Name: in situ imaging of the mouse thymus using 2-photon microscopy
Uploaded: 2008-01-25T19:52:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In situ Imaging of the Mouse Thymus Using 2-Photon Microscopy at JoVE.com

Мы благодарим Мэтта Павел и Джимми Ву для оказания технической помощи.

Приемные Трансфер Inject новорожденных с 50-100 мкл костного мозга использованием инсулиновый шприц 2-4 раза в течение первых 3-7 дней жизни, с окончательным донор-хост соотношении 1:1. Стремитесь к инъекции ниже грудины и грудной клетки, но, прежде кишки и желудка. Вставьте иглу достаточно да...

<ol>
	<li>Kyewski, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seeding+of+thymic+microenvironments+defined+by+distinct+thymocyte-stromal+cell+interactions+is+developmentally+controlled.">Seeding of thymic microenvironments defined by distinct thymocyte-stromal cell interactions is developmentally controlled.</a> J Exp Med. 166, 520-538 (1987).</li><li>Ladi, E., Yin, X., Chtanova, T., Robey, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thymic+microenvironments+for+T+cell+differentiation+and+selection.">Thymic microenvironments for T cell differentiation and selection.</a> Nat Immunol. 7, 338-343 (2006).</li><li>Witt, C. M., Raychaudhuri, S., Schaefer, B., Chakraborty, A. K., Robey, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directed+Migration+of+Positively+Selected+Thymocytes+Visualized+in+Real+Time.">Directed Migration of Positively Selected Thymocytes Visualized in Real Time.</a> PLoS Biol. 3, (2005).</li></ol>

Двухфотонное изображений в тимуса позволяет рассматривать в живых, неповрежденных органов взаимодействия и миграции, которые лежат в основе выбора события в тимусе.

in situ imaging of the mouse thymus using 2-photon microscopy

Двухфотонное микроскопия (TPM) позволяет нам образ глубоко в вилочковой железе и документировать события, которые имеют важное значение для развития тимоцитов. Для выполнения миграции физических лиц в толпе тимоцитов, мы генерируем новорожденных химерами, где менее чем один процент тимоцитов являются производными от донора, для трансгенных повсеместно выражают флуоресцентного белка. Для создания этих частичных кроветворения химеры, неонатальной получателей вводят костного мозга от 3-7 дней от роду. После 4-6 недель, мыши приносится в жертву и тимуса тщательно расчленены и bissected сохраняя архитектуру ткани, которая будет в образ. Тимус наклеиваются на покровное в рамках подготовки к бывшим естественных изображений по TPM. Во время визуализации тимус хранится в DMEM без фенола красного, который перфузии с 95% кислорода и 5% углекислого газа и нагревают до 37 ° C. Используя этот подход, мы можем изучать события, необходимые для генерации разнообразный репертуар Т-клеток.

Watch this Scientific Journal Video about In situ Imaging of the Mouse Thymus Using 2-Photon Microscopy at JoVE.com

In situ Imaging of the Mouse Thymus Using 2-Photon Microscopy

Мы представляем шаг за шагом инструкции для поколения новорожденных химерами, а также вскрытие и подготовка тимуса для бывших естественных изображений на 2-Фотон микроскопии.

Натурные съемки Мышь Thymus Использование 2-Фотон микроскопии

Two-photon Microscopy (TPM) enables us to image deep into the thymus and document the events that are important for thymocyte development.  To follow the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection and 2-Photon Imaging of Peripheral Lymph Nodes in Mice

Разбор и 2-Фотон изображений периферических лимфатических узлов у мышей

Two-photon imaging has revealed an elegant choreography of motility and cellular interactions within the lymph node under basal conditions and at the ...

A Method for 2-Photon Imaging of Blood Flow in the Neocortex through a Cranial Window

Метод 2-Фотон изображений кровотока в коре головного мозга через черепной Window

The ability to image the cerebral vasculature (from large vessels to capillaries) and record blood flow dynamics in the intact brain of living rodents is ...

In Vivo 2-Photon Calcium Imaging in Layer 2/3 of Mice

В Vivo 2-Фотон изображений кальция на уровне 2 / 3 от мышей

To understand network dynamics of microcircuits in the neocortex, it is essential to simultaneously record the activity of a large number of neurons .  ...

Generation of Bone Marrow Derived Murine Dendritic Cells for Use in 2-photon Imaging

Генерация костного мозга мышей Производные дендритных клеток для использования в 2-фотонных изображений

Several methods for the preparation of murine dendritic cells can be found in the literature. Here, we present a method that produces greater than 85% ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

В естественных изображений и лечебных процедур в Ортотопическая мышиной модели рака яичников

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Визуализации и анализа молекул мРНК с помощью флуоресцентной<em&gt; В Ситу</em&gt; Гибридизация в<em&gt; Saccharomyces CEREVISIAE</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

В Vivo 4-мерном Tracking гемопоэтических стволовых и клеток-предшественников в взрослой мыши свода черепа костного мозга

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Detection and Analysis of DNA Damage in Mouse Skeletal Muscle In Situ Using the TUNEL Method

Detection and Analysis of DNA Damage in Mouse Skeletal Muscle In Situ Using the TUNEL Method

Выявление и анализ повреждений ДНК в клетках мышиной скелетных мышц<em&gt; На месте</em&gt; Использование Тюнеля метод

Terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) deoxyuridine triphosphate (dUTP) nick end labeling (TUNEL) is the method of using the TdT enzyme to covalently ...

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

Измерение Жесткость<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Аорте при помощи мыши атомно-силовой микроскопии

Arterial stiffening is a significant risk factor and biomarker for cardiovascular disease and a hallmark of aging. Atomic force microscopy (AFM) is a ...

Micropuncture of Bowman's Space in Mice Facilitated by 2 Photon Microscopy

Micropuncture боуменова пространства в мышей, облегчается 2 фотона микроскопия

Renal micropuncture and renal 2-photon imaging are seminal techniques in renal physiology. However, micropuncture is limited by dependence on conventional ...