-stromal cell interactions is developmentally controlled.</a> J Exp Med. 166, 520-538 (1987).</li><li>Ladi, E., Yin, X., Chtanova, T., Robey, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thymic+microenvironments+for+T+cell+differentiation+and+selection.">Thymic microenvironments for T cell differentiation and selection.</a> Nat Immunol. 7, 338-343 (2006).</li><li>Witt, C. M., Raychaudhuri, S., Schaefer, B., Chakraborty, A. K., Robey, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directed+Migration+of+Positively+Selected+Thymocytes+Visualized+in+Real+Time.">Directed Migration of Positively Selected Thymocytes Visualized in Real Time.</a> PLoS Biol. 3, (2005).</li></ol>

胸腺における二光子イメージングには、リビング、無傷の器官の相互作用および胸腺内選択イベントの根底に移行で検討することを可能にしています。

in situ imaging of the mouse thymus using 2-photon microscopy

二光子顕微鏡（TPM）は、胸腺および文書胸腺細胞の開発にとって重要なイベントへの深い画像を可能にしています。胸腺細胞の群衆の中に個人の移行を追跡するには、我々は、胸腺細胞の1％未満が普遍的に蛍光タンパク質を発現するトランスジェニックであるドナーに由来している新生児キメラを生成する。これらの部分的な造血キメラを生成するには、新生児の受信者は、年齢の3-7日の間に骨髄を注入されています。 4-6週間後、マウスは屠殺され、胸腺は慎重に解剖され、イメージ化される組織のアーキテクチャを維持bissected。胸腺は、TPMによるex vivoでのイメージングの準備のためにカバースリップの上に接着される。撮像中に胸腺は95％酸素、5％の二酸化炭素で灌流して37に加温するフェノールレッド℃にすることなくDMEMで維持されますこのアプローチを使用して、我々は多様なT細胞のレパートリーの生成に必要なイベントを調べることができます。

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In situ Imaging of the Mouse Thymus Using 2-Photon Microscopy

我々は、新生児キメラの世代だけでなく、2光子顕微鏡によるex vivoでのイメージングのための胸腺の解剖と準備のためのステップバイステップの手順を提示する。

2光子顕微鏡を用いたマウスの胸腺のその場イメージングで

Two-photon Microscopy (TPM) enables us to image deep into the thymus and document the events that are important for thymocyte development.  To follow the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection and 2-Photon Imaging of Peripheral Lymph Nodes in Mice

解剖とマウスの末梢リンパ節の2 - フォトンイメージング

Two-photon imaging has revealed an elegant choreography of motility and cellular interactions within the lymph node under basal conditions and at the ...

A Method for 2-Photon Imaging of Blood Flow in the Neocortex through a Cranial Window

頭蓋窓を介して新皮質の血流の2光子イメージングのための方法

The ability to image the cerebral vasculature (from large vessels to capillaries) and record blood flow dynamics in the intact brain of living rodents is ...

In Vivo 2-Photon Calcium Imaging in Layer 2/3 of Mice

レイヤーin vivoでの2光子カルシウムイメージングマウスの2 / 3

To understand network dynamics of microcircuits in the neocortex, it is essential to simultaneously record the activity of a large number of neurons .  ...

Generation of Bone Marrow Derived Murine Dendritic Cells for Use in 2-photon Imaging

2光子イメージングで使用するための骨髄由来マウス樹状細胞の世代

Several methods for the preparation of murine dendritic cells can be found in the literature. Here, we present a method that produces greater than 85% ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

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生体イメージングおよび卵巣癌の同所性マウスモデルにおける治療的処置の

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

蛍光を用いたmRNA分子の可視化と分析<em&gt;その場で</emで&gt;ハイブリダイゼーション<em&gt;サッカロミセス·セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae）</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

成体マウス頭蓋冠骨髄中の造血幹細胞および前駆細胞のin vivo 4次元トラッキングで

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Detection and Analysis of DNA Damage in Mouse Skeletal Muscle In Situ Using the TUNEL Method

Detection and Analysis of DNA Damage in Mouse Skeletal Muscle In Situ Using the TUNEL Method

マウス骨格筋におけるDNA損傷の検出と分析<em&gt;その場で</em&gt; TUNEL法を用いた

Terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) deoxyuridine triphosphate (dUTP) nick end labeling (TUNEL) is the method of using the TdT enzyme to covalently ...

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

の剛性を測定します<em&gt; ex vivoで</em原子間力顕微鏡を使用&gt;マウス大動脈

Arterial stiffening is a significant risk factor and biomarker for cardiovascular disease and a hallmark of aging. Atomic force microscopy (AFM) is a ...

Micropuncture of Bowman's Space in Mice Facilitated by 2 Photon Microscopy

2 光子顕微鏡による促進マウス Bowman 腔のそれによって

Renal micropuncture and renal 2-photon imaging are seminal techniques in renal physiology. However, micropuncture is limited by dependence on conventional ...