Retro-orbital injektion er en specialiseret injektionsmetode, der anvendes til at administrere forbindelser i venøs cirkulation. Dyreforskning er et vigtigt skridt i retning af klinisk arbejde. Som led i dyreforsøg er der behov for at administrere forskellige typer forbindelser via forskellige ruter.
Nogle af disse ruter omfatter subkutan, intraperitoneal og intravenøs. Intravenøs injektion er den mest almindeligt anvendte vej hos nyfødte, der er i den nyfødte intensivafdeling. Men i gnaverforskning, især hos voksne gnavere, udføres IV-injektioner rutinemæssigt på halevenen.
Hos nyfødte er det ekstremt vanskeligt at udføre en haleveneinjektion med succes og reproducerbart. Derfor kan retro-orbitalruten bruges som et lettere alternativ. For det første vil vi demonstrere at bruge et farvestof, trypanblåt, så seeren tydeligt kan se farvestoffet komme ind i venøs cirkulation.
Den neonatale rotte placeres under fuld bedøvelse, med hovedet liggende på sin side og hviler over en lyskilde, så øjet og lateral vaskulatur er udsat og synlig. Nålen indsættes foran på øjenhulen, svarende til den mediale canthus. Injicer opløsningen i en blid, glat og flydende bevægelse.
For bedre at reproducere denne procedure er det vigtigt at forstå den orbitale venøse anatomi. Hos rotten er der et netværk af flere vener lige under øjet, som giver nem og direkte adgang til venøs plexus. I neonatal albino rotte er det også synligt både de overfladiske temporale og ansigtsvener.
Denne procedure kan udføres på nøjagtig samme måde. Hos nyfødte mus. Brug en nål med 29 til 31 gauge omkring 0,30 millimeter.
For at opnå nøjagtige volumener tegnes opløsningen, der skal injiceres, fra et pipettet volumen. Placer dyrene på en plan overflade i lateral liggende. Inducer isofluranbedøvelse i hele kroppen.
5%induktion, 3%vedligeholdelse. Kontroller dybden af anæstesi ved hjælp af trækudtagningsrefleksmetoden. Med hovedet vendt mod højre skal du administrere injektionen i den højre retro-orbitale sinus.
Indsæt nålen skrå ned foran på øjenhulen, svarende til den midterste kant, i en vinkel på ca. 40 grader. Denne vinkel gør det muligt at rette nålen mod bagsiden af øjets kredsløb. Injicer i en blid, jævn og flydende bevægelse.
Vent et kort øjeblik, før du trækker nålen langsomt ud for at undgå tilbagestrømning. Brug en ny steril sprøjte til hvert dyr for at undgå kontaminering. Placer hvalpen i genopretningsboksen, hvilet på en beskyttet opvarmningsenhed, omkring 35 til 37 grader Celsius.
Vent på genopretningen, og kontroller for tegn på nød, før du returnerer hvalpen til dæmningen. Denne teknik blev brugt til at administrere sporstoffet biotin-dextran i vaskulaturen i hjernen hos dyr, der har gennemgået germinal matrixblødning. Dyr, der fik en saltvandsinjektion som kontrol, viser ingen synlig farvning af vaskulaturen i hjernen.
Vellykket retro-orbital injektion af biotin-dextransporeren tillod vurdering af dets tilstedeværelse i hjernevaskulaturen inden for 10 minutter efter retro-orbital administration. Denne teknik blev derefter brugt til at detektere sporstoffets vaskulære lækage på det individuelle blodkarniveau hos de GMH-skadede dyr. Dette resultat gør det f.eks. muligt at kvantificere skaden ved at kvantificere mængden af blodkar, der lækker efter GMH-hjerneskade.
Derudover kan denne procedure også udføres uden lyskilde, hvilket gør det til en enkel, ligetil og reproducerbar teknik, der tillader sammensat administration direkte i venøs cirkulation hos neonatale rotter og mus. Når det udføres korrekt, bør denne procedure ikke resultere i nogen bivirkninger. Denne administrationsrod tillader injektioner af antistoffer, celler og andre forbindelser direkte ind i venalcirkulationen hos nyfødte dyr.
Denne vej er af større klinisk relevans sammenlignet med andre veje, såsom intraperitoneale eller subkutane injektioner.
